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人粒系集落刺激因子(hG-CSF)cDNA于P_RP_L启动子作用下在大肠杆菌中的表达
1
作者
贺福初
邢桂春
+3 位作者
瞿成奎
吴祖泽
薛惠华
刘福陆
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
1993年第2期149-153,共5页
hG—CSF cDNA在天然状态下很难在大肠杆菌中表达。本文以作者克隆的高活性形式hG—CSF cDNA为模板,经PCR扩增出含hG—CSF信号肽中丙氨酸(Ala)及成熟型全部氨基酸编码序列的cDNA片段,于NcoⅠ、BamHⅠ位点克隆于原核表达载体PJLA602中,用...
hG—CSF cDNA在天然状态下很难在大肠杆菌中表达。本文以作者克隆的高活性形式hG—CSF cDNA为模板,经PCR扩增出含hG—CSF信号肽中丙氨酸(Ala)及成熟型全部氨基酸编码序列的cDNA片段,于NcoⅠ、BamHⅠ位点克隆于原核表达载体PJLA602中,用高活性hG—CSF特异探针菌落原位杂交筛选出阳性克隆。此克隆hG—CSF cDNA在λ噬菌体 P_RP_L串联启动子和大肠杆菌atpE翻译起始区(TIR)共同作用下,阳性菌株热诱导表达后经小鼠骨髓细胞体外CFU-G测试表明,表达产物具明显的粒细胞集落刺激活性。
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关键词
人粒系集落刺激因子
聚合酶链反应
CDNA克隆
基因表达
粒
系
集落
形成单位
P_RP_L启动子
翻译起始区
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职称材料
题名
人粒系集落刺激因子(hG-CSF)cDNA于P_RP_L启动子作用下在大肠杆菌中的表达
1
作者
贺福初
邢桂春
瞿成奎
吴祖泽
薛惠华
刘福陆
机构
北京放射医学研究所
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
1993年第2期149-153,共5页
基金
863计划资助项目
文摘
hG—CSF cDNA在天然状态下很难在大肠杆菌中表达。本文以作者克隆的高活性形式hG—CSF cDNA为模板,经PCR扩增出含hG—CSF信号肽中丙氨酸(Ala)及成熟型全部氨基酸编码序列的cDNA片段,于NcoⅠ、BamHⅠ位点克隆于原核表达载体PJLA602中,用高活性hG—CSF特异探针菌落原位杂交筛选出阳性克隆。此克隆hG—CSF cDNA在λ噬菌体 P_RP_L串联启动子和大肠杆菌atpE翻译起始区(TIR)共同作用下,阳性菌株热诱导表达后经小鼠骨髓细胞体外CFU-G测试表明,表达产物具明显的粒细胞集落刺激活性。
关键词
人粒系集落刺激因子
聚合酶链反应
CDNA克隆
基因表达
粒
系
集落
形成单位
P_RP_L启动子
翻译起始区
Keywords
human granulocyte colony-stimulating fartor (hG-CSF ) polymerase chain reaction (PCR) cDNA cloning gene expression CFU-G PRPL promoter translational initiation region
分类号
R4 [医药卫生—临床医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人粒系集落刺激因子(hG-CSF)cDNA于P_RP_L启动子作用下在大肠杆菌中的表达
贺福初
邢桂春
瞿成奎
吴祖泽
薛惠华
刘福陆
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
1993
0
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