叶酸和维生素B12对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的保护作用 被引量：5

1

作者 张景燕 陈娟 +2 位作者 王蓉 赵静姝 吴燕川 《首都医科大学学报》 CAS 2012年第6期776-778,共3页

目的通过观察叶酸和维生素B12对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长的影响,探讨叶酸和维生素B12对神经细胞的保护作用。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组、叶酸组(1.875 mg/L)、维生素B12组(800μg/L)、叶酸(1.875 mg/L)+维生素B12(800... 目的通过观察叶酸和维生素B12对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长的影响,探讨叶酸和维生素B12对神经细胞的保护作用。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组、叶酸组(1.875 mg/L)、维生素B12组(800μg/L)、叶酸(1.875 mg/L)+维生素B12(800μg/L)组,进行细胞形态观察、细胞计数分析以及测定各组细胞的噻唑蓝(thiazolyl blue,MTT)代谢率、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出率。结果与对照组相比,叶酸组、维生素B12组、叶酸+维生素B12组的细胞计数和MTT代谢率升高(P<0.05),LDH漏出率降低(P<0.05),在细胞形态上,叶酸组、维生素B12组、叶酸+维生素B12组明显好于对照组,表现为细胞胞体饱满、存活细胞数目增多、贴壁良好、突起延长。结论叶酸、维生素B12能促进神经细胞生长,降低神经细胞死亡率,从而达到保护神经元的作用。 展开更多

关键词 叶酸 维生素B12 人神经母细胞瘤株sh-sy5y

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救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的保护作用

2

作者 张景燕 张静爽 +5 位作者 曹子青 赵志炜 张旭 吴燕川 王玉兰 王蓉 《中国比较医学杂志》 北大核心 2015年第4期58-60,I0005,共4页

目的通过观察复方中药救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长以及胰岛素信号通路的影响,探讨其对神经细胞保护作用的机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组(C组)、救脑益智1号方组和3号方组,每组药物剂量分别为0.062... 目的通过观察复方中药救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长以及胰岛素信号通路的影响,探讨其对神经细胞保护作用的机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组(C组)、救脑益智1号方组和3号方组,每组药物剂量分别为0.0625 mg/m L、0.125 mg/m L、0.25 mg/m L、0.5 mg/m L和1 mg/m L,测定各组细胞的噻唑蓝(MTT)代谢率,选定0.125 mg/m L进行细胞免疫荧光染色,观察细胞形态和胰岛素受体底物-1(IRS-1)、c AMP反应元件结合蛋白(CREB)表达的变化。结果与对照组相比,救脑益智组MTT代谢率升高(P<0.05),细胞形态好,表现为细胞胞体饱满、贴壁良好、突起延长,IRS-1和CREB表达增加。结论复方中药救脑益智水提液能促进神经细胞生长,提高神经元胰岛素信号通路相关因子IRS-1和CREB表达,推测其神经保护作用机制与胰岛素信号通路有关。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 复方中药 救脑益智方剂 人神经母细胞瘤株sh-sy5y

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不同能量的培养条件对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长的影响 被引量：2

3

作者 赵静姝 王蓉 +2 位作者 张景燕 吴燕川 姬志娟 《中国比较医学杂志》 CAS 2012年第2期66-69,I0003,共5页

目的建立热量限制的体外模型,观察不同能量培养条件下对人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞生长代谢的影响。方法将人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞分别采用含有低浓度(2 g/L)、正常浓度(3.15g/L)或高浓度(4.5 g/L)葡萄糖的培养基进行常... 目的建立热量限制的体外模型,观察不同能量培养条件下对人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞生长代谢的影响。方法将人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y细胞分别采用含有低浓度(2 g/L)、正常浓度(3.15g/L)或高浓度(4.5 g/L)葡萄糖的培养基进行常规传代培养,利用MTT代谢率、细胞生长曲线及LDH漏出率等指标观察各组细胞生长情况。结果与正常葡萄糖浓度培养条件下培养的对照组相比,高糖组细胞突起缩短,细胞胞体皱缩,MTT代谢率稍低(0.573±0.001),LDH漏出率高,细胞生长状态差;与对照组相比,低糖组细胞突起伸展,MTT代谢率较低(0.428±0.003),LDH漏出率低,细胞生长速度缓慢,但是形态良好。结论高糖培养对细胞有损伤作用,细胞代谢加速,更容易衰老死亡;而低糖培养起到保护作用,在热量限制允许范围内降低培养液的含糖量,不但不会对细胞造成损伤,反而对细胞的代谢及生长起到保护作用,延长细胞的总体寿命。 展开更多

