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猕猴静脉推注加滴注重组人碱性成纤维细胞生长因子后的药代动力学 被引量：6
1
作者 刘秀文 汤仲明 +3 位作者 宋海峰 朱宝珍 王丽萍 张洋 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期220-222,共3页
目的　研究猕猴静脉推注加滴注 (2 0 %∶80 % )10、2 0和 4 0 μg·kg- 1重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)后血清抗原浓度 时间变化和药代动力学并与静脉推注比较。方法　ELISA法 ,测定浓度的专一性、灵敏度、重现性和测定范... 目的　研究猕猴静脉推注加滴注 (2 0 %∶80 % )10、2 0和 4 0 μg·kg- 1重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)后血清抗原浓度 时间变化和药代动力学并与静脉推注比较。方法　ELISA法 ,测定浓度的专一性、灵敏度、重现性和测定范围 ,血清回收率和精密度均良好。结果　猕猴血清内源性水平(14 4± 10 1)ng·L- 1;静脉推注后即刻浓度最高 ,分别为 (33± 16 ) ,(5 6± 8)和 (91± 2 8) μg·L- 1,滴注期间稳定在 2 2～ 2 7,37～ 4 4和 6 3～ 6 5 μg·L- 1,提示控制药量和滴注速率可使浓度维持在不同水平。停药后浓度迅速下降 ,平均末端相半衰期 (t1/ 2 )为 2 .6～2 .9h。AUC( 0～∞ ) 随剂量成正比增大 ,全身清除率Cls不变。结论　在给药量范围内表现为线性药代动力学。静脉推注药代动力学与推注加滴注组相近。 展开更多
关键词 猕猴 静脉推注 静脉滴注 重组人碱性成纤维细胞生长因子 药代动力学 酶联免疫吸附测定
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重组人碱性成纤维细胞生长因子的纯化及生物活性鉴定 被引量：4
2
作者 汪炬 洪岸 +3 位作者 林剑 余榕捷 孙奋勇 谢秋玲 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2002年第3期111-115,共5页
目的 :探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)的纯化工艺和活性鉴定 .方法 :将rhbFGF工程菌大量扩增后通过包涵体提取、复性、阳离子交换、凝胶过滤等技术进行纯化 .结果 :纯化后的rhbFGF ,相对分子质量为 17× 10 3,蛋白纯度... 目的 :探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)的纯化工艺和活性鉴定 .方法 :将rhbFGF工程菌大量扩增后通过包涵体提取、复性、阳离子交换、凝胶过滤等技术进行纯化 .结果 :纯化后的rhbFGF ,相对分子质量为 17× 10 3,蛋白纯度为 95 %以上 ,比活为 1 7× 10 6 U/mg ,对NIH3T3细胞具有明显的促分裂活性 .结论 :通过复性和两步层析的纯化方法可获得高纯度、高回收率和高生物活性的rhbFGF 。 展开更多
关键词 重组人碱性成纤维细胞生长因子 包涵体 纯化 生物活性 多肽生长因子 基因工程
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重组人碱性成纤维细胞生长因子对缩小兔急性心肌梗死面积作用的观察 被引量：5
3
作者 李易 马雁冰 +3 位作者 孙林 冮宏映 光雪峰 蒲里津 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期232-234,共3页
目的 :探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)对缩小兔急性心肌梗死面积的作用。方法 :将 3 6只日本大耳白兔分为 2组 :①生理盐水对照组 (n =11) ,②rhbFGF组 (n =2 5 )。在无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支 ,建立急性心肌... 目的 :探讨重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhbFGF)对缩小兔急性心肌梗死面积的作用。方法 :将 3 6只日本大耳白兔分为 2组 :①生理盐水对照组 (n =11) ,②rhbFGF组 (n =2 5 )。