人细小病毒B19 NS1片段全长的克隆及表达 被引量：2

1

作者 汤雪晴 张国成 +2 位作者 许东亮 陈彩萍 李飚 《医学研究生学报》 CAS 2003年第7期483-486,共4页

目的 :克隆人细小病毒B1 9非结构蛋白 1 (NS1 )全长基因 ,构建重组表达载体并诱导表达。　方法 :利用聚合酶链反应 (PCR)和分子克隆技术 ,从我科保存的B1 9阳性标本XA2 0中扩增NS1片段全长 ,构建NS1 pGEM T easy克隆载体并测序分析 ,... 目的 :克隆人细小病毒B1 9非结构蛋白 1 (NS1 )全长基因 ,构建重组表达载体并诱导表达。　方法 :利用聚合酶链反应 (PCR)和分子克隆技术 ,从我科保存的B1 9阳性标本XA2 0中扩增NS1片段全长 ,构建NS1 pGEM T easy克隆载体并测序分析 ,测序证实序列正确后亚克隆于pQE30表达载体中 ,并转化至M1 5感受态菌中 ,经IPTG诱导可表达 770 0 0的融合蛋白。　结果 :成功克隆了人细小病毒B1 9NS1全长基因 ,构建了融合蛋白NS1 pQE30的重组表达质粒 ,表达的融合蛋白经 1 2 %SDS PAGE电泳证实为 770 0 0。　结论 :获得人细小病毒B1 9NS1全长基因及原核表达产物 ,对进一步研究NS1的生物学活性及其单克隆抗体的制备有重要意义。 展开更多

关键词 人细小病毒B19 非结构蛋白1 基因 克隆 表达

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人细小病毒B19中国株结构蛋白VP1的克隆及表达 被引量：1

2

作者 陈彩平 张国成 +5 位作者 许东亮 汪萍 李茹英 黄莹 盛凯 李飚 《医学研究生学报》 CAS 2004年第5期385-387,共3页

目的 :构建人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的重组表达载体 ,探索大量表达VP1蛋白的最佳条件。　方法 :从该科保存的人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的重组克隆载体中获得VP1基因片段 ,将该片段亚克隆入表达载体pQE 3... 目的 :构建人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的重组表达载体 ,探索大量表达VP1蛋白的最佳条件。　方法 :从该科保存的人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的重组克隆载体中获得VP1基因片段 ,将该片段亚克隆入表达载体pQE 30 ,构建VP1 pQE 30原核表达载体 ,并转化至感受态大肠杆菌M1 5中 ,给予不同浓度诱导剂异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)及在不同温度下进行诱导表达。　 结果 :成功构建了融合蛋白VP1 pQE 30的重组表达质粒 ,表达的融合蛋白经 1 5 %SDS PAGE电泳证实其相对分子质量为 2 2 0 0 0。IPTG浓度为 1mmol/L ,诱导表达 5h ,37℃下无表达 ,2 5℃下有表达 ;采用不同的IPTG浓度诱导表达 5h ,0 .0 5mmol/L至 1mmol/L均有表达 ,表达率相近 ,为 (1 6± 1 ) %。　结论 :获得人细小病毒B1 9中国株结构蛋白VP1基因片段的原核表达载体及其产物 。 展开更多

关键词 人细小病毒B19 VP1基因片段 载体构建 诱导表达

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人细小病毒B19 XA株VP1蛋白原核表达及初步鉴定 被引量：1

3

作者 李小青 张国成 +1 位作者 许东亮 李志宏 《医学研究生学报》 CAS 2008年第11期1124-1127,共4页

目的:通过DNA重组技术,构建B19病毒XA株VP1全长基因表达载体,诱导重组VP1融合蛋白表达。方法:自B19病毒感染患者血清中提取病毒DNA为模板,用PCR法扩增编码VP1蛋白的全长基因片段,以pET28(a)为表达载体,构建重组表达质粒pET28(a)-VP1,转... 目的:通过DNA重组技术,构建B19病毒XA株VP1全长基因表达载体,诱导重组VP1融合蛋白表达。方法:自B19病毒感染患者血清中提取病毒DNA为模板,用PCR法扩增编码VP1蛋白的全长基因片段,以pET28(a)为表达载体,构建重组表达质粒pET28(a)-VP1,转化E.coli.BL21(DE3),获得重组工程菌株。经IPTG诱导培养获得高效表达的VP1融合蛋白,SDS-PAGE、免疫印迹鉴定表达产物;并以该重组融合蛋白为抗原,免疫家兔,ELISA法检测所获抗体效价。结果:①获得了含重组表达质粒pET28(a)-VP1的正相阳性工程菌株,经IPTG诱导能高效表达VP1融合蛋白。②经ELISA法检测抗VP1多克隆抗体效价为1∶12 800。结论:重组工程菌可表达VP1融合蛋白,且该蛋白具有良好的免疫原性,对诊断试剂制备及疫苗研制具有重要意义。 展开更多