关键词 热量限制 葡萄糖 细胞生长 细胞代谢 细胞培养 人神经母细胞瘤细胞株sh-sy5y

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DpdtaA对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖、细胞周期、凋亡、副凋亡的影响

4

作者 张正艳 李长正 +2 位作者 李静 王艳 路承彪 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第3期332-336,共5页

目的:探讨DpdtaA对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞恶性生物学行为的影响及可能机制。方法:SH-SY5Y细胞用终浓度分别为0.156、0.312、0.625、1.250、2.500、5.000μmol/L DpdtaA处理24 h,采用MTT法检测细胞增殖,计算增殖抑制率。SH-SY5Y细胞... 目的:探讨DpdtaA对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞恶性生物学行为的影响及可能机制。方法:SH-SY5Y细胞用终浓度分别为0.156、0.312、0.625、1.250、2.500、5.000μmol/L DpdtaA处理24 h,采用MTT法检测细胞增殖,计算增殖抑制率。SH-SY5Y细胞分为对照组(给予二甲基亚砜)和DpdtaA组(0.5μmol/L DpdtaA),处理24 h后采用PI染色法检测细胞周期,Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡,在倒置显微镜和透射电镜下观察细胞形态和超微结构,采用荧光探针DCFH-DA法检测细胞内活性氧(ROS)水平。另取细胞,分4组,采用Western blot检测DpdtaA与ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)单独及联合作用后细胞凋亡相关蛋白ALG-2相互作用蛋白X(Alix)的表达。结果:DpdtaA可呈浓度依赖性抑制SH-SY5Y细胞增殖,半数抑制浓度为(0.54±0.13)μmol/L。与对照组比较,DpdtaA组细胞周期阻滞在G0/G1期,细胞凋亡增多(P<0.05);DpdtaA组细胞核周围有大量空泡,线粒体肿胀,ROS水平升高,提示可能发生副凋亡。DpdtaA处理后Alix蛋白表达水平下降;NAC预处理后,Alix蛋白表达水平均升高(P<0.05)。结论:DpdtaA能够抑制SH-SY5Y细胞增殖,引起周期阻滞,诱导细胞凋亡和副凋亡,部分机制可能与上调ROS及抑制Alix蛋白表达有关。 展开更多

关键词 DpdtaA 神经母细胞瘤 sh-sy5y细胞 增殖 副凋亡 氧化应激 凋亡相关基因2相互作用蛋白X

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微波辐射诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的可能机制 被引量：2

5

作者 王程 李琴 +5 位作者 刘微 闫岗林 徐冶 于洋 刘师兵 潘文干 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期422-426,I0002,共6页

目的:观察微波辐射对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用10、30和50 mW.cm-2辐射强度的微波辐射SH-SY5Y细胞5 min,以假辐射组(0 mW.cm-2)为对照,光镜下观察细胞形态变化;荧光显微镜下观察DAPI染色细胞核的形... 目的:观察微波辐射对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用10、30和50 mW.cm-2辐射强度的微波辐射SH-SY5Y细胞5 min,以假辐射组(0 mW.cm-2)为对照,光镜下观察细胞形态变化;荧光显微镜下观察DAPI染色细胞核的形态;CTAB法提取细胞基因组DNA,电泳观察DNAladder;台盼蓝拒染法检测细胞存活率;AnnexinV-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率;MTT法检测细胞相对活性;蛋白质印迹检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果:微波辐射后SH-SY5Y细胞形态即刻改变,胞核、胞质结构欠清,细胞皱缩甚至脱壁;细胞核内的染色质出现不规则凝集,碎裂成2～5个微核;细胞DNA出现明显的梯状条带;细胞存活率随微波辐射强度增大逐渐降低,10 mW.cm-2辐射组与假辐射组比较,细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05),但30、50 mW.cm-2辐射组细胞存活率明显低于假辐射组(P<0.05);微波辐射后6 h的细胞凋亡率随辐射强度的增加逐渐升高,各辐射组细胞凋亡率均明显高于假辐射组(P<0.05);微波辐射后24和48 h,细胞相对活力随辐射强度的增加明显降低,各辐射组的细胞相对活力均明显低于假辐射组(P<0.05)。微波辐射后,细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、survivin表达水平逐渐下降,Bax、caspase-3和caspase-7表达水平逐渐升高,caspase-8和-9表达水平无明显变化。结论:微波辐射可诱导SH-SY5Y细胞凋亡,其作用机制可能与survivin、Bcl-2蛋白表达水平下调、Bax蛋白表达水平上调及caspase-3和caspase-7的作用有关,而与caspase-8和caspase-9介导的caspase-3活化这一作用无密切关系。 展开更多