在无菌条件下开胸结扎兔冠状动脉左前降支 ,建立急性心肌梗死动物模型 ;制备rhbFGF蛋白 ,将其直接 4点注入兔缺血心肌内 ,通过心肌酶学及心电图QRS积分观察rhbFGF对兔急性心肌梗死面积的影响。结果 :①血清心肌酶学观察 :2组左前降支结扎后 2 4h与基础值比较血清谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶同工酶、肌酸激酶、肌酸激酶MB同工酶、α 羟丁酸脱氢酶均明显增高 ,有非常显著性差异 (P <0 0 1) ,2组左前降支结扎后48h与基础值比较 ,除生理盐水组的谷草转氨酶和rhbFGF组的谷草转氨酶及乳酸脱氢酶同工酶外 ,其它均明显增高 ,有非常显著性差异 (P <0 0 1)。左前降支结扎后 48h ,rhbFGF组较生理盐水对照组乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶同工酶、肌酸激酶及肌酸激酶MB同工酶明显降低 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。生理盐水对照组乳酸脱氢酶同工酶 ,左前降支结扎后48h与左前降支结扎后 2 4h比较升高 ,而在rhbFGF组降低 ,均有显著性差异 (P <0 0 5 )。②心电图QRS积分 :左前降支结扎后 6周rhbFGF组QRS积分 (4 3 0± 0 95 ) 展开更多
关键词 重组人碱性成纤维细胞生长因子 急性心肌梗死 心肌酶学 心电图
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重组人碱性成纤维细胞生长因子突变体[Ser^(69,87)]的表达、纯化及其稳定性研究 被引量：2
4
作者 吴晓萍 冯辉 +3 位作者 李校堃 苏志坚 郑青 黄亚东 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期168-172,共5页
目的:对野生型人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)进行突变改造以提高其稳定性。方法:采用PCR突变方法,将hbFGFcDNA第6 9位和87位的Cys密码子突变为Ser密码子,所得的突变片断插入表达载体pET3c的表达框架中,构建了表达菌株BL2 1(DE3) /pET... 目的:对野生型人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)进行突变改造以提高其稳定性。方法:采用PCR突变方法,将hbFGFcDNA第6 9位和87位的Cys密码子突变为Ser密码子,所得的突变片断插入表达载体pET3c的表达框架中,构建了表达菌株BL2 1(DE3) /pET3c [Ser69,87]hbFGF ,IPTG诱导表达。通过离子交换、肝素亲和两步层析的方法分离纯化突变体蛋白[Ser69,87]hbFGF。MTT法测定重组蛋白的促分裂活性。并对突变体蛋白的抗蛋白酶水解能力、热稳定性及其酸碱稳定性进行了检测。结果:所构建的表达菌株,其[Ser69,87]hbFGF的表达量占菌体总蛋白的30 %以上。经两步层析纯化,获得了纯度达98%的突变体[Ser69,87]hbFGF。纯化的样品促Balb/c 3T3细胞增殖的活性与野生型hbFGF相当。突变体[Ser69,87]hbFGF抗胰蛋白酶水解的能力较野生型hbFGF强;热稳定性和酸碱稳定性也较野生型hbFGF高。结论:突变体[Ser69,87]hbFGF的生物学活性与野生型hbFGF相当,其稳定性明显高于野生型hbFGF。 展开更多
关键词 人碱性成纤维细胞生长因子 突变体 稳定性
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重组人碱性成纤维细胞生长因子促进急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管再生 被引量：2
5
作者 王晓杰 李晶 +6 位作者 田海山 马吉胜 周鑫 刘孝菊 王艳芳 姚娜 李校堃 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期979-982,F0002,共5页
