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E-box元件修饰端粒酶核心启动子序列及体外转录活性分析(英文)
被引量：
1
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作者
杨应斌
蔡绍皙
+8 位作者
于淑惠
杨力
李军
余松涛
戴小珍
王星星
晏小清
辛鑫
宋国立
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期510-514,共5页
人类端粒酶启动子(hTERT启动子)在肿瘤基因治疗中的有效性已经得到了证实.然而,hTERT启动子有限的肿瘤靶向转录活性困扰着它的临床应用.早期研究已经揭示,核心hTERT启动子上的-34位E-box元件与该启动子的肿瘤靶向转录活性有关.为进一步...
人类端粒酶启动子(hTERT启动子)在肿瘤基因治疗中的有效性已经得到了证实.然而,hTERT启动子有限的肿瘤靶向转录活性困扰着它的临床应用.早期研究已经揭示,核心hTERT启动子上的-34位E-box元件与该启动子的肿瘤靶向转录活性有关.为进一步探索核心hTERT启动子序列3′端富余E-box元件是否能提高启动子的肿瘤靶向转录能力,用化学合成方法在野生型hTERT(WT-hTERT)核心启动子片段(编码蛋白起始子ATG上游-268bp～-10bp)的3′端接入3个E-box序列,构建成修饰型hTERT(Mod-hTERT)启动子.然后,分别用WT-hTERT和Mod-hTERT启动子去调控增强型绿色荧光蛋白(EGFP)及荧光素酶报告基因在293FT、HepGⅡ、SGC7901、U2OS、以及原代培养人成纤维细胞(PHF)中表达.结果表明,在Mod-hTERT启动子的各实验组细胞中,能够在端粒酶阳性的293FT、HepGⅡ及SGC7901细胞组中观测到EGFP的表达,而在端粒酶阴性的U2OS及PHF细胞组中没有观测到EGFP的表达;在端粒酶阳性的293FT、HepGⅡ和SGC7901细胞株中,Mod-hTERT启动子调控下的荧光素酶活性要高于WT-hTERT启动子组(P<0.01);而在端粒酶阴性的U2OS细胞组中,Mod-hTERT启动子调控下的荧光素酶活性则低于WT-hTERT启动子组(P<0.01);在PHF细胞组中,Mod-hTERT启动子组与WT-hTERT启动子组的荧光素酶活性差异不显著(P>0.05).研究提示,在3′端增加E-box元件可以提高核心hTERT启动子序列的肿瘤靶向转录活性.
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关键词
人类端粒酶启动子
E-BOX
荧光素酶
增强型绿色荧光蛋白
肿瘤靶向性
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职称材料
题名
E-box元件修饰端粒酶核心启动子序列及体外转录活性分析(英文)
被引量：
1
1
作者
杨应斌
蔡绍皙
于淑惠
杨力
李军
余松涛
戴小珍
王星星
晏小清
辛鑫
宋国立
机构
重庆大学生物工程学院
西南大学生命科学学院
西南大学图书馆
加州大学骨外科与生物工程系
第三军医大学西南医院消化科
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期510-514,共5页
基金
Supported by National Natural Science Foundation of China (No.10872224)~~
文摘
人类端粒酶启动子(hTERT启动子)在肿瘤基因治疗中的有效性已经得到了证实.然而,hTERT启动子有限的肿瘤靶向转录活性困扰着它的临床应用.早期研究已经揭示,核心hTERT启动子上的-34位E-box元件与该启动子的肿瘤靶向转录活性有关.为进一步探索核心hTERT启动子序列3′端富余E-box元件是否能提高启动子的肿瘤靶向转录能力,用化学合成方法在野生型hTERT(WT-hTERT)核心启动子片段(编码蛋白起始子ATG上游-268bp～-10bp)的3′端接入3个E-box序列,构建成修饰型hTERT(Mod-hTERT)启动子.然后,分别用WT-hTERT和Mod-hTERT启动子去调控增强型绿色荧光蛋白(EGFP)及荧光素酶报告基因在293FT、HepGⅡ、SGC7901、U2OS、以及原代培养人成纤维细胞(PHF)中表达.结果表明,在Mod-hTERT启动子的各实验组细胞中,能够在端粒酶阳性的293FT、HepGⅡ及SGC7901细胞组中观测到EGFP的表达,而在端粒酶阴性的U2OS及PHF细胞组中没有观测到EGFP的表达;在端粒酶阳性的293FT、HepGⅡ和SGC7901细胞株中,Mod-hTERT启动子调控下的荧光素酶活性要高于WT-hTERT启动子组(P<0.01);而在端粒酶阴性的U2OS细胞组中,Mod-hTERT启动子调控下的荧光素酶活性则低于WT-hTERT启动子组(P<0.01);在PHF细胞组中,Mod-hTERT启动子组与WT-hTERT启动子组的荧光素酶活性差异不显著(P>0.05).研究提示,在3′端增加E-box元件可以提高核心hTERT启动子序列的肿瘤靶向转录活性.
关键词
人类端粒酶启动子
E-BOX
荧光素酶
增强型绿色荧光蛋白
肿瘤靶向性
Keywords
human telomerase promoter
E-box
luciferase
EGFP
tumor-targeting
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
Q81 [生物学—生物工程]
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E-box元件修饰端粒酶核心启动子序列及体外转录活性分析(英文)
杨应斌
蔡绍皙
于淑惠
杨力
李军
余松涛
戴小珍
王星星
晏小清
辛鑫
宋国立
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
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