关键词 人细小病毒B19 VP1蛋白 表达载体 免疫原性

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石蜡包埋淋巴结组织中人细小病毒B19DNA的检测研究

4

作者 焦丽 张国成 +2 位作者 郭新莉 陈靖 何君宏 《中国小儿血液》 2003年第1期17-18,共2页

探讨人细小病毒B1 9(B1 9)与恶性淋巴瘤的相关性 ,以了解此类患儿B1 9DNA的感染状况。我们采用巢式聚合酶链反应 (PCR)技术对 2 9例恶性淋巴瘤及2 0例结核性淋巴结炎石蜡包埋淋巴结组织进行B1 9DNA检测。结果显示恶性淋巴瘤检出B1 9DNA ... 探讨人细小病毒B1 9(B1 9)与恶性淋巴瘤的相关性 ,以了解此类患儿B1 9DNA的感染状况。我们采用巢式聚合酶链反应 (PCR)技术对 2 9例恶性淋巴瘤及2 0例结核性淋巴结炎石蜡包埋淋巴结组织进行B1 9DNA检测。结果显示恶性淋巴瘤检出B1 9DNA 7例 ,阳性率 2 4 1 % ;结核性淋巴结炎均为阴性 ,经统计学检验有显著性差异。表明人细小病素B1 9可以感染恶性淋巴瘤患儿淋巴结 ,恶性淋巴瘤患儿可能是B1 9病毒易感群体 。 展开更多

关键词 活检 淋巴结 人细小病毒B19 恶性淋巴瘤

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孕早期人细小病毒B19感染与血清hCG、hPL水平变化的关系 被引量：4

5

作者 周惠玲 张纯 +3 位作者 张国群 程秀华 刘丽萍 甘燕玲 《山东医药》 CAS 2013年第19期36-38,共3页

目的探讨孕早期人细小病毒B19感染与血清人绒毛膜促性腺激素(hCG)、人胎盘生乳素(hPL)水平变化的关系。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测294例孕早期人工流产孕妇(其中阳性22例,阴性272例)血清中人细小病毒B19抗体IgM(HPVB19-IgM)... 目的探讨孕早期人细小病毒B19感染与血清人绒毛膜促性腺激素(hCG)、人胎盘生乳素(hPL)水平变化的关系。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测294例孕早期人工流产孕妇(其中阳性22例,阴性272例)血清中人细小病毒B19抗体IgM(HPVB19-IgM)及IgG的含量,根据血清HPVB19-IgM检测结果,将所有患者分为阳性组(22例)及阴性组(272例),采用ELISA和MIROELISA法检测其相应外周血血清中hCG、hPL水平。结果孕早期人工流产孕妇HPVB19-IgM阳性者血清中hCG为(83.19±32.69)mIU/mL,阴性组为(106.68±43.26)mIU/mL,两组比较,P<0.05;阳性组血清中hPL为(51.06±40.63)ng/mL,阴性组为(75.49±53.17)ng/mL,两组比较,P<0.05。结论孕早期人细小病毒B19感染可减少hCG、hPL的分泌量,这可能是孕早期HPVB19感染引起不良妊娠结局的生殖内分泌基础。 展开更多

关键词 人细小病毒B19 绒毛膜促性腺激素 胎盘生乳素

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血液制品中人细小病毒B19基因的检测与分析 被引量：4

6

作者 郑荣斌 余燕 《中国医药科学》 2015年第13期151-153,共3页

目的检测血液制品及原料血浆中人细小病毒B19,分析污染状况,以评估人细小病毒B19危险性。方法对单人原料血浆、混合原料血浆、4种类型的血液制品提取核酸后分别进行B19病毒核酸实时定量PCR检测筛查,对筛查结果进行数据统计分析。结果实... 目的检测血液制品及原料血浆中人细小病毒B19,分析污染状况,以评估人细小病毒B19危险性。方法对单人原料血浆、混合原料血浆、4种类型的血液制品提取核酸后分别进行B19病毒核酸实时定量PCR检测筛查,对筛查结果进行数据统计分析。结果实验检测到个人血浆阳性率为0.267%、混合血浆感染5.45%、静注人免疫球蛋白感染0、人纤维蛋白原感染5.67%、人凝血因子Ⅷ和人凝血酶原复合物阳性率分别为7.41%和10.3%。结论尽管国内在血液制品生产工艺中使用了灭活/去除B19病毒的方法,但在本研究中筛查的原料血浆及血液制品中仍检测出了B19 DNA。 展开更多

