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人皮肤角质形成细胞的胰蛋白酶消化分离及无血清培养被引量：19: 1; 作者丁锐沈彤 +3 位作者涂登云魏凌珍孙美芳朱启星《安徽医科大学学报》 CAS 2003年第6期415-418,共4页; 目的　探索用DMEM SF培养基对经胰蛋白酶两步消化分离的人角质形成细胞进行培养的方法和条件。方法　取临床整形外科手术后剩余皮肤 ,用 0 2 5 %的胰蛋白酶经冷和温两步消化分离后 ,用DMEM SF完全培养基于 5 %CO2 、37℃培养 ,绘制生... 展开更多; 关键词人皮肤角质形成细胞胰蛋白酶无血清培养细胞培养细胞鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

机械损伤对人皮肤角质形成细胞氧化应激和前列腺素E2分泌的影响被引量：1: 2; 作者傅秀军石有振 +2 位作者方勇姚敏王莹《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期905-908,共4页; 目的探讨机械损伤对人皮肤角质形成细胞前列腺素E2(PGE2)分泌的影响及其可能的机制。方法将体外培养的人皮肤角质形成细胞(HaCaT)分为损伤组、NADPH氧化酶(NOX)抑制剂氯化二亚苯基碘鎓(DPI)预处理组和抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理... 展开更多; 关键词人皮肤角质形成细胞机械损伤氧化应激前列腺素E2; 在线阅读下载PDF 职称材料

体外培养对人皮肤角质形成细胞蛋白质组的影响: 3; 作者吴晓萍曾耀英 +1 位作者聂燕芳刘钧澄《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第10期1704-1706,共3页; 目的:探讨体外长期培养对人皮肤角质形成细胞蛋白质组的影响。方法:制备原代和第7代体外培养的人皮肤角质形成细胞的总蛋白样品进行双向凝胶电泳。采用PDQuest图像分析软件对获得的双向凝胶电泳图谱进行分析。串联飞行时间质谱鉴定选取... 展开更多; 关键词电脉凝胶双向人皮肤角质形成细胞质谱 RT-PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

环氧化酶2介导化学性缺氧诱导的人角质形成细胞的炎症损伤作用被引量：7: 4; 作者杨春涛杨战利 +8 位作者莫利球曾凡钦张美芬张辉韩艳芳胡芬兰爱平陈培熹冯鉴强《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期69-73,共5页; 目的探讨环氧化酶2(COX-2)在化学性缺氧模拟剂氯化钴(CoCl2)诱导永生化人皮肤角质形成细胞(HaCaT)毒性及炎症反应中的作用。方法用CoCl2处理HaCaT细胞,建立化学性缺氧诱导人皮肤角质形成细胞损伤的实验模型。CCK-8比色法检测细胞存活率,... 展开更多; 关键词化学性缺氧人皮肤角质形成细胞炎症反应环氧化酶-2 白细胞介素-6 白细胞介素-8; 在线阅读下载PDF 职称材料

化学性低氧模拟剂氯化钴诱导人角质形成细胞炎症反应的研究被引量：4: 5; 作者林春喜张美芬 +6 位作者杨春涛杨战利凌宏忠孟金兰曾凡钦陈培熹冯鉴强《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期633-637,共5页; 目的探讨化学性低氧模拟剂氯化钴对人皮肤角质形成细胞(HaCat)炎症反应的影响。方法用不同浓度的CoCl2处理HaCat细胞,建立化学性低氧诱导皮肤细胞损伤的实验模型后,检测细胞存活率、细胞内活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)、细胞培养液... 展开更多; 关键词化学性低氧人皮肤角质形成细胞白细胞介素6 白细胞介素8 炎症反应血红素加氧酶1; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人皮肤角质形成细胞的胰蛋白酶消化分离及无血清培养被引量：19: 1; 作者丁锐沈彤涂登云魏凌珍孙美芳朱启星; 机构安徽医科大学公共卫生学院毒理中心实验室; 出处《安徽医科大学学报》 CAS 2003年第6期415-418,共4页; 基金安徽省自然科学基金项目 (编号 :0 3 0 43 80 1) 安徽省教育厅自然科学重点科研项目(编号 :2 0 0 3KJ0 3 6ZD); 文摘目的　探索用DMEM SF培养基对经胰蛋白酶两步消化分离的人角质形成细胞进行培养的方法和条件。方法　取临床整形外科手术后剩余皮肤 ,用 0 2 5 %的胰蛋白酶经冷和温两步消化分离后 ,用DMEM SF完全培养基于 5 %CO2 、37℃培养 ,绘制生长曲线 ,并用单克隆抗角蛋白抗体和鼠 IgG免疫组化试剂盒进行细胞鉴定。结果　用胰蛋白酶两步消化分离的角质形成细胞在DMEM SF培养基中可正常生长 2周以上 ,生长曲线显示细胞在第 4天进入对数生长期 ,第 10天进入停滞期。鉴定显示角质形成细胞占 95 %以上。来源于 3个不同个体的皮肤角质形成细胞经等量混合后培养与单独培养相比 ,细胞生长无统计学差异。结论　用胰蛋白酶对人皮肤进行冷和温两步消化分离的角质形成细胞 ,在DMEM SF完全培养基中生长状况良好 ,其他细胞污染少 ,实验成本低廉 ,操作简单。