关键词 微波辐射 人神经母细胞瘤 sh-sy5y细胞 细胞凋亡

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反义bcl-2 mRNA对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y生长和凋亡的作用

6

作者 关健 陈杰 +1 位作者 高洁 罗玉凤 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期243-246,I002,共5页

目的 研究反义bcl-2 mRNA对人神经母细胞瘤（NB）细胞株SH-SY5Y的生长和凋亡的作用。方法采用定向克隆构建携带反义bcl-2 cDNA片段的逆转录病毒载体PBabe-puro/Asbcl-2；应用脂质体Lipofectamine转染SH-SY5Y，经嘌呤霉素筛选，应用RT-PC... 目的 研究反义bcl-2 mRNA对人神经母细胞瘤（NB）细胞株SH-SY5Y的生长和凋亡的作用。方法采用定向克隆构建携带反义bcl-2 cDNA片段的逆转录病毒载体PBabe-puro/Asbcl-2；应用脂质体Lipofectamine转染SH-SY5Y，经嘌呤霉素筛选，应用RT-PCR证实外源性反义bcl-2 mRNA的表达，建立细胞株SH-SY5Y/Asbcl-2；应用免疫组化和Western印迹分析Bcl-2蛋白的表达变化；MTT法做细胞的生长曲线观察细胞的生长情况；通过提取基因组DNA检测顺式氯铂（CP）诱导的细胞凋亡所形成的DNA 梯带。结果RT-PCR证实转染细胞SH-SY5Y/Asbcl-2中有外源性反义bcl-2 mRNA的表达；免疫组化及Western印迹分析显示SH-SY5Y/Asbcl-2细胞的Bcl-2蛋白表达明显降低；生长曲线显示SH-SY5Y/Asbcl-2细胞生长缓慢;加入CP相同时间后，SH-SY5Y/Asbcl-2细胞凋亡形成的DNA 梯带更明显。结论脂质体方法转染携带反义bcl-2 cDNA片段的逆转录病毒载体能够获得稳定转染和表达反义bcl-2 mRNA的细胞；反义bcl-2 mRNA可抑制内源性Bcl-2蛋白的表达，抑制SH-SY5Y细胞的生长，增加SH-SY5Y细胞对CP的敏感性，促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 神经母细胞瘤 反义bcl-2mRNA sh-sy5y 细胞生长 细胞凋亡

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转录物组学研究揭示miR⁃3910促进神经母细胞瘤进展

7

作者 李佳佳 贾艳梅 +3 位作者 刘玉玲 刘菲 王惠茹 陈利荣 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第7期1019-1030,共12页

神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)作为儿童最常见的颅外实体肿瘤,其高度恶性特征和不良预后亟待深入研究。近年来,微小RNA(miRNA)作为重要的转录后调控分子,在肿瘤发生发展中发挥关键作用。基于上述背景,本研究将重点关注miR-3910,探讨其... 神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)作为儿童最常见的颅外实体肿瘤,其高度恶性特征和不良预后亟待深入研究。近年来,微小RNA(miRNA)作为重要的转录后调控分子,在肿瘤发生发展中发挥关键作用。基于上述背景,本研究将重点关注miR-3910,探讨其在NB细胞系SH-SY5Y中的生物学功能以及其分子调控机制。通过生物信息学分析和转录物组测序技术,我们发现了miR-3910的潜在关键靶分子,从而为NB的精准诊断和有效治疗提供基因靶点。在本研究中,运用qRT-PCR检测转染mimic nc与miR-3910 mimic后的SH-SY5Y细胞中miR-3910表达水平,与nc组相比,mimic组的SH-SY5Y细胞中miR-3910表达显著上调(P<0.01);采用CCK-8法和细胞划痕试验定量分析miR-3910对细胞增殖与迁移能力的影响,细胞增殖能力在48 h显著提高(P<0.05),迁移能力在48 h明显增强(P<0.01);借助流式细胞术测定miR-3910对细胞周期进程的作用,细胞周期进展加速,G_(0)/G_(1)期细胞百分数减少(P<0.01),S期细胞显著增加(P<0.05)。综合生物信息学分析及高通量转录物组测序技术预测miR-3910过表达后SH-SY5Y细胞中的关键分子变化。经转录物组测序及生物信息学分析,筛选出EIF3CL(EIF3C)、RNF103-CHMP 3(VPS24)、SULT1A 4(SULT1A4)、CORO7-PAM 16(CORO7)、H4C 12(Histone H4)、TBC1D 3(TBC1D3A/B/C)等6个(别名来自GeneCards数据库)与NB相关基因,且qRT-PCR和Western印迹验证结果与测序结果一致(P<0.01)。综上所述,miR-3910过表达显著促进SH-SY5Y细胞的增殖、迁移及周期进展,并揭示了一系列潜在的靶向关键分子,为深入理解NB发病机制提供了新视角,为NB的分子靶向治疗提供理论依据和潜在干预靶点。 展开更多

