人白细胞介素2重组逆转录病毒载体的构建与表达 被引量：3

1

作者 章卫平 曹雪涛 +3 位作者 王建莉 马施华 黄欣 于益芝 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第3期186-190,共5页

通过RT-PCR克隆到含有全部编码序列的人IL-2 cDNA．并经核苷酸测序加以证实，将其克隆至逆转录病毒载体pLXSN，构建成人IL-2的重组逆转录病毒表达载体pLXSN-hIL2．体外经CRIP细胞包装后病毒滴度达7.6×10^4CFU／ml,NIH 3T3小鼠成纤... 通过RT-PCR克隆到含有全部编码序列的人IL-2 cDNA．并经核苷酸测序加以证实，将其克隆至逆转录病毒载体pLXSN，构建成人IL-2的重组逆转录病毒表达载体pLXSN-hIL2．体外经CRIP细胞包装后病毒滴度达7.6×10^4CFU／ml,NIH 3T3小鼠成纤维细胞感染hIL-2重组逆转录病毒后．分泌IL-2水平达118.2U／ml；PCR从其基因组DNA中扩增到NeoR基因片段．提示重组逆转录病毒载体已整合至宿主细胞的基因组DNA中。本研究为开展人IL-2基因治疗奠定了基础. 展开更多

关键词 人白细胞介素2 重组逆转录病毒载体 构建 表达 基因治疗 肿瘤瘤苗

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稳定表达人白细胞介素2肝干细胞系的建立 被引量：1

2

作者 郑和鸣 蔡秀军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期341-344,共4页

目的:通过逆转录病毒介导,建立能稳定高效表达白介素2的肝干细胞WB-F344。方法:构建逆转录病毒载体Plpcx-IL-2质粒,转染包装细胞PT67,收集细胞培养上清,检测病毒的滴度。将高滴度的PT67/Plpcx-IL-2病毒液感染肝干细胞WB-F344,用嘌呤霉... 目的:通过逆转录病毒介导,建立能稳定高效表达白介素2的肝干细胞WB-F344。方法:构建逆转录病毒载体Plpcx-IL-2质粒,转染包装细胞PT67,收集细胞培养上清,检测病毒的滴度。将高滴度的PT67/Plpcx-IL-2病毒液感染肝干细胞WB-F344,用嘌呤霉素加压筛选出抗性克隆,并用RT-PCR、间接免疫荧光实验、免疫组化实验和Western blot实验证实抗性细胞在转录水平和蛋白水平均有白介素2的表达情况。结果:成功构建含白介素2的逆转录病毒载体,获得滴度为105CFU/ml的感染性病毒液。建立的细胞系在转录水平和蛋白水平均有白介素2的表达。结论:成功建立了稳定表达人白细胞介素2的肝干细胞系WB-F344/Plpcx-IL-2,为下一步开展研究以肝干细胞为载体肝癌免疫基因治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 人白细胞介素2 WB-F344细胞 稳定表达

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重组人白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素融合蛋白的纯化及复性 被引量：6

3

作者 胡志明 林来兴妹 +2 位作者 周明乾 陈泽洪 王小宁 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期206-207,214,共3页

目的探讨该所发明的新方法对重组人白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素(IL2-PE664Glu)融合蛋白进行纯化与复性的效果。方法采用该所发明的新方法提纯包涵体,包涵体复性后,样品经DEAE-SepharoseFF离子交换层析,获得融合蛋白纯品。结果获得的具... 目的探讨该所发明的新方法对重组人白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素(IL2-PE664Glu)融合蛋白进行纯化与复性的效果。方法采用该所发明的新方法提纯包涵体,包涵体复性后,样品经DEAE-SepharoseFF离子交换层析,获得融合蛋白纯品。结果获得的具有生物学活性的融合蛋白纯度达到95%,复性回收率为80%。结论此包涵体分离纯化技术简便、实用,可为中试研究和规模化生产提供基础。 展开更多

关键词 重组人白细胞介素-2 绿脓杆菌外毒素 融合蛋白 纯化 复性

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一种高纯度、无SDS的重组人白细胞介素2制备方法

4

作者 邹钟诚 娄丹 +2 位作者 张叔人 吴益民 鲁志新 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1995年第2期15-18,共4页

