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端粒酶逆转录酶显性负突变体对乳腺癌细胞端粒酶活性的抑制作用
被引量:
2
1
作者
饶耀剑
刘慧娟
+1 位作者
王拥军
奚玲
《医学研究生学报》
CAS
2007年第7期678-681,785,共5页
目的:观察端粒酶逆转录酶显性负突变体(DN-hTERT)对乳腺癌细胞MCF7端粒酶活性的抑制作用。方法:将携带DN-hTERT基因的真核表达载体IRES2-EGFP空载体通过脂质体2000介导转入MCF7细胞,以G418进行稳定筛选,得到阳性克隆;倒置荧光显微镜观...
目的:观察端粒酶逆转录酶显性负突变体(DN-hTERT)对乳腺癌细胞MCF7端粒酶活性的抑制作用。方法:将携带DN-hTERT基因的真核表达载体IRES2-EGFP空载体通过脂质体2000介导转入MCF7细胞,以G418进行稳定筛选,得到阳性克隆;倒置荧光显微镜观察转染细胞的生长情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞hTERT mRNA的表达;TRAP-ELISA方法检测转染细胞端粒酶活性。结果:MCF7细胞转染DN-hTERT后生长受到抑制;转染DN-hTERT的MCF7细胞(MCF7/DN)hTERT mRNA表达升高;改进端粒重复序列扩增法(TRAP-ELISA)检测MCF7/DN细胞端粒酶活性与转染空载体MCF7细胞(MCF7/I)比较显著降低(P<0.05)。结论:DN-hTERT能特异性抑制MCF7细胞生长和端粒酶活性。
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关键词
人端粒酶逆转录酶显性负突变体
端粒酶
活性
乳腺癌
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职称材料
题名
端粒酶逆转录酶显性负突变体对乳腺癌细胞端粒酶活性的抑制作用
被引量:
2
1
作者
饶耀剑
刘慧娟
王拥军
奚玲
机构
河南省正骨研究院
上海中医药大学附属龙华医院脊柱病研究所
华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心
出处
《医学研究生学报》
CAS
2007年第7期678-681,785,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(批准号:30500596)
文摘
目的:观察端粒酶逆转录酶显性负突变体(DN-hTERT)对乳腺癌细胞MCF7端粒酶活性的抑制作用。方法:将携带DN-hTERT基因的真核表达载体IRES2-EGFP空载体通过脂质体2000介导转入MCF7细胞,以G418进行稳定筛选,得到阳性克隆;倒置荧光显微镜观察转染细胞的生长情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞hTERT mRNA的表达;TRAP-ELISA方法检测转染细胞端粒酶活性。结果:MCF7细胞转染DN-hTERT后生长受到抑制;转染DN-hTERT的MCF7细胞(MCF7/DN)hTERT mRNA表达升高;改进端粒重复序列扩增法(TRAP-ELISA)检测MCF7/DN细胞端粒酶活性与转染空载体MCF7细胞(MCF7/I)比较显著降低(P<0.05)。结论:DN-hTERT能特异性抑制MCF7细胞生长和端粒酶活性。
关键词
人端粒酶逆转录酶显性负突变体
端粒酶
活性
乳腺癌
Keywords
Dominant negative human telomerase reverase transcriptase gene
Telomerase activity
Breast cancer
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
端粒酶逆转录酶显性负突变体对乳腺癌细胞端粒酶活性的抑制作用
饶耀剑
刘慧娟
王拥军
奚玲
《医学研究生学报》
CAS
2007
2
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