关键词 神经母细胞瘤 微RNA-3910 sh-sy5y 转录物组测序 生物信息学分析

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MALAT1抑制Aβ_(25-35)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖并促进细胞凋亡及其机制 被引量：4

8

作者 杨蔚蔚 张胜 +1 位作者 李彪 张尧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期434-441,共8页

目的探讨长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)对Aβ_(25-35)诱导的阿尔茨海默病(AD)神经细胞的细胞周期、细胞增殖凋亡的影响。方法利用β淀粉样肽25-35(Aβ_(25-35))处理人神经母细胞瘤细胞SHSY5Y建立AD细胞模型。将AD SH-SY5... 目的探讨长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)对Aβ_(25-35)诱导的阿尔茨海默病(AD)神经细胞的细胞周期、细胞增殖凋亡的影响。方法利用β淀粉样肽25-35(Aβ_(25-35))处理人神经母细胞瘤细胞SHSY5Y建立AD细胞模型。将AD SH-SY5Y细胞随机分为对照组、p CDH空载体(p CDH-EV)组、MALAT1过表达(p CDH-MALAT1)组、抑制表达空载体(p SICOR-EV)组、抑制MALAT1表达(p SICOR-sh MALAT1)组。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测转染48 h后的细胞周期和细胞凋亡率,Western blot法检测细胞BAX、Bcl2、胱天蛋白酶3(caspase-3)以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化的PI3K(p-PI3K)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和磷酸化的mTOR(p-mTOR)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、磷酸化的GSK3β(p-GSK3β)蛋白水平。结果成功构建AD细胞模型和过表达及敲低MALAT1的表达载体。敲低MALAT1水平后,显著抑制AD模型细胞的增殖、细胞阻滞于G1期、促进细胞凋亡。同时上调BAX、caspase-3蛋白水平,下调Bcl2、p-PI3K、p-mTOR、p-GSK3β蛋白水平。过表达MALAT1则可逆转以上作用。结论敲低MALAT1水平可阻断PI3K/mTOR/GSK3β通路抑制Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1) SHSy5y人神经母细胞瘤细胞 阿尔茨海默病 细胞周期 细胞增殖 细胞凋亡 PI3K/mTOR/GSK3β通路

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莫诺苷抑制过氧化氢诱导的SH-SY5Y神经细胞钙超载和细胞毒 被引量：13

9

作者 王文 孙芳玲 +4 位作者 安宜 黄文婷 艾厚喜 张丽 李林 《中国康复理论与实践》 CSCD 2009年第3期201-202,共2页

目的研究莫诺苷抑制过氧化氢诱导的SH-SY5Y神经细胞钙超载和细胞毒作用。方法体外培养的人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞分别加入莫诺苷1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L预孵育24h,加入H2O2300～500μmol/L,作用18h,检测细胞内游离钙... 目的研究莫诺苷抑制过氧化氢诱导的SH-SY5Y神经细胞钙超载和细胞毒作用。方法体外培养的人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞分别加入莫诺苷1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L预孵育24h,加入H2O2300～500μmol/L,作用18h,检测细胞内游离钙离子浓度、乳酸脱氢酶(LDH)释放率。结果与未加莫诺苷预孵育的细胞相比,莫诺苷10μmol/L、100μmol/L能抑制神经细胞内游离钙离子浓度增加,莫诺苷1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L能降低LDH的释放率。结论莫诺苷能够抑制H2O2诱导的SH-SY5Y神经细胞钙超载和细胞毒,有神经保护作用。 展开更多

关键词 莫诺苷 人神经母细胞瘤细胞 sh-sy5y系 氧化应激 钙超载 细胞毒

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TAZ诱导性过表达慢病毒载体的构建、鉴定及诱导过表达TAZ神经母细胞瘤细胞株的建立 被引量：2