由Ｅ．ｃｏｌｉ表达的重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）以包含体形式存在于工程菌胞浆中，经超声破碎等步骤处理提取包合体，用盐酸胍（ＧｕＨＣｌ）将其溶解后经ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００分子筛提纯，复性后再用单克隆抗体柱进行亲... 由Ｅ．ｃｏｌｉ表达的重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）以包含体形式存在于工程菌胞浆中，经超声破碎等步骤处理提取包合体，用盐酸胍（ＧｕＨＣｌ）将其溶解后经ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００分子筛提纯，复性后再用单克隆抗体柱进行亲和层析纯化，结果可使ｒＩＬ－２纯度达９９％以上，平均比活性为１．０×１０７Ｕ／ｍｇ蛋白左右，产品不含ＳＤＳ，残余鼠ＩｇＧ含量测定符合生物制品规程要求。 展开更多

关键词 重组 人白细胞介素2 制备

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突变型人白细胞介素-2基因在巴斯德毕赤酵母中的表达 被引量：6

5

作者 刘堰 胡应和 +1 位作者 欧阳克清 蔡绍皙 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期618-624,共7页

为了提高人重组白细胞介素 2的稳定性和活性以及减少毒副作用 ,有必要定向改造rhIL 2的分子结构 .用PCR法从白细胞介素 2 (IL 2 )cDNA全序列中扩增成熟的肽基因片段 ,并利用定点突变技术将人重组白细胞介素 2第 12 5位游离的半胱氨酸... 为了提高人重组白细胞介素 2的稳定性和活性以及减少毒副作用 ,有必要定向改造rhIL 2的分子结构 .用PCR法从白细胞介素 2 (IL 2 )cDNA全序列中扩增成熟的肽基因片段 ,并利用定点突变技术将人重组白细胞介素 2第 12 5位游离的半胱氨酸编码序列突变为丙氨酸序列 .编码 18位亮氨酸的序列突变为蛋氨酸序列 ;编码 19位亮氨酸的序列突变为丝氨酸序列 .突变型人白细胞介素 2 (MvIL 2 )基因与表达载体pPIC9K重组 ,酶切线性化后用Invitrogen转化毕赤酵母试剂盒导入酵母细胞进行整合 ,经筛选得到一高表达白介素 2的克隆 .SDS PAGE显示 ,表达量约占总量的4 5 7% .经Western印迹验证 ,重组人白介素 2有免疫活性 ;与野生型IL 2相比 ,所获得的突变型IL 2纯品的比活性为 4 0× 10 7IU mg蛋白 ,比天然型IL 2高 4～ 展开更多

关键词 突变型人白细胞介素—2基因 巴斯德毕赤酵母 表达 定点突变

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重组人白细胞介素-2序贯治疗80岁以上急性髓系白血病的观察

6

作者 李骏 柴铁 +3 位作者 褚金龙 高彩凤 果丽实 李静 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第6期661-662,共2页

随着有效治疗方案的推出,年轻发病的急性髓系细胞性白血病（Acute Myelogenous Leukemia,AML）的预后已取得了巨大的进展。然而,老年患者,尤其是高龄患者（年龄≥80岁），由于其生理特征、发病特点及预后因素的特征，治疗效果及预后极... 随着有效治疗方案的推出,年轻发病的急性髓系细胞性白血病（Acute Myelogenous Leukemia,AML）的预后已取得了巨大的进展。然而,老年患者,尤其是高龄患者（年龄≥80岁），由于其生理特征、发病特点及预后因素的特征，治疗效果及预后极差。随着人口老龄化现象日益明显，老年AML发病不断增加，高龄AML也相应增加。国外报道超过10％AML患者的年龄在80岁以上，而国内报道也在7．5％。由于脏器功能衰退及其生物遗传学特点，导致老年AML疗效差，预后不良。特别是高龄AML，多采用以对症支持治疗为主的姑息疗法。 展开更多

关键词 急性髓系白血病 重组人白细胞介素-2 序贯治疗 老年患者 预后因素 发病特点 对症支持治疗 人口老龄化

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表达人白细胞介素-2的重组腺病毒的制备

7

作者 徐人尔 应蓓蓓 +2 位作者 王义斌 赵寿元 李昌本 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1997年第1期15-18,共4页