目的:研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)对急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管再生的作用,探讨通过心肌缺血区小血管再生治疗冠心病的新途径。方法:制备急性心肌梗死大鼠模型,60只大鼠随机分为心肌梗死模型组、rhbFGF高剂量组(50mg&#... 目的:研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)对急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管再生的作用,探讨通过心肌缺血区小血管再生治疗冠心病的新途径。方法:制备急性心肌梗死大鼠模型,60只大鼠随机分为心肌梗死模型组、rhbFGF高剂量组(50mg·L-1)、rhbFGF低剂量组(25mg·L-1)和假手术组;造模前心肌内多点注射rhbFGF。24h、2周和4周后利用形态学和组织学方法测定各组心肌梗死面积,并进行缺血心肌微血管密度和病理组织学检查。结果:大鼠急性心肌梗死24h、2和4周后,rhbFGF高、低剂量组心肌梗死面积缩小,与模型组比较差异有显著性(P<0.05);2和4周后,rhbFGF高、低剂量组血管生成增加,与模型组及假手术组比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05);24h、2和4周后,病理切片HE染色,模型组显示梗死区心肌细胞水肿,心肌纤维断裂,部分心肌细胞溶解,炎细胞浸润;rhbFGF高、低剂量组梗死区亦出现心肌细胞水肿,少见心肌纤维断裂、心肌细胞溶解。结论:rhbFGF有促进缺血心肌血管再生,缩小急性心肌梗死大鼠心肌梗死面积的作用。 展开更多
关键词 心肌梗死 重组人碱性成纤维细胞生长因子 血管再生
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利用昆虫杆状病毒载体表达人碱性成纤维细胞生长因子 被引量：2
6
作者 王雅梅 孙丽翠 +3 位作者 闫豫东 司杨 张静宜 祁雅慧 《首都医科大学学报》 CAS 2007年第2期229-233,共5页
目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将人碱性成纤维细胞生长因子(human basic fibroblast growth factor,hbFGF)基因进行表达,并检测重组蛋白的特异性及生物学活性。方法将人bFGF的cDNA克隆至杆状病毒转座载体pFastBacHTb中,并转化到... 目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,将人碱性成纤维细胞生长因子(human basic fibroblast growth factor,hbFGF)基因进行表达,并检测重组蛋白的特异性及生物学活性。方法将人bFGF的cDNA克隆至杆状病毒转座载体pFastBacHTb中,并转化到含穿梭载体Bacmid的感受态细菌DH10Bac中,获得重组Bacmid/bFGF;纯化DNA后,转染昆虫细胞Sf21,PCR鉴定重组病毒;进一步将重组病毒感染Sf21细胞,在Sf21细胞中进行表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳、Western bloting分析;MTT法检测表达产物的生物活性。结果重组Bacmid/bFGFDNA直接转染昆虫细胞得到重组病毒rAcV-Bac-bFGF,病毒滴度MOI值≈8。重组病毒在感染后48h开始出现一相对分子质量为23000大小的特异带,感染后72h蛋白量明显增加,96h蛋白量达到最大,120h蛋白量开始减少。在正常昆虫Sf21细胞的对照中未见该蛋白带。Western bloting显示目的蛋白条带与人bFGF抗体发生特异反应。MTT结果显示重组蛋白能明显促进3T3细胞的分裂增殖。结论利用杆状病毒表达系统可成功表达具有生物学活性的bFGF蛋白。 展开更多
关键词 人碱性成纤维细胞生长因子 Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 昆虫细胞 基因表达
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放射性同位素示踪法和酶联免疫法研究重组人碱性成纤维细胞生长因子在家兔体内的药代动力学 被引量：2
7
作者 张琪 王广基 孙建国 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期536-539,共4页
目的比较用放射性同位素示踪法和酶联免疫法两种方法研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)在家兔体内的药代动力学结果的异同。方法用放射性同位素125I标记示踪法和酶联免疫法(ELISA)两种方法测定rhbFGF在家兔血清中的经时浓度。... 目的比较用放射性同位素示踪法和酶联免疫法两种方法研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)在家兔体内的药代动力学结果的异同。方法用放射性同位素125I标记示踪法和酶联免疫法(ELISA)两种方法测定rhbFGF在家兔血清中的经时浓度。结果家兔耳缘静脉注射4,2,1μg/kgrhbFGF后,用放射性同位素125I标记示踪法测得的t1/2分别为9884,7515,7157min,Cltot约5min;酶联免疫法测得的t1/2分别为1718,1624,2392min,Cltot约10min;剂量与AUC皆有良好的线性关系(r同位素=09999;rElisa=09982)。两种方法所得的结果有相关性,同时也存在较大差异,rhbFGF在家兔体内的消除比125IrhbFGF快。结论放射性标记的药物在动物体内的处置不等同于非标记药物。 展开更多