10

作者 阮红峰 应忠明 罗环 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1035-1036,共2页

神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是儿童最常见且致死性极高的实体肿瘤之一[1]。由NB所致死亡人数占所有儿童肿瘤死亡总数的15%[2]。分子靶向治疗是近年肿瘤领域研究的热点[3]。TAZ是一个包含WW-domain结构域的转录共激活子,参与多种肿... 神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是儿童最常见且致死性极高的实体肿瘤之一[1]。由NB所致死亡人数占所有儿童肿瘤死亡总数的15%[2]。分子靶向治疗是近年肿瘤领域研究的热点[3]。TAZ是一个包含WW-domain结构域的转录共激活子,参与多种肿瘤细胞的增殖、调控肿瘤转移,并能预测部分肿瘤患者的预后情况[4]。针对Oncomine肿瘤数据库NB肿瘤组织的生物信息学分析发现,TAZ基因在NB肿瘤组织中呈高表达,且随着NB的恶化,表达逐渐升高。而TAZ是否参与NB的形成及恶化尚未完全明确。 展开更多

关键词 TAZ基因 神经母细胞瘤细胞sh-sy5y 诱导过表达慢病毒载体

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EX527对热量限制保护SH-SY5Y细胞的影响 被引量：1

11

作者 张静爽 马丽娜 +4 位作者 王蓉 张景燕 吴燕川 赵志炜 王玉兰 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第5期705-708,共4页

目的观察SIRT1抑制剂EX527对热量限制处理的人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的影响。方法体外培养SHSY5Y细胞,分为正常对照组(NC组)、热量限制组(CR组)和热量限制加SIRT1抑制剂组(CR+EX527组),光镜下观察细胞形态学改变,测定各组细胞噻唑蓝... 目的观察SIRT1抑制剂EX527对热量限制处理的人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的影响。方法体外培养SHSY5Y细胞,分为正常对照组(NC组)、热量限制组(CR组)和热量限制加SIRT1抑制剂组(CR+EX527组),光镜下观察细胞形态学改变,测定各组细胞噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)代谢率及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出率,应用蛋白免疫印迹(Western blotting)法测定SIRT1表达量。结果与NC组相比,CR组细胞形态好,表现为细胞胞体饱满、突起伸展、贴壁牢固,MTT代谢率升高(P<0.05),LDH漏出率有降低趋势,CR组和CR+EX527组SIRT1表达均增加(P<0.05);与CR组相比,CR+EX527组细胞形态较差,突起回缩,贴壁性不好,MTT代谢率降低(P<0.05),LDH漏出率有升高趋势,SIRT1表达略减少。结论热量限制对神经细胞具有保护作用,而SIRT1抑制剂EX527能够减弱热量限制的神经保护作用,提示热量限制对SH-SY5Y细胞的保护作用可能是由SIRT1介导的。 展开更多

关键词 热量限制 SIRT1抑制剂 人神经母细胞瘤株sh-sy5y

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亚砷酸钠对SH-SY5Y细胞生长和3MST表达的影响 被引量：4

12

作者 聂杨 王念 +1 位作者 徐国强 潘际刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1182-1183,共2页

神经母细胞瘤是儿童最常见的恶性肿瘤之一。因其恶性程度高，手术加化疗的方案对于侵润性的神经母细胞瘤效果不佳。砷，俗名砒霜，很早被用来治疗急性粒性白血病。现在发现砷对神经母细胞瘤、胶质瘤，以及来源于肝脏、前列腺、肾脏、子... 神经母细胞瘤是儿童最常见的恶性肿瘤之一。因其恶性程度高，手术加化疗的方案对于侵润性的神经母细胞瘤效果不佳。砷，俗名砒霜，很早被用来治疗急性粒性白血病。现在发现砷对神经母细胞瘤、胶质瘤，以及来源于肝脏、前列腺、肾脏、子宫颈和胆囊等固体肿瘤也有效［1］。然而，其作用机制尚未完全明了。有报道，肿瘤细胞H2 S合成酶表达上调［2］。那么，砷是否可通过下调H2 S合成酶的表达发挥抗癌作用？本实验采用SH－SY5Y细胞和亚砷酸钠（ NaAsO2）对此问题进行了探讨。 展开更多

关键词 亚砷酸钠 砷 神经母细胞瘤 sh-sy5y细胞 3-巯基丙酮酸硫基转移酶 下调

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芝麻素对高糖损伤SH-SY5Y细胞的保护效果及机制 被引量：2

13

作者 张慧 宋宇 +1 位作者 栗志勇 张婷 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1678-1683,共6页