携带人白细胞介素-2（interleukin－2，IL－2）cDNA序列的E1区缺陷的腺病毒载体pAdl2／RSV－IL2－bpA与pJM17质粒，通过磷酸钙沉淀法共转染293细胞，经同源重组，获得了一个腺病毒噬斑。抽提腺病毒DNA，运用PCR扩增及XbaI酶切检测，证... 携带人白细胞介素-2（interleukin－2，IL－2）cDNA序列的E1区缺陷的腺病毒载体pAdl2／RSV－IL2－bpA与pJM17质粒，通过磷酸钙沉淀法共转染293细胞，经同源重组，获得了一个腺病毒噬斑。抽提腺病毒DNA，运用PCR扩增及XbaI酶切检测，证实这一噬斑为带有人IL－2cNDA序列的重组腺病毒。受其感染的293细胞和人黑素瘤A375细胞上清中，都能够测出IL－2的活性，表明制备的重组腺病毒是能表达人IL－2的，可进一步用于恶性肿瘤的基因治疗。 展开更多

关键词 人白细胞介素-2 腺病毒 重组体

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毕赤酵母工程菌表达人白细胞介素——2突变体发酵条件的优化 被引量：6

8

作者 易巧 宋小双 +1 位作者 朱祥伟 刘堰 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期85-90,共6页

巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌(KM71/pPIC9K-MvhIL-2,本室构建)能分泌表达三突变体人白细胞介素-2(MvhIL-2),突变位点分别为125 Cys→Ala;18leu→Met;19leu→Ser.通过对其发酵条件的研究,探索重组人白细胞介素-2突变体工程菌KM... 巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌(KM71/pPIC9K-MvhIL-2,本室构建)能分泌表达三突变体人白细胞介素-2(MvhIL-2),突变位点分别为125 Cys→Ala;18leu→Met;19leu→Ser.通过对其发酵条件的研究,探索重组人白细胞介素-2突变体工程菌KM71/pPIC9K-IL-2的生长及产物表达规律,通过3因素(即:发酵液起始pH值、甲醇诱导浓度、诱导时间)从3个不同水平上进行正交试验,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,得出摇瓶发酵表达MvhIL-2的最佳条件:发酵液初始pH 6.0,甲醇诱导浓度为0.5%,诱导72 h,最终使目的产物达到菌体总蛋白的30%以上,表达的MvhIL-2考马斯亮蓝染色条带最明显,为其进一步上发酵罐,大量生产重组人白细胞介素-2奠定了基础. 展开更多

关键词 毕赤酵母 人白细胞介素-2突变体 正交试验

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顶空毛细管气相色谱法测定重组人白细胞介素-2中的残留乙腈 被引量：2

9

作者 蒋立云 汤群 +1 位作者 洑立峰 屠春燕 《南京工业大学学报（自然科学版）》 CAS 2007年第3期71-74,共4页

建立重组人白细胞介素-2中乙腈残留量的顶空气相色谱测定方法.采用聚乙二醇-20000石英毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25μm）,高纯氮为载气,顶空进样,氢火焰离子化检测器（FID）检测.乙腈在1.014-5.070μg/mL的质量浓度范围内呈... 建立重组人白细胞介素-2中乙腈残留量的顶空气相色谱测定方法.采用聚乙二醇-20000石英毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25μm）,高纯氮为载气,顶空进样,氢火焰离子化检测器（FID）检测.乙腈在1.014-5.070μg/mL的质量浓度范围内呈良好的线性关系（相关系数r为0.997 3）,平均回收率为97.2%（相对标准偏差RSD为2.8%）,乙腈的最小检测限为0.6μg/mL.所用方法简便、灵敏度高、重复性好,可用于重组人白细胞介素-2中乙腈残留量的测定. 展开更多

关键词 顶空气相色谱 重组人白细胞介素-2 乙腈残留量

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艾迪注射液联合注射用重组人白细胞介素-2治疗肺腺癌胸腔积液30例 被引量：2