关键词 重组人碱性成纤维细胞生长因子 药代动力学 放射性同位素^125I标记示踪法 酶联免疫法
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外用重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗慢性伤口68例 被引量：4
8
作者 黄玲英 罗建武 《医药导报》 CAS 2015年第S01期21-22,共2页
目的探讨外用重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗慢性伤口的疗效.方法将108例慢性感染性伤口按随机数字表法分为治疗组与对照组,治疗组68例,采用外用重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗;对照组40例,采用皮维碘治疗.结果治疗组愈合率85.3%... 目的探讨外用重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗慢性伤口的疗效.方法将108例慢性感染性伤口按随机数字表法分为治疗组与对照组,治疗组68例,采用外用重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗;对照组40例,采用皮维碘治疗.结果治疗组愈合率85.3%,总有效率92.6%,明显高于对照组(分别为62.5%,77.5%)(P<0.01或P<0.05),治疗组愈合时间和显效时间分别为(16.2±5.3),(7.1±3.2)d,对照组分别为(25.1±7.4),(11.8±4.7)d(P<0.01).结论外用重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗慢性感染性伤口痊愈快,疗效显著. 展开更多
关键词 重组人碱性成纤维细胞生长因子 伤口 生长因子 换药
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人碱性成纤维细胞生长因子在昆虫细胞sf9中的表达
9
作者 王雅梅 孙丽翠 +4 位作者 祁雅慧 司杨 闫豫东 殷红 张静宜 《首都医科大学学报》 CAS 2004年第4期431-434,共4页
将人碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)基因cDNA克隆到pFastBacI转移载体中 ,重组质粒转化到感受态细胞DH1 0Bac中 ,使目的基因转座入BacmidDNA中 ,纯化DNA后 ,利用病毒噬斑实验筛选重组的杆状病毒。重组杆状... 将人碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)基因cDNA克隆到pFastBacI转移载体中 ,重组质粒转化到感受态细胞DH1 0Bac中 ,使目的基因转座入BacmidDNA中 ,纯化DNA后 ,利用病毒噬斑实验筛选重组的杆状病毒。重组杆状病毒感染Sf9细胞 ,在Sf9细胞中进行表达。Western印迹结果表明 :表达产物为相对分子质量约 1 70 0 0的蛋白 ,与预计的重组蛋白相对分子质量相同 ,并具有较好的免疫学活性。MTT检测证实表达产物能明显促进人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)的分裂增生 。 展开更多
关键词 表达 FGF 昆虫细胞 HUVEC MTT检测 增生 人脐静脉内皮细胞 人碱性成纤维细胞生长因子 感受态细胞 目的基因
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重组人碱性成纤维细胞生长因子对缺血心肌血管结构的作用观察
10
作者 孙林 李易 +3 位作者 光雪峰 冮宏映 马雁冰 戴长柏 《中国心血管杂志》 2004年第3期163-165,共3页