目的研究芝麻素(sesamin)对高糖所致人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞损伤的保护作用及其机制。方法SH-SY5Y细胞接种于含100 mmol/L葡萄糖的培养基并与10、20、40μmol/L芝麻素共同孵育36 h,MTT法测定细胞存活率,比色法测定细胞培养液乳酸... 目的研究芝麻素(sesamin)对高糖所致人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞损伤的保护作用及其机制。方法SH-SY5Y细胞接种于含100 mmol/L葡萄糖的培养基并与10、20、40μmol/L芝麻素共同孵育36 h,MTT法测定细胞存活率,比色法测定细胞培养液乳酸脱氢酶(LDH)水平,ELISA检测DNA片段及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性。2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)探针法检测细胞中活性氧(ROS)的水平,试剂盒检测细胞内丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和还原型谷胱甘肽(GSH)活性。光度法检测细胞烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶活性,实时荧光定量检测NADPH氧化酶亚基p47phox mRNA表达。Western blot法检测p47phox蛋白表达。结果芝麻素可增加高糖作用下SH-SY5Y细胞的存活率,抑制细胞LDH释放,阻止高糖诱导的DNA断裂,降低Caspase-3活性。同时芝麻素能够增加高糖作用下SH-SY5Y细胞内SOD、CAT和GSH的活性,清除细胞内的ROS,抑制NADPH氧化酶活性及p47phox mRNA和蛋白的表达。结论芝麻素对高糖诱导SY5Y细胞损伤具有保护作用,其机制可能与抗氧化和抑制NADPH氧化酶活性有关。 展开更多

关键词 芝麻素(sesamin) 高糖 人神经母细胞瘤(sh-sy5y)细胞 抗氧化 活性氧 NADPH氧化酶

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RUNX3小干扰RNA对SH-SY5Y细胞生长和药物敏感性的作用 被引量：2

14

作者 张宏卫 刘丽华 王承忠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期504-508,共5页

目的:探讨RUNX3基因对人神经母细胞瘤细胞生长和药物敏感性的调节作用。方法:构建RUNX3基因的小干扰RNA载体并将其转导入SH-SY5Y细胞,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blotitng进行鉴定;MTT法和流式细胞仪检测... 目的:探讨RUNX3基因对人神经母细胞瘤细胞生长和药物敏感性的调节作用。方法:构建RUNX3基因的小干扰RNA载体并将其转导入SH-SY5Y细胞,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blotitng进行鉴定;MTT法和流式细胞仪检测细胞转染前后生长速度和细胞周期的变化;MTT法和流式细胞仪检测细胞转染前后对阿霉素敏感性的变化;Western blotting检测细胞转染前后细胞周期相关蛋白cy-clin D1、CDK4、CDK6、p21、p27和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax以及耐药相关蛋白P-gp、MRP的表达变化。结果:成功构建了RUNX3的小干扰RNA载体并将其转染SH-SY5Y细胞;筛选到稳定的RUNX3低表达的神经母细胞瘤细胞模型;MTT和流式细胞仪检测结果显示,转染RUNX3小干扰RNA后的细胞的生长速度显著快于对照组(P<0.05),且G1期的细胞比率显著低于对照组(P<0.05);MTT法和流式细胞仪结果显示,转染RUNX3小干扰RNA后的细胞对化疗药物的敏感性降低,细胞内的阿霉素蓄积量显著减少(P<0.05);Western blotting显示,转染RUNX3小干扰RNA后的细胞中Bcl-2、P-gp和cyclin D1的表达明显增高,p21的表达明显降低。结论:下调RUNX3基因能促进神经母细胞瘤细胞生长,降低细胞对化疗药物的敏感性,提示RUNX3在神经母细胞瘤的发生和发展中可能扮演重要角色。 展开更多

关键词 神经母细胞瘤 RUNX3 RNA干扰 SH—Sy5y细胞

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三维微小凹图式的加工及其与人神经母细胞瘤细胞的复合 被引量：3

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作者 吴泽志 KISAALITA W.S. +2 位作者 ZHAO Y.-P. WANG L. 张利光 《传感技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期297-302,共6页

采用紫外光光刻、硅蚀刻及软光刻技术分别制备了阴性光刻胶SU-8和聚乳酸及聚羟基乙酸共聚物(PLGA)微小凹图式。以人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y与三维微结构进行复合,采用扫描电子显微镜、光学显微镜及caicein荧光染色评价所加工图式的结... 采用紫外光光刻、硅蚀刻及软光刻技术分别制备了阴性光刻胶SU-8和聚乳酸及聚羟基乙酸共聚物(PLGA)微小凹图式。以人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y与三维微结构进行复合,采用扫描电子显微镜、光学显微镜及caicein荧光染色评价所加工图式的结构形态及细胞的生长行为。实验制备出名义直径约100μm、高纵横比(接近或大于1)并可叠加微通道连接的SU-8及PLGA三维微小凹图式。所加工的图式透明,符合三维细胞生物传感器的光学检测的需要。细胞培养结果表明,该结构尺寸的图式能引导在三维环境神经细胞的排布、神经突起延伸及形态分化。 展开更多