; 关键词人皮肤角质形成细胞胰蛋白酶无血清培养细胞培养细胞鉴定; Keywords human keratinocyte cell bulture bell identify; 分类号 R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名机械损伤对人皮肤角质形成细胞氧化应激和前列腺素E2分泌的影响被引量：1: 2; 作者傅秀军石有振方勇姚敏王莹; 机构上海交通大学医学院附属第三人民医院烧伤整形科创伤医学研究所; 出处《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期905-908,共4页; 基金上海市科委基金(10ZR1418400)~~; 文摘目的探讨机械损伤对人皮肤角质形成细胞前列腺素E2(PGE2)分泌的影响及其可能的机制。方法将体外培养的人皮肤角质形成细胞(HaCaT)分为损伤组、NADPH氧化酶(NOX)抑制剂氯化二亚苯基碘鎓(DPI)预处理组和抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理组,三组细胞经划痕法建立体外机械损伤细胞模型,以未建模的HaCaT细胞作为对照组。于建模后不同时点收集损伤组、DPI预处理组和对照组的细胞及各组细胞的培养上清液,分别采用荧光探针技术和化学发光法测定细胞内活性氧(ROS)的生成和NOX活性,以酶联免疫吸附试验检测各组细胞培养上清液中前列腺素E2(PGE2)的质量浓度。结果建模后各时点,损伤组和DPI预处理组细胞内ROS生成和NOX活性均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);DPI预处理组建模后各时点细胞内ROS生成和NOX活性均显著低于损伤组(P<0.05或P<0.01)。各组细胞培养上清液中PGE2质量浓度的检测结果显示:建模后各时点,损伤组、DPI预处理组和NAC预处理组均显著高于对照组(P<0.01),DPI预处理组和NAC预处理组均显著低于损伤组(P<0.01)。结论机械损伤后人皮肤角质形成细胞的PGE2分泌量增加,其机制可能与细胞内ROS生成增加和NOX活性升高所介导的氧化应激有关。; 关键词人皮肤角质形成细胞机械损伤氧化应激前列腺素E2; Keywords human skin keratinocyte mechanical damage oxidative stress prostaglandin E2; 分类号 R641 [医药卫生—外科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名体外培养对人皮肤角质形成细胞蛋白质组的影响: 3; 作者吴晓萍曾耀英聂燕芳刘钧澄; 机构暨南大学组织移植与免疫实验中心中山大学附属第一医院小儿外科; 出处《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第10期1704-1706,共3页; 基金国家高技术研究发展计划项目863计划项目(编号:2007AA02Z110) 国家自然科学基金项目(编号:30973671) +1 种基金温州市科技计划项目(编号:Y20090244)生物化学与分子生物学广东省重点学科资助项目; 文摘目的:探讨体外长期培养对人皮肤角质形成细胞蛋白质组的影响。方法:制备原代和第7代体外培养的人皮肤角质形成细胞的总蛋白样品进行双向凝胶电泳。采用PDQuest图像分析软件对获得的双向凝胶电泳图谱进行分析。串联飞行时间质谱鉴定选取的差异表达蛋白质点。半定量RT-PCR对差异表达蛋白质的mRNA水平进行确证。结果:获得了蛋白质分离效果较好的双向凝胶电泳图谱,串联飞行时间质谱鉴定选取的2个在第7代角质形成细胞中表达显著下调的蛋白质分别为PA-FABP(psoriasis-associated fatty acidbinding protein5)和Galectin-7,半定量RT-PCR确证第7代角质形成细胞中PA-FABP和Galectin-7的基因转录水平较原代角质形成细胞相应的基因转录水平显著降低。结论:体外长期培养人皮肤角质形成细胞可能影响一些与细胞的脂肪酸代谢及细胞凋亡相关蛋白的表达。; 关键词电脉凝胶双向人皮肤角质形成细胞质谱 RT-PCR; Keywords Electrophoresis gel two-dimensional Human skin keratinocytes Mass spectrometry RT-PCR; 分类号 R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名环氧化酶2介导化学性缺氧诱导的人角质形成细胞的炎症损伤作用被引量：7: 4; 作者杨春涛杨战利莫利球曾凡钦张美芬张辉韩艳芳胡芬兰爱平陈培熹冯鉴强; 机构中山大学中山医学院生理学教研室中山大学附属第一医院黄埔院区麻醉科中山大学孙逸仙纪念医院皮肤科中山大学护理学院第三军医大学附属西南医院全军肝胆外科研究所; 出处《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期69-73,共5页; 基金广东省科技计划资助项目(No2010B080701035 2008B080703053); 文摘目的探讨环氧化酶2(COX-2)在化学性缺氧模拟剂氯化钴(CoCl2)诱导永生化人皮肤角质形成细胞(HaCaT)毒性及炎症反应中的作用。