目的　观察重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhb FGF)对缺血心肌血管结构的作用。方法　建立兔急性心肌梗死模型 ,将 rhb FGF直接四点注射入兔缺血心肌内 ,通过病理切片图像分析观察缺血心肌血管管壁及管腔变化情况。结果　 rhb FGF组与... 目的　观察重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rhb FGF)对缺血心肌血管结构的作用。方法　建立兔急性心肌梗死模型 ,将 rhb FGF直接四点注射入兔缺血心肌内 ,通过病理切片图像分析观察缺血心肌血管管壁及管腔变化情况。结果　 rhb FGF组与生理盐水组平均管壁厚度分别为 6周 :(2 0 .70± 9.94 ) μm,(18.88± 9.6 5 ) μm,P>0 .0 5 ;12周 :(2 9.87± 12 .96 )μm,(18.13± 11.33)μm,P<0 .0 1;管壁管腔比值分别为 6周 :0 .2 5± 0 .12 ,0 .2 4± 0 .0 2 ,P>0 .0 5 ;12周 :0 .33± 0 .14 ,0 .2 4± 0 .0 9,P >0 .0 5。结论　 rhb FGF促缺血心肌血管新生到一定时期 (可能小于 12周 ) ,血管数量不再增长 ,只是血管管腔增大 ,管壁增厚 ,发生血管重构。 展开更多
关键词 重组人碱性成纤维细胞生长因子 血管重构 兔
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重组人碱性成纤维细胞生长因子基因工程菌的高密度培养 被引量：1
11
作者 沈林南 魏东芝 俞俊棠 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期11-14,共4页
根据重组人碱性成纤维细胞生长因子基因工程菌的生长特点，对其高密度发酵工艺条件进行研究和改进，采用“平衡DO-State”控制策略进行分批补料培养中的葡萄糖流加，有效地控制了培养过程中代谢副产物-乙酸的产生及其对工程菌生长的抑... 根据重组人碱性成纤维细胞生长因子基因工程菌的生长特点，对其高密度发酵工艺条件进行研究和改进，采用“平衡DO-State”控制策略进行分批补料培养中的葡萄糖流加，有效地控制了培养过程中代谢副产物-乙酸的产生及其对工程菌生长的抑制作用，使发酵终了时乙酸浓度由15．6g/L下降为2.6g/L，而菌体密度则由15．2gDCW/L提高到30．2gDCW/L。 展开更多
关键词 人碱性成纤维细胞生长因子 基因工程菌
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重组人碱性成纤维细胞生长因子对大鼠十二指肠溃疡的治疗作用及临床前安全性评价 被引量：1
12
作者 李文广 张艳霞 +1 位作者 吴勇杰 高明堂 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第11期1279-1282,共4页
目的:研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)对大鼠十二指肠溃疡(DU)的治疗作用并评价其安全性。方法:用半胱胺制备大鼠DU模型;用小鼠及比格犬给药观察rh-bFGF的急性毒性;用大鼠及比格犬给药90d观察rh-bFGF的长期毒性。结果:rh-bFG... 目的:研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)对大鼠十二指肠溃疡(DU)的治疗作用并评价其安全性。方法:用半胱胺制备大鼠DU模型;用小鼠及比格犬给药观察rh-bFGF的急性毒性;用大鼠及比格犬给药90d观察rh-bFGF的长期毒性。结果:rh-bFGF对半胱胺诱导的大鼠慢性DU有良好的治疗作用,剂量为5×103、1×104AU/kg时,DU面积较对照组显著减小,溃疡表面的柱状腺上皮再生速度明显增快。rh-bFGF组溃疡表面全部或几乎全部为再生腺上皮所覆盖者近60%,而法莫替丁组仅13%。rh-bFGF一次给药(i.g.和i.v.)对小鼠和犬的最大耐受量分别大于2×106AU/kg和3.5×105AU/kg,分别相当于人临床拟用量(24000AU)的4167倍和729倍。rh-bFGF连续p.o.给药90d,不影响大鼠和比格犬的外观、一般行为活动及生长发育;血液学和血液生化学指标与正常对照组比较,均未见明显差异;对骨髓造血功能也无明显影响;病理检查未见脏器组织形态学改变。结论:rh-bFGF能明显促进DU表面腺上皮再生与溃疡愈合,未见明显急性和长期毒性反应。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 十二指肠溃疡 大鼠 比格犬 毒性
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人碱性成纤维细胞生长因子腺病毒表达载体的构建及其在人脐静脉内皮细胞中的表达 被引量：1