关键词 微加工 SU-8 聚乳酸及聚羟基乙酸共聚物 三维 SH—Sy5y 神经母细胞瘤细胞

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胰岛素增敏剂罗格列酮对链脲佐菌素损伤SH-SY5Y细胞的保护作用 被引量：1

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作者 张景燕 王蓉 +3 位作者 盛树力 姬志娟 孟祥宏 赵志炜 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第1期69-71,共3页

目的观察胰岛素增敏剂罗格列酮对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)所致胰岛素信号转导通路损伤的SH-SY5Y细胞的影响。方法将人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞分为对照组、STZ制备神经元损伤模型组(STZ 0.8 mmol/L)、罗格列酮干预组(STZ 0.8 m... 目的观察胰岛素增敏剂罗格列酮对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)所致胰岛素信号转导通路损伤的SH-SY5Y细胞的影响。方法将人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞分为对照组、STZ制备神经元损伤模型组(STZ 0.8 mmol/L)、罗格列酮干预组(STZ 0.8 mmol/L+罗格列酮20μmol/L),测定每组的细胞计数、噻唑蓝(MTT)代谢率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,观察罗格列酮对SH-SY5Y细胞的作用。结果与对照组相比,STZ模型组的细胞计数和MTT代谢率降低(P<0.01),LDH漏出率升高(P<0.01);经罗格列酮保护后,上述细胞生存指标明显改善,细胞计数和MTT代谢率均高于STZ损伤组(P<0.01),LDH漏出率降低(P<0.01)。结论罗格列酮可以减轻STZ引起的神经细胞毒性,提高细胞生存率,其作用机制尚需进一步探讨。 展开更多

关键词 人神经母细胞瘤株SH—Sy5y 链脲佐菌素 罗格列酮

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p53基因在RA诱导SH-SY5Y细胞分化后低表达

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作者 张宝 马文丽 +2 位作者 冯春琼 宋艳斌 郑文岭 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期53-55,共3页

全反式维甲酸(RA)的抑制肿瘤细胞生长和调控细胞分化的作用是一项重要的研究课题。而p53基因是一个重要的肿瘤抑制基因,在RA的作用中是否涉及到p53的作用尚有待阐明。本文用低浓度的RA(10 μmol/L)作用于SH-SY5Y细胞,每2d换一次液,在作... 全反式维甲酸(RA)的抑制肿瘤细胞生长和调控细胞分化的作用是一项重要的研究课题。而p53基因是一个重要的肿瘤抑制基因,在RA的作用中是否涉及到p53的作用尚有待阐明。本文用低浓度的RA(10 μmol/L)作用于SH-SY5Y细胞,每2d换一次液,在作用9 d后,用光学显微镜观察SH-SY5Y细胞的形态学变化,并提取细胞质总RNA进行RT-PCR反应半定量检测p53基因表达。结果显示,SH-SY5Y细胞经RA诱导后,细胞生出较长的突起,具有神经元的形态;而对照组保持成纤维细胞的形态、无明显的形态学变化。RT-PCR半定量显示,在细胞诱导后,p53基因表达明显下调。本文结果提示,RA的作用可能独立于p53基因途径,p53基因的表达变化可能是继发于RA的作用。 展开更多

关键词 P53基因 sh-sy5y细胞 分化 表达 全反式维甲酸 RA 肿瘤细胞 人成神经瘤细胞

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TSG101小干扰RNA对SH-SY5Y细胞生长和药物敏感性的作用

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作者 刘丽华 张宏卫 王承忠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1734-1739,共6页