关键词 血液制品 原料血浆 人细小病毒B19基因 荧光定量PCR

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心脏移植术后发生人细小病毒B19感染患者11例的护理

7

作者 罗白寒 张辰 +4 位作者 庄菲斐 刘波 代琦 顾明 马艳 《军事护理》 CSCD 北大核心 2022年第9期98-100,共3页

目的总结心脏移植术后发生人细小病毒B19(human parvovirus B19,HPV B19)感染患者的护理方法,为此类患者的观察及护理提供经验。方法回顾性总结11例原位心脏移植后发生人HPV B19感染患者的观察及护理要点。结果11例患者临床症状消失,全... 目的总结心脏移植术后发生人细小病毒B19(human parvovirus B19,HPV B19)感染患者的护理方法,为此类患者的观察及护理提供经验。方法回顾性总结11例原位心脏移植后发生人HPV B19感染患者的观察及护理要点。结果11例患者临床症状消失,全部顺利出院,未发生院内HPV B19感染传播。结论心脏移植术后发生HPV B19感染使护理难度大大增加,采取有效的护理措施有利于促进患者康复并降低院内传播风险。 展开更多

关键词 心脏移植 人细小病毒B19 感染 护理 病例报告

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B19病毒VP1u蛋白对胎鼠心脏的影响 被引量：1

8

作者 聂晓晶 张国成 +6 位作者 樊蕊 孙新 成胜权 许东亮 付蓉 黄娜 杨晓蕾 《发育医学电子杂志》 2013年第1期11-15,共5页

目的探讨B19病毒vplu蛋白是否影响心脏发育及相关机制。方法对不同孕龄母鼠注射B19病毒vplu蛋白,采集胎鼠心脏组织标本,通过光镜、电镜、免疫组织化学、TUNEL和原位杂交技术观察心脏细胞结构变化、细胞凋亡及相关基因或表面标志物变化... 目的探讨B19病毒vplu蛋白是否影响心脏发育及相关机制。方法对不同孕龄母鼠注射B19病毒vplu蛋白,采集胎鼠心脏组织标本,通过光镜、电镜、免疫组织化学、TUNEL和原位杂交技术观察心脏细胞结构变化、细胞凋亡及相关基因或表面标志物变化。结果实验期间有23只小鼠怀孕,vplu蛋白和(或)抗vplu蛋白mAh干预组与对照组均未见胎鼠流产。各组产仔数量及鼠心脏重量进行组间方差分析,差异无显著性(P>0.05)。vplu蛋白和(或)抗VPIu蛋白mAl干预组光镜下均可见心肌细胞间隙增宽,胞质透明淡染,部分心肌细胞脂肪变性。电镜下vplu蛋白(或)和vplu蛋白mAh共同注射组、抗VPIu蛋白mAb注射组均可见线粒体聚集在增宽的心肌细胞间隙中,有空泡化,并TUNEL免疫荧光和免疫组织化学显示心肌细胞发生细胞凋亡。对照组胎鼠均未见异常。结论B19病毒vplu蛋白与胎鼠流产、心脏发育畸形无关,与胎鼠心脏水肿有关。 展开更多

关键词 人细小病毒 VP1u蛋白 胎鼠 心脏

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病毒传染病

9

《国外科技资料目录（医药卫生）》 CAS 1997年第4期47-47,共1页

9712759 巨细胞病毒感染与未梢血淋巴细胞增殖量减少和细胞凋亡率增加有关/Van den Berg AP//Tramsplant Prol.-1995,27(1).-936～8 医科图9712760 狂犬病[日]/三舟求真人//医学.-1995,174(7,8).

关键词 病毒传染病 巨细胞病毒感染 淋巴细胞增殖 细胞凋亡 轮状病毒性肠炎 脊髓灰白质炎 人细小病毒 职业性接触 水泡性口炎病毒 血源性

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人体病毒学(致病病毒)

10

《国外科技资料目录（医药卫生）》 2000年第7期15-15,共1页

0023883 人细小病毒 B19的病原性表达分子机制(日刀又重铿伸生//日输血会志一1998,44(一义9一351冀医情门3)

关键词 人细小病毒 人体病毒学 分子机制 性表达 输血 病原 供血者 筛查

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病毒传染病

11

《国外科技资料目录（医药卫生）》 1999年第7期23-24,共2页

9923689 EB 病毒感染的 T 细胞株具有一致的病毒基因表达/Nakamura H//Int JCancer.-1998,76(4).-587～594津医情9923690 圣彼德堡脊髓灰质炎1例[俄]/.-1998,(2).-106～107 友谊医9923691