13
作者 郭伶俐 邢新 +1 位作者 刘刊 韩妲丽 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期408-411,共4页
目的:构建人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast cell growth factor,bFGF)腺病毒载体,并观察其在体外血管内皮细胞中的表达。方法:采用同源重组的方法,构建重组腺病毒Ad5-bFGF。携有绿色荧光蛋白(green fluorescence pro- tein,G... 目的:构建人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast cell growth factor,bFGF)腺病毒载体,并观察其在体外血管内皮细胞中的表达。方法:采用同源重组的方法,构建重组腺病毒Ad5-bFGF。携有绿色荧光蛋白(green fluorescence pro- tein,GFP)的Ad5腺病毒转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC),检测最佳转染复数。Ad5- bFGF体外转染HUVEC,免疫细胞化学法、Western印迹法检测bFGF蛋白的表达。结果:Ad5转染HUVEC的最佳转染复数为200,转染率为90％。免疫细胞化学法和Western即迹结果显示bFGF基因以Ad5为载体可以在HUVEC的胞质和胞核表达．并且表达量较未转染的HUVEC明显增加。结论:成功构建了携带bFGF基因的腺病毒载体,体外可以成功表达,为bFGF基因治疗及肿瘤发病机制的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子2 腺病毒科 基因表达 脐静脉 内皮 血管
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重组人碱性成纤维细胞生长因子结构类似物在大肠杆菌中的高效稳定表达研究(英文) 被引量：1
14
作者 陈琼玉 孙奋勇 +3 位作者 陈小佳 谢秋玲 孙晋华 洪岸 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期247-250,共4页
目的:用基因工程的方法获得高效稳定表达的重组人碱性成纤维细胞生长因子结构类似物。方法:利用定点突变技术,将天然hbFGF的第78与96位半胱氨酸替换为丝氨酸,通过载体pET-3c ,突变基因被克隆并转化至大肠杆菌BL21( DE3) plysS,IPTG诱导... 目的:用基因工程的方法获得高效稳定表达的重组人碱性成纤维细胞生长因子结构类似物。方法:利用定点突变技术,将天然hbFGF的第78与96位半胱氨酸替换为丝氨酸,通过载体pET-3c ,突变基因被克隆并转化至大肠杆菌BL21( DE3) plysS,IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析蛋白表达结果。结果:纯化后突变蛋白的可溶性成分大幅度增加,而二聚体与多聚体显著减少至纯化后总蛋白的8 %以下。MTT法的结果表明,结构类似物蛋白具有良好的生物学活性。这种新的结构类似物蛋白能较好地替代天然hbFGF在临床上的使用。结论:在不影响生物学活性的条件下,对个别氨基酸残基进行突变以获得新的结构类似物的方法,能够有效提高外源蛋白在大肠杆菌中表达的稳定性及可溶性。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子2 结构类似物 大肠杆菌
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人碱性成纤维细胞生长因子基因真核表达载体的构建
15
作者 吴宏 张绍昆 +1 位作者 王桂云 张晓光1 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期352-354,共3页
目的 :构建人碱性成纤维细胞生长因子 b FGF基因真核表达载体 ,探讨 b FGF基因转移治疗视网膜病变的方法。方法 :将 b FGF和 GFP基因克隆到真核表达载体 pc DNA3中。结果 :酶切及琼脂糖电泳分析 pc FG中含有 b FGF和 GFP基因。结论
关键词 绿色荧光蛋白 碱性成纤维细胞生长因子 真核表达载体 视网膜病变 基因治疗
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人碱性成纤维细胞生长因子cDNA的克隆及在毕赤酵母中的表达
16
