目的观察Beta-淀粉样蛋白(beta-amyloid,Aβ)对体外培养人神经母细胞瘤细胞(SHSY5Y)的毒性作用。方法将体外培养的人神经母细胞瘤细胞,分为BSA对照组(0.5 mg/m L)、Aβ组(Aβ1-42寡聚体,50μg/m L)和Aβ+p75-FC组(50μg/m L Aβ1-42+100...目的观察Beta-淀粉样蛋白(beta-amyloid,Aβ)对体外培养人神经母细胞瘤细胞(SHSY5Y)的毒性作用。方法将体外培养的人神经母细胞瘤细胞,分为BSA对照组(0.5 mg/m L)、Aβ组(Aβ1-42寡聚体,50μg/m L)和Aβ+p75-FC组(50μg/m L Aβ1-42+100μg/m L p75-FC,p75-FC为p75NTR胞外段与人Ig G FC段的融合蛋白,能够竞争性阻断p75NTR),分别干预72 h,采用结晶紫染色法观测SH-SY5Y细胞轴突的生长长度,采用MTT法检测SH-SY5Y细胞存活率。结果干预结束后,Aβ组SH-SY5Y细胞轴突长度(42.83±14.98)μm明显短于BSA对照组[(69.76±19.24)μm,P=0.003];在同时给予p75-FC干预后,其轴突长度(65.37±17.52)μm与BSA对照组轴突长度比较差异无统计学意义(P=0.600)。Aβ组SH-SY5Y细胞D(490)值(0.203±0.068)明显低于BSA对照组(0.428±0.094,P=0.002);在同时给予p75-FC干预后,其D(490)值(0.447±0.103)与BSA对照组比较差异无统计学意义(P=0.768)。结论 Aβ对人神经母细胞瘤细胞具有毒性作用,且通过p75NTR介导实现。展开更多
目的:初步研究肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)入侵人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的机制。方法:将临床EV71分离株接种于人横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RD)细胞,扩增和纯化病毒;MTT法检测不同病毒胞吞途径阻断剂对SKN-SH细胞生长...目的:初步研究肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)入侵人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的机制。方法:将临床EV71分离株接种于人横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RD)细胞,扩增和纯化病毒;MTT法检测不同病毒胞吞途径阻断剂对SKN-SH细胞生长抑制作用;用特异性的化学阻断剂预处理靶细胞后,Taq Man real-time PCR验证其对EV71 m RNA表达的影响。结果:RD细胞能够成功扩增出EV71病毒,病毒滴度为1×105 TCID50。随着药物浓度梯度的增加,SK-N-SH细胞的生长增殖受到抑制。Taq Man荧光定量RT-PCR结果显示氯丙嗪(chlorpromazine,CPZ)能够抑制EV71 m RNA的表达(Ρ<0.05),制霉菌素(nystatin,NT)对其影响不大(Ρ>0.05)。结论:初步推测EV71入侵SK-N-SH细胞是通过网格蛋白依赖性的内吞作用入胞。展开更多
文摘目的观察Beta-淀粉样蛋白(beta-amyloid,Aβ)对体外培养人神经母细胞瘤细胞(SHSY5Y)的毒性作用。方法将体外培养的人神经母细胞瘤细胞,分为BSA对照组(0.5 mg/m L)、Aβ组(Aβ1-42寡聚体,50μg/m L)和Aβ+p75-FC组(50μg/m L Aβ1-42+100μg/m L p75-FC,p75-FC为p75NTR胞外段与人Ig G FC段的融合蛋白,能够竞争性阻断p75NTR),分别干预72 h,采用结晶紫染色法观测SH-SY5Y细胞轴突的生长长度,采用MTT法检测SH-SY5Y细胞存活率。结果干预结束后,Aβ组SH-SY5Y细胞轴突长度(42.83±14.98)μm明显短于BSA对照组[(69.76±19.24)μm,P=0.003];在同时给予p75-FC干预后,其轴突长度(65.37±17.52)μm与BSA对照组轴突长度比较差异无统计学意义(P=0.600)。Aβ组SH-SY5Y细胞D(490)值(0.203±0.068)明显低于BSA对照组(0.428±0.094,P=0.002);在同时给予p75-FC干预后,其D(490)值(0.447±0.103)与BSA对照组比较差异无统计学意义(P=0.768)。结论 Aβ对人神经母细胞瘤细胞具有毒性作用,且通过p75NTR介导实现。
文摘目的:初步研究肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)入侵人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的机制。方法:将临床EV71分离株接种于人横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RD)细胞,扩增和纯化病毒;MTT法检测不同病毒胞吞途径阻断剂对SKN-SH细胞生长抑制作用;用特异性的化学阻断剂预处理靶细胞后,Taq Man real-time PCR验证其对EV71 m RNA表达的影响。结果:RD细胞能够成功扩增出EV71病毒,病毒滴度为1×105 TCID50。随着药物浓度梯度的增加,SK-N-SH细胞的生长增殖受到抑制。Taq Man荧光定量RT-PCR结果显示氯丙嗪(chlorpromazine,CPZ)能够抑制EV71 m RNA的表达(Ρ<0.05),制霉菌素(nystatin,NT)对其影响不大(Ρ>0.05)。结论:初步推测EV71入侵SK-N-SH细胞是通过网格蛋白依赖性的内吞作用入胞。