目的:探讨TSG101基因对人神经母细胞瘤细胞生长和药物敏感性的调节作用。方法:构建TSG101基因的小干扰RNA载体并将其转导入SH-SY5Y细胞,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blotting进行鉴定;MTT法和流式细胞仪检... 目的:探讨TSG101基因对人神经母细胞瘤细胞生长和药物敏感性的调节作用。方法:构建TSG101基因的小干扰RNA载体并将其转导入SH-SY5Y细胞,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blotting进行鉴定;MTT法和流式细胞仪检测细胞转染前后生长速度和细胞周期的变化;DNAlad-der法和流式细胞仪检测细胞转染前后对顺铂诱导的凋亡的变化;Western blotting检测细胞转染前后凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax,耐药相关蛋白P-gp、MRP的表达变化。结果:成功构建了TSG101的小干扰RNA载体并将其转染SH-SY5Y细胞;筛选到稳定的TSG101低表达的神经母细胞瘤细胞模型;MTT和流式细胞仪检测结果显示,转染TSG101小干扰RNA后的细胞的生长速度显著减慢于对照组(P<0·05),且G1期的细胞比率显著高于对照组(P<0·05);DNAladder法和流式细胞仪检测结果显示,用10mg/LCDDP处理36h后,转染TSG101小干扰RNA后的细胞的凋亡数显著多于对照组(P<0·05),形成DNA条带;Western blotting显示,转染TSG101小干扰RNA后的细胞中Bcl-2和P-gp的表达明显低于对照组。结论:下调TSG101基因能抑制神经母细胞瘤细胞生长,增加细胞对化疗药物的敏感性,提示TSG101在基因治疗中具有较好的临床应用前景。 展开更多

关键词 神经母细胞瘤 基因 TSG101 RNA干扰 sh-sy5y细胞

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DARPP-32基因对SH-SY5Y细胞药物敏感性的调节作用

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作者 张宏卫 刘丽华 李伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期977-981,共5页

目的:探讨DARPP-32基因对人神经母细胞瘤细胞药物敏感性的调节作用。方法:构建DARPP-32基因的真核表达载体和小干扰RNA载体,并将它们转导入人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blottin... 目的:探讨DARPP-32基因对人神经母细胞瘤细胞药物敏感性的调节作用。方法:构建DARPP-32基因的真核表达载体和小干扰RNA载体,并将它们转导入人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Western blotting进行鉴定;MTT法检测细胞转染前后药物敏感性的变化;流式细胞仪检测细胞转染前后对阿霉素的蓄积浓度的变化;RT-PCR和Western blotting检测细胞转染前后耐药相关蛋白P-gp、MRP和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达变化。结果:成功构建了DARPP-32基因的真核表达载体和小干扰RNA载体;筛选到稳定的DARPP-32高/低表达的神经母细胞瘤细胞模型;MTT试验和流式细胞仪检测结果显示,上调DARPP-32的表达能够显著增强神经母细胞瘤细胞对长春新碱、阿霉素、5-氟尿嘧啶和顺铂的敏感性,提高细胞内阿霉素的蓄积(P<0.05),转染DARPP-32小干扰RNA后的细胞对化疗药物的敏感性降低,细胞内的阿霉素蓄积量显著减少(P<0.05);RT-PCR和Westernblotting结果显示,DARPP-32能够下调P-gp和Bcl-2的表达。结论:DARPP-32基因能够调节神经母细胞瘤细胞对化疗药物的敏感性,具有较好的临床应用前景。 展开更多

关键词 神经母细胞瘤 基因 DARPP-32 RNA干扰 SH—Sy5y细胞

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红花黄色素B对冈田酸致SH-SY5Y神经元损伤的保护作用 被引量：3

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作者 郝雪言 李刚 +4 位作者 韦瑶 刘敬 张文彦 李忌 马成俊 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期461-468,共8页

本研究目的是考察红花黄色素B(SYB)对冈田酸(OA)致SH-SY5Y神经元损伤的保护作用。采用全反式维甲酸(ATRA)诱导SH-SY5Y细胞分化为成熟神经元,OA诱导神经元损伤,建立Tau蛋白过度磷酸化的神经元突触萎缩模型;Giemsa染色法观察SH-SY5Y细胞... 本研究目的是考察红花黄色素B(SYB)对冈田酸(OA)致SH-SY5Y神经元损伤的保护作用。采用全反式维甲酸(ATRA)诱导SH-SY5Y细胞分化为成熟神经元,OA诱导神经元损伤,建立Tau蛋白过度磷酸化的神经元突触萎缩模型;Giemsa染色法观察SH-SY5Y细胞形态学变化;Western Blot检测Tau蛋白262位点磷酸化水平;流式细胞术检测细胞总活性氧(ROS)和线粒体源ROS水平,以及线粒体膜电位的变化。结果表明,ATRA可诱导SH-SY5Y细胞分化为成熟神经元;OA可致神经元突触萎缩和Tau蛋白在262位点过度磷酸化;SYB能够改善OA所致成熟神经元损伤,降低Tau蛋白在262位点的磷酸化水平,其保护作用机制可能与减少胞内及线粒体源ROS产生,提高线粒体膜电位有关。 展开更多

关键词 红花黄色素B sh-sy5y人神经母细胞瘤细胞 冈田酸 TAU蛋白

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