方法用CoCl2处理HaCaT细胞,建立化学性缺氧诱导人皮肤角质形成细胞损伤的实验模型。CCK-8比色法检测细胞存活率,ELISA试剂盒检测细胞培养基中白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)的水平,Western blot法检测COX-2蛋白的表达。结果 2 000μmol.L-1 CoCl2处理HaCaT细胞0～3 h,可上调COX-2的表达,1 h COX-2表达开始升高,2 h表达达到高峰。用0、500、1 000和2 000μmol.L-1 CoCl2处理HaCaT细胞2 h可剂量依赖性地上调COX-2的表达。2 000μmol.L-1 CoCl2处理HaCaT细胞0～8 h可时间依赖性地降低HaCaT细胞存活率,半数致死时间(LT50)在6 h左右。2 000μmol.L-1 CoCl2处理HaCaT细胞6 h可促进HaCaT细胞释放IL-6和IL-8。选择性COX-2抑制剂(NS-398)可明显对抗2 000μmol.L-1 CoCl2处理引起的细胞毒性及CoCl2诱导的IL-6和IL-8的释放增加。结论 COX-2介导化学性缺氧诱导的HaCaT细胞毒性及炎症损伤作用。; 关键词化学性缺氧人皮肤角质形成细胞炎症反应环氧化酶-2 白细胞介素-6 白细胞介素-8; Keywords chemical hypoxia human keratinocytes inflammation cyclooxygenase-2 interleukin-6 interleukin-8; 分类号 R329.24 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名化学性低氧模拟剂氯化钴诱导人角质形成细胞炎症反应的研究被引量：4: 5; 作者林春喜张美芬杨春涛杨战利凌宏忠孟金兰曾凡钦陈培熹冯鉴强; 机构中山大学附属第一医院CGU科中山大学护理学院中山大学中山医学院生理学教研室中山大学附属第一医院皮肤科中山大学附属第二医院皮肤科; 出处《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期633-637,共5页; 基金广东省科技计划资助项目(No2008B080703053); 文摘目的探讨化学性低氧模拟剂氯化钴对人皮肤角质形成细胞(HaCat)炎症反应的影响。方法用不同浓度的CoCl2处理HaCat细胞,建立化学性低氧诱导皮肤细胞损伤的实验模型后,检测细胞存活率、细胞内活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)、细胞培养液中白介素6(IL-6)和白介素8(IL-8)水平以及血红素加氧酶(HO-1)表达。结果在500～3000μmol.L-1浓度范围内,CoCl2可降低HaCat细胞存活率,且CoCl2剂量越大、细胞存活率降低越明显;2000μmol.L-1CoCl2能诱导HaCat细胞产生氧化应激反应,使胞内ROS生成增多,MMP降低;CoCl2能诱导HaCat细胞产生炎症反应,使IL-6和IL-8释放增多;1000～3000μmol.L-1CoCl2能上调HO-1的表达。结论CoCl2在诱导HaCat细胞产生氧化应激反应的同时,也能引起炎症反应,促进IL-6和IL-8的释放及HO-1表达上调。; 关键词化学性低氧人皮肤角质形成细胞白细胞介素6 白细胞介素8 炎症反应血红素加氧酶1; Keywords chemical hypoxia human skin keratinocytes interleukin 6 interleukin 8 inflammatory reaction heme oxygenase-1; 分类号 R322.99 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R329.25 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人皮肤角质形成细胞的胰蛋白酶消化分离及无血清培养	丁锐沈彤涂登云魏凌珍孙美芳朱启星	《安徽医科大学学报》 CAS	2003	19	在线阅读下载PDF 职称材料
2	机械损伤对人皮肤角质形成细胞氧化应激和前列腺素E2分泌的影响	傅秀军石有振方勇姚敏王莹	《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	体外培养对人皮肤角质形成细胞蛋白质组的影响	吴晓萍曾耀英聂燕芳刘钧澄	《实用医学杂志》 CAS 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	环氧化酶2介导化学性缺氧诱导的人角质形成细胞的炎症损伤作用	杨春涛杨战利莫利球曾凡钦张美芬张辉韩艳芳胡芬兰爱平陈培熹冯鉴强	《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心	2011	7	在线阅读下载PDF 职称材料
5	化学性低氧模拟剂氯化钴诱导人角质形成细胞炎症反应的研究	林春喜张美芬杨春涛杨战利凌宏忠孟金兰曾凡钦陈培熹冯鉴强	《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心	2010	4	在线阅读下载PDF 职称材料