关键词 脊髓灰质炎 基因表达 细胞株 病毒感染 友谊 输血后 母子感染 病毒病 病毒传染 人细小病毒

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病毒传染病

12

《国外科技资料目录（医药卫生）》 1999年第5期28-29,共2页

9915966 今冬流行的3种流感病毒[日]/尾西一∥感染志.-1998,72(2).-186～187

关键词 人细小病毒 流感病毒 感染性 病毒传染 输血 外周血单核细胞 人免疫缺陷病毒 病例对照研究 流行 献血者

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病毒传染病

13

《国外科技资料目录（医药卫生）》 1998年第7期36-37,共2页

9824569 血红素加氧酶对人培养气管上皮鼻病毒感染的抑制效果[日]/山田纪广//呼吸.-1997,16(2).-295～296 冀医情9824570 病毒持续感染与免疫细胞间的平衡决定脱髓鞘作用/Rodriguez M//J Im-munol.-1996,157(12).

关键词 血红素加氧酶 抑制效果 免疫细胞 脱髓鞘作用 流感病毒感染 持续感染 人细小病毒 鼻病毒 气管上皮 病毒传染

全文增补中

新生儿贫血 被引量：1

14

作者 吴福根 陈弘 《浙江临床医学》 2004年第5期439-440,共2页

关键词 新生儿 贫血 类型 诊断 电镜检查 人细小病毒B19

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免疫学检验

15

《国外科技资料目录（医药卫生）》 CAS 1997年第7期31-31,共1页

9723217 用重组体(VP1-VP2)粒子抗原的人细小病毒 B19的血清流行病学[日,英摘]/松永泰子//感染志.-1995,69(12).-1371～1375 冀医情9723218

关键词 血清流行病学 免疫功能测定 人细小病毒 重组体 免疫学检验 抗原 抗体检测 粒子 配体 永泰

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免疫学检验

16

《国外科技资料目录（医药卫生）》 CAS 1997年第8期34-34,共1页

<正>

关键词 免疫学检验 抗体 效价测定 免疫物质 流动血细胞计数 杆状病毒 感染 抗原分析 酶免疫测定 人细小病毒

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出血性疾病

17

《国外科技资料目录（医药卫生）》 CAS 1997年第10期52-52,共1页

9735617 人疱疹病毒6初感染合并血小板减少性紫癜血清学证明1例[日,英摘]/西条政幸//感染志.-1995,69(3).-316～319 冀医情9735618 过敏性紫癜和人细小病毒

关键词 感染 血清学 人细小病毒 出血性疾病 血小板减少性紫癜 人疱疹病毒 过敏性紫癜 合并 证明 血友病

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出血性疾病

18

《国外科技资料目录（医药卫生）》 CAS 1997年第7期56-56,共1页

9731527 147例散发性血友病A型患者家系分析表明第Ⅷ因子缺陷的突变频率具有型依赖的性别差异/Becker J∥Am J Hum Genet.-1996,58(4).-657～670 哈医图 9731528 家族复发性血栓形成的血小板减少性紫癜患者血小板滞留的增加/Karp-

关键词 特发性血小板减少性 出血性疾病 合并 血小板疾病 人细小病毒 过敏性 感染 血小板减少症 动脉内 婴粟碱

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小儿传染病

19

《国外科技资料目录（医药卫生）》 1999年第6期105-105,共1页

9921309 在多科诊所医学教研室教授儿童传染性疾病[俄].-1998,(3).-53～55友谊医9921310 人细小病毒 B19感染呈狼疮样所见的女孩病例[日]/泉启夫//小儿科.～1997,38(12).-1549～1554

关键词 小儿科 传染性疾病 人细小病毒 医学教研室 儿童 传染病 友谊 诊所 狼疮 输血感染

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微生物学检验

20

《国外科技资料目录（医药卫生）》 1999年第7期17-17,共1页

9923549 微生物检查顺序进展[日]/山崎透//临检.-1998,42(11).-1229～1232 友谊医9923550 市售检验盒对粪便快速鉴定大肠杆菌0157的评价[日,英摘]/塚本定三//感染志.-1998,72(1).-40～44冀医情9923551 用原位杂交检出 Epstein-Barr 病毒... 9923549 微生物检查顺序进展[日]/山崎透//临检.-1998,42(11).-1229～1232 友谊医9923550 市售检验盒对粪便快速鉴定大肠杆菌0157的评价[日,英摘]/塚本定三//感染志.-1998,72(1).-40～44冀医情9923551 用原位杂交检出 Epstein-Barr 病毒[日]/大石勉//临检.-1998。 展开更多

关键词 原位杂交 微生物学检验 大肠杆菌 快速鉴定 临检 市售 人细小病毒 友谊 粪便 进展

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