作者 牟旭鹏 孔宁 +3 位作者 申茉函 韩东 张林 颜炜群 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期755-758,共4页
目的:克隆和表达人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF),以便进一步研究其功能。方法:从人神经胶质瘤细胞中提取总RNA,采用RT-PCR方法,扩增出hbFGF cDNA片段,与pMD18-T载体连接后作DNA序列分析,并用亚克隆的方法构建pPICZα-hbfFGF,将测序正... 目的:克隆和表达人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF),以便进一步研究其功能。方法:从人神经胶质瘤细胞中提取总RNA,采用RT-PCR方法,扩增出hbFGF cDNA片段,与pMD18-T载体连接后作DNA序列分析,并用亚克隆的方法构建pPICZα-hbfFGF,将测序正确的重组质粒用SacI线性化后电转化至毕赤酵母X-33,经PCR法、SDS-PAGE和Western blotting分析表达产物,从而筛选出能够稳定、高效分泌表达hbFGF的酵母工程菌。结果:经测序证实获得的hbFGF序列与GenBank(登录号NM002006)报道的完全一致,甲醇诱导表达后培养液上清的SDS-PAGE凝胶电泳显示在相对分子质量约18000有一蛋白条带,Western blotting结果显示表达产物与抗人碱性成纤维细胞生长因子抗体产生特异性条带,证明rhbFGF蛋白的表达。结论:成功克隆了hbFGF基因,并在毕赤酵母体系中进行了表达。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子2 毕赤酵母 逆转录聚合酶链反应
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应用重组人碱性成纤维细胞生长因子促进创面愈合的临床研究
17
《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第z1期38-39,共2页
目的:观察重组人碱性成纤维细胞生长因子(recombinant human basic fibroblast growth factor, rh-bFGF)对烧伤、手术取皮区和慢性创面愈合的影响,并探讨用药方法.方法:将128例患者创面按创面类型分为烧伤、手术取皮区、慢性创面3类.在... 目的:观察重组人碱性成纤维细胞生长因子(recombinant human basic fibroblast growth factor, rh-bFGF)对烧伤、手术取皮区和慢性创面愈合的影响,并探讨用药方法.方法:将128例患者创面按创面类型分为烧伤、手术取皮区、慢性创面3类.在常规治疗同时,实验组加用rh-bFGF.烧伤、手术取皮区创面采用随机自身对照法,慢性创面采用相同个体治疗前后创面情况对照.分别观察创面愈合时间、用药前后血尿常规、肝肾功能变化及不良反应.结果:经rh-bFGF治疗的128例烧伤、手术取皮区、慢性创面的愈合时间较对照组缩短.尤其对深Ⅱ度、中厚皮片取皮区创面,愈合时间较对照组缩短3～5d,rh-bFGF对烧伤、手术取皮区、慢性创面治疗平均有效率为91.88%,未见毒副作用及不良反应.结论:rh-bFGF具有促进烧伤、皮肤外伤、慢性创面愈合的作用,尤其对深Ⅱ度烧伤、严重皮肤外伤(中厚皮片取皮伤)、慢性创面促进愈合作用更为显著. 展开更多
关键词 重组人碱性成纤维细胞生长因子 创面 愈合
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重组人碱性成纤维细胞生长因子的药效试验
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作者 潘铙苘 方定海 张仁龙 《上海畜牧兽医通讯》 北大核心 2000年第1期20-20,共1页
关键词 碱性成纤维细胞 生长因子 药效试验 烫伤治疗
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重组人碱性成纤维细胞生长因子胶囊对大鼠慢性胃溃疡愈合质量的影响 被引量：9
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作者 路莉 吴勇杰 +1 位作者 高明堂 李文广 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期75-78,共4页