10

作者 钱俊峰 徐芳 《医药导报》 CAS 北大核心 2012年第1期23-24,共2页

目的观察艾迪注射液联合注射用重组人白细胞介素-2胸腔内注射治疗肺腺癌胸腔积液的疗效。方法将60例肺腺癌恶性胸腔积液患者随机分为治疗组和对照组各30例,治疗组将艾迪注射液60 mL、注射用重组人白细胞介素-2 100万U注入胸腔后,再用2%... 目的观察艾迪注射液联合注射用重组人白细胞介素-2胸腔内注射治疗肺腺癌胸腔积液的疗效。方法将60例肺腺癌恶性胸腔积液患者随机分为治疗组和对照组各30例,治疗组将艾迪注射液60 mL、注射用重组人白细胞介素-2 100万U注入胸腔后,再用2%利多卡因5 mL注入胸腔,每周1次,如胸腔积液再聚集,则重复上述治疗,最多4次。对照组将顺铂60～100 mg溶于0.9%氯化钠注射液50 mL中注入胸腔,再用2%利多卡因5 mL注入胸腔,每周1次,如胸腔积液再积聚,则重复上述治疗,最多4次。观察疗效及不良反应。结果治疗组总有效率(83.3%)显著高于对照组(56.7%,χ2=5.08,P<0.05)。治疗组出现胸痛、恶心呕吐、发热分别为4,2,2例,对照组分别为5,5,6例,治疗组与对照组不良反应发生率(分别为26.7%和53.3%)比较差异有统计学意义(χ2=4.59,P<0.05)。结论艾迪联合注射用重组人白细胞介素-2治疗肺腺癌恶性胸腔积液疗效好,不良反应轻,患者易于接受。 展开更多

关键词 艾迪注射液 注射用重组人白细胞介素-2 顺铂 肺腺癌 胸腔积液

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Ser-125突变型人白细胞介素-2在家兔乳腺中的瞬时表达

11

作者 李云华 王公金 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期312-315,共4页

将Ser-125突变型人白细胞介素-2(Ser-125 hIL-2)cDNA与山羊β-乳球蛋白(BLG)基因的上游调控序列融合,构建了pBLG-Ser-125 hIL-2乳腺定位表达载体.试验取6只家兔,将表达载体经乳腺导管注入妊娠后期家兔乳腺内,进行瞬时表达.分别于家兔分... 将Ser-125突变型人白细胞介素-2(Ser-125 hIL-2)cDNA与山羊β-乳球蛋白(BLG)基因的上游调控序列融合,构建了pBLG-Ser-125 hIL-2乳腺定位表达载体.试验取6只家兔,将表达载体经乳腺导管注入妊娠后期家兔乳腺内,进行瞬时表达.分别于家兔分娩后1～10 d采奶,用ELISA方法检测乳汁中Ser-125 hIL-2含量.结果显示:注射空白对照和pIL-2质粒的2只家兔均未表达;2只直接注射表达载体的家兔中1只有表达,含量为0.06～0.53 μg/L,1只未表达;2只注射用脂质体包裹的表达载体的家兔均获表达,含量为0.18～2.36 μg/L.本试验结果证实将乳腺作为评估和筛选乳腺定位表达载体的可行性. 展开更多

关键词 Ser-125突变型人白细胞介素-2 Β-乳球蛋白 乳腺 瞬时表达 家兔

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Hsp65与IL-2融合蛋白诱导小鼠细胞免疫应答及保护力 被引量：3

