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重组人白血病抑制因子对HL-60细胞的作用及机制研究
被引量：
5
1
作者
杜冰
朱道银
唐恩洁
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2003年第3期270-272,共3页
目的 :观察rh -LIF对HL - 6 0细胞生长与分化的影响及其可能的作用机制。方法 :不同剂量的rh -LIF作用HL -6 0细胞 3- 6天 ,观察细胞生长 ,流式细胞术分析细胞周期 ,用免疫组化法检测P5 3,P2 1蛋白表达的变化 ,原位杂交法检测P5 3mRNA...
目的 :观察rh -LIF对HL - 6 0细胞生长与分化的影响及其可能的作用机制。方法 :不同剂量的rh -LIF作用HL -6 0细胞 3- 6天 ,观察细胞生长 ,流式细胞术分析细胞周期 ,用免疫组化法检测P5 3,P2 1蛋白表达的变化 ,原位杂交法检测P5 3mRNA表达水平的改变。结果 :rh -LIF可诱导HL - 6 0细胞向单核 /巨噬细胞分化 ,抑制HL - 6 0细胞的增殖 ,使细胞停滞于G1期 :P5 3,P2 1蛋白和P5 3mRNA表达明显增强。结论 :rh -LIF对HL - 6 0细胞具增殖抑制和诱导分化作用 ,其作用机制可能与G1期阻滞及P5 3,P2 1表达增高有关。
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关键词
重组
人白血病抑制因子
诱导分化
生长
抑制
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职称材料
人白血病抑制因子(LIF)基因的人工合成
被引量：
1
2
作者
杨林
王全忠
+2 位作者
吴无畏
龙綮新
王珣章
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
1999年第S1期86-89,共4页
根据人白血病抑制因子基因的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 序列， 通过合理的引物设计、链延伸反应、 Ｐ Ｃ Ｒ 反应以及分子克隆等步骤， 成功地合成出编码成熟 Ｌ Ｉ Ｆ 蛋白的基因片段， 并将其克隆至ｐ Ｕ Ｃ１８ 载体质粒上． 序列分析和酶切鉴定显...
根据人白血病抑制因子基因的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 序列， 通过合理的引物设计、链延伸反应、 Ｐ Ｃ Ｒ 反应以及分子克隆等步骤， 成功地合成出编码成熟 Ｌ Ｉ Ｆ 蛋白的基因片段， 并将其克隆至ｐ Ｕ Ｃ１８ 载体质粒上． 序列分析和酶切鉴定显示 Ｌ Ｉ Ｆ 基因得到了正确合成和克隆， 同时还就基因人工合成的优越性和特殊序列的甲基化问题进行了探讨．
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关键词
人白血病抑制因子
基因
人工合成
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职称材料
人白血病仰制因子基因在酵母中的融合表达
3
作者
王全忠
杨林
+2 位作者
欧阳菁
龙綮新
王珣章
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期96-99,共4页
用ＰＣＲ突变的方法使人白血病抑制因子基因的终止密码子缺失，并与质粒ｐＰＩＣＺαＡ上的ｍｙｃ表位及６个组氨酸处于同一读码框，构建融合表达载体ｐＰＩＣＺαＡ－ｈＬＩＦＭ．通过氯化理化学转化法使表达载体整合到毕赤巴斯德酵母...