目的　研究rh bFGF对大鼠慢性胃溃疡愈合质量的影响。方法　制备大鼠醋酸性溃疡模型 ,用rh bFGF灌胃治疗 ,待溃疡愈合后继续治疗 10d(共治疗 30d)时取材检查 ,从胃黏膜屏障组织结构和胃黏液屏障两方面评价rh bFGF对大鼠慢性胃溃疡愈合... 目的　研究rh bFGF对大鼠慢性胃溃疡愈合质量的影响。方法　制备大鼠醋酸性溃疡模型 ,用rh bFGF灌胃治疗 ,待溃疡愈合后继续治疗 10d(共治疗 30d)时取材检查 ,从胃黏膜屏障组织结构和胃黏液屏障两方面评价rh bFGF对大鼠慢性胃溃疡愈合质量的影响。结果　rh bFGF(5 0 0 0～ 10 0 0 0AU·kg-1)可使再生胃黏膜明显增厚 ,降低再生胃黏膜异型程度 ,使再生胃黏膜排列状态接近正常。rh bFGF(2 5 0 0～ 10 0 0 0AU·kg-1)可增加溃疡愈合后瘢痕组织内胶原密度 ,毛细血管密度 ,增加再生胃黏膜表面黏液量、黏多糖层厚度 ,及再生胃黏膜内PGE2 含量。结论　rh bFGF有促进胃黏膜屏障结构成熟 ,提高胃黏液屏障功能 。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 慢性胃溃疡 溃疡愈合质量 大鼠
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饲粮维生素D_(3)缺乏或过量时蛋鸡成纤维细胞生长因子23/克洛索蛋白轴的响应及其对蛋品质的影响
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作者 王梦瑶 曹林鹏 +5 位作者 秦林 朱子均 刘福 谢越盛 郭辉 曹满湖 《动物营养学报》 北大核心 2025年第8期5475-5485,共11页
本研究从成纤维细胞生长因子23/克洛索蛋白(FGF23/Klotho)轴出发,探究蛋鸡饲粮维生素D_(3)缺乏或过量与维生素D代谢的相关性及其对蛋品质的影响。采用单因素完全随机设计,选取96只42周龄罗曼粉蛋鸡,随机分为4组,每组8个重复,每个重复3... 本研究从成纤维细胞生长因子23/克洛索蛋白(FGF23/Klotho)轴出发,探究蛋鸡饲粮维生素D_(3)缺乏或过量与维生素D代谢的相关性及其对蛋品质的影响。采用单因素完全随机设计,选取96只42周龄罗曼粉蛋鸡,随机分为4组,每组8个重复,每个重复3只鸡。各组试验鸡分别饲喂在基础饲粮中添加0(缺乏)、2000(低水平)、4000(正常水平)和8000 IU/kg(过量)维生素D_(3)的饲粮。试验期4周。结果表明:1)0 IU/kg组蛋鸡蛋壳强度和蛋壳比重低于2000和4000 IU/kg组,但差异不显著(P>0.05);胫骨脱脂重显著低于2000和4000 IU/kg组(P<0.05);血清碱性磷酸酶活性显著高于其他3组(P<0.05),血清1,25-二羟基维生素D_(3)[1,25(OH)_(2)D_(3)]、FGF23含量显著低于其他3组(P<0.05),血清Klotho含量也低于其他3组,但差异不显著(P>0.05)。0和2000 IU/kg组蛋鸡十二指肠核维生素D受体(nVDR)的mRNA相对表达量显著低于4000和8000 IU/kg组(P<0.05),十二指肠钠依赖Ⅱb型磷转运蛋白(Na/Pi-Ⅱb)的mRNA相对表达量显著低于8000 IU/kg组(P<0.05);0 IU/kg组蛋鸡肾脏FGF23和细胞色素P450家族27亚家族B成员1(CYP27B1)的mRNA相对表达量显著高于其他3组(P<0.05),肾脏Klotho的mRNA相对表达量显著高于2000和8000 IU/kg组(P<0.05)。2)8000 IU/kg组蛋鸡蛋壳强度、蛋壳比重、胫骨灰分重均低于2000和4000 IU/kg组,但差异不显著(P>0.05);胫骨脱脂重显著低于2000和4000 IU/kg组(P<0.05);血清1,25(OH)_(2)D_(3)含量显著低于4000 IU/kg组(P<0.05),血清FGF23和Klotho含量也均低于4000 IU/kg组,但差异不显著(P>0.05)。8000 IU/kg组蛋鸡十二指肠膜维生素D受体(mVDR)、nVDR和Na/Pi-Ⅱb的mRNA相对表达量显著高于其他3组(P<0.05);肾脏FGF23、Klotho和CYP27B1的mRNA相对表达量与2000和4000 IU/kg组无显著差异(P>0.05)。综上所述,饲粮维生素D_(3)缺乏或过量均会导致蛋品质下降,且与FGF23/Klotho轴及维生素D代谢有关,但这2种情况下蛋鸡体内的响应指标和调控机制存在差异。当饲粮维生素D_(3)缺乏时,蛋鸡肾脏FGF23、Klotho和CYP27B1作为内在响应指标,参与蛋品质及钙磷代谢的调控;而当饲粮维生素D_(3)过量时,蛋鸡十二指肠nVDR、mVDR和Na/Pi-Ⅱb为参与蛋品质和钙磷代谢调控的内在响应指标。 展开更多
关键词 蛋鸡 维生素D_(3) 成纤维细胞生长因子23/克洛索蛋白轴 蛋品质
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