用ＰＣＲ突变的方法使人白血病抑制因子基因的终止密码子缺失，并与质粒ｐＰＩＣＺαＡ上的ｍｙｃ表位及６个组氨酸处于同一读码框，构建融合表达载体ｐＰＩＣＺαＡ－ｈＬＩＦＭ．通过氯化理化学转化法使表达载体整合到毕赤巴斯德酵母Ｘ－３３的基因组ＤＮＡ中。转化子经甘油增菌和甲醇诱导，实现了ｈＬＩＦ基因在毕赤酵母表达载体系统中的表达．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测和 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析结果表明在相对分子质量为６１ ０００处有一条人白血病抑制因子特异蛋白带．凝胶薄层扫描分析结果显示表达的目的蛋白占培养液上清总蛋白的 ３３．３％．且该表达产物具有抑制小鼠畸胎瘤细胞Ｆ９克隆形成的活性．
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关键词
人白血病抑制因子
基因
毕赤酵母
融合表达
生物活性测定
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职称材料
题名
重组人白血病抑制因子对HL-60细胞的作用及机制研究
被引量：
5
1
作者
杜冰
朱道银
唐恩洁
机构
重庆医科大学基础医学院微生物学教研室
川北医学院微生物学教研室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2003年第3期270-272,共3页
文摘
目的 :观察rh -LIF对HL - 6 0细胞生长与分化的影响及其可能的作用机制。方法 :不同剂量的rh -LIF作用HL -6 0细胞 3- 6天 ,观察细胞生长 ,流式细胞术分析细胞周期 ,用免疫组化法检测P5 3,P2 1蛋白表达的变化 ,原位杂交法检测P5 3mRNA表达水平的改变。结果 :rh -LIF可诱导HL - 6 0细胞向单核 /巨噬细胞分化 ,抑制HL - 6 0细胞的增殖 ,使细胞停滞于G1期 :P5 3,P2 1蛋白和P5 3mRNA表达明显增强。结论 :rh -LIF对HL - 6 0细胞具增殖抑制和诱导分化作用 ,其作用机制可能与G1期阻滞及P5 3,P2 1表达增高有关。
关键词
重组
人白血病抑制因子
诱导分化
生长
抑制
Keywords
rh-LIF
Differentiation
Growth inhibition
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
人白血病抑制因子(LIF)基因的人工合成
被引量：
1
2
作者
杨林
王全忠
吴无畏
龙綮新
王珣章
机构
中山大学生物防治国家重点实验室
出处
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
1999年第S1期86-89,共4页
文摘
根据人白血病抑制因子基因的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 序列， 通过合理的引物设计、链延伸反应、 Ｐ Ｃ Ｒ 反应以及分子克隆等步骤， 成功地合成出编码成熟 Ｌ Ｉ Ｆ 蛋白的基因片段， 并将其克隆至ｐ Ｕ Ｃ１８ 载体质粒上． 序列分析和酶切鉴定显示 Ｌ Ｉ Ｆ 基因得到了正确合成和克隆， 同时还就基因人工合成的优越性和特殊序列的甲基化问题进行了探讨．
关键词
人白血病抑制因子
基因
人工合成
Keywords
LIF
gene
artificial synthesis
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
在线阅读
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职称材料
题名
人白血病仰制因子基因在酵母中的融合表达
3
作者
王全忠
杨林
欧阳菁
龙綮新
王珣章
机构
中山大学生物医药中心 //生物防治国家重点实验室
出处
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期96-99,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(39800108)
文摘
用ＰＣＲ突变的方法使人白血病抑制因子基因的终止密码子缺失，并与质粒ｐＰＩＣＺαＡ上的ｍｙｃ表位及６个组氨酸处于同一读码框，构建融合表达载体ｐＰＩＣＺαＡ－ｈＬＩＦＭ．通过氯化理化学转化法使表达载体整合到毕赤巴斯德酵母Ｘ－３３的基因组ＤＮＡ中。转化子经甘油增菌和甲醇诱导，实现了ｈＬＩＦ基因在毕赤酵母表达载体系统中的表达．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测和 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析结果表明在相对分子质量为６１ ０００处有一条人白血病抑制因子特异蛋白带．凝胶薄层扫描分析结果显示表达的目的蛋白占培养液上清总蛋白的 ３３．３％．且该表达产物具有抑制小鼠畸胎瘤细胞Ｆ９克隆形成的活性．
关键词
人白血病抑制因子
基因
毕赤酵母
融合表达
生物活性测定
Keywords
human leukemia inhibitory factor gene
Pichica pastoris
fusion expression
bioactivity assay
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组人白血病抑制因子对HL-60细胞的作用及机制研究
杜冰
朱道银
唐恩洁
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2003
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人白血病抑制因子(LIF)基因的人工合成
杨林
王全忠
吴无畏
龙綮新
王珣章
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
1999
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
人白血病仰制因子基因在酵母中的融合表达
王全忠
杨林
欧阳菁
龙綮新
王珣章
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2001
0
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