12

作者 师长宏 张海 +4 位作者 席丽 张廷芬 赵勇 王丽梅 徐志凯 《中国比较医学杂志》 CAS 2008年第10期24-28,共5页

目的研究Hsp65与hIL-2的融合蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力。方法在大肠杆菌中诱导表达Hsp65与hIL-2的融合蛋白,通过Ni-NTA亲合柱纯化后的蛋白经鉴定后,与佐剂DDA和MPL联合免疫小鼠,连续免疫3次,每次间隔2周,最后一次免疫结束... 目的研究Hsp65与hIL-2的融合蛋白在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力。方法在大肠杆菌中诱导表达Hsp65与hIL-2的融合蛋白,通过Ni-NTA亲合柱纯化后的蛋白经鉴定后,与佐剂DDA和MPL联合免疫小鼠,连续免疫3次,每次间隔2周,最后一次免疫结束后两周,分离5只小鼠脾淋巴细胞,测定淋巴细胞增殖指数,IFN-γ和IL-2水平,以及特异性淋巴细胞杀伤功能,其余5只免疫小鼠用于MTB毒株攻击实验。结果获得融合蛋白可分别与抗Hsp65和抗hIL-2的单抗发生特异性反应。融合蛋白免疫小鼠后,小鼠脾淋巴细胞被有效活化,诱导产生的-γIFN和IL-2的水平以及CTL杀伤功能均显著高于BCG和单纯Hsp65免疫组(P<0.05)。融合蛋白免疫组可有效抵抗MTB毒株攻击,脾脏细菌数显著减少(4.36±0.48),提供的保护力与BCG相当(4.30±0.53)。结论Hsp65与hIL-2的融合蛋白是一种有效的亚单位疫苗,可用于TB的预防。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 热休克蛋白65 人白细胞介素2 基因融合

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FMDV 2A介导的乳腺上皮细胞双基因表达载体构建及表达

13

作者 陈秋菊 王韵斐 +4 位作者 崔易虹 朱广琴 杨明明 宋宇轩 曹斌云 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1396-1401,共6页

构建FMDV 2A介导的人白细胞介素2基因(hIL-2)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因双顺反子乳腺特异性表达载体,并验证其在乳腺上皮细胞中的表达。克隆奶山羊β-酪蛋白启动子序列,将hIL-2基因序列置于启动子之后,然后利用口蹄疫病毒2A(FMDV ... 构建FMDV 2A介导的人白细胞介素2基因(hIL-2)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因双顺反子乳腺特异性表达载体,并验证其在乳腺上皮细胞中的表达。克隆奶山羊β-酪蛋白启动子序列,将hIL-2基因序列置于启动子之后,然后利用口蹄疫病毒2A(FMDV 2A)自剪切序列连接EGFP基因,构建出乳腺特异性的双顺反子表达载体pFIENβ,并利用脂质体转染山羊乳腺上皮细胞,然后用RT-PCR技术和Western blot检测hIL-2基因与EG-FP基因的表达。重组质粒pFIENβ经酶切鉴定后表明构建成功,转染质粒PFIENβ和pEGFP-C1的细胞均观察到绿色荧光;从转染pFIENβ的乳腺上皮细胞中扩增出hIL-2基因和EGFP基因,而转染pEGFP-C1的细胞中只扩增出EGFP基因;经Western blot检测,转染pFIENβ的细胞中均表达了hIL-2和EGFP蛋白。结果表明山羊β-酪蛋白启动子能同时启动hIL-2基因和EGFP基因在山羊乳腺上皮细胞中的表达,并且利用FMDV 2A元件实现了hIL-2基因和EGFP基因的非融合型表达。 展开更多

关键词 人白细胞介素2 EGFP FMDV2A 双顺反子

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重组人新型白介素-2治疗晚期肿瘤Ⅱ期临床研究 被引量：16

14

作者 杨林 王金万 +7 位作者 孙燕 随广杰 赵燕 韩铭钧 张珍华 胡晓电 罗荣城 戴广海 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第4期277-280,共4页

目的 :通过多中心前瞻性Ⅱ期临床试验观察重组人新型白细胞介素 2 (12 5Ser rhIL 2 )的疗效和不良反应。方法 :分别采用皮下和胸、腹腔内注射治疗实体瘤和癌性胸 /腹腔积液。结果 :176例患者中可评价近期疗效者 172例。其中癌性胸/腹腔... 目的 :通过多中心前瞻性Ⅱ期临床试验观察重组人新型白细胞介素 2 (12 5Ser rhIL 2 )的疗效和不良反应。方法 :分别采用皮下和胸、腹腔内注射治疗实体瘤和癌性胸 /腹腔积液。结果 :176例患者中可评价近期疗效者 172例。其中癌性胸/腹腔积液和实体瘤患者分别为 141和 31例 ,有效率分别为 80 .14%和 2 5 .81%。治疗后大部分病人生活质量、免疫功能有一定程度提高。不良反应主要为发热、寒战、局部皮肤红肿及消化道反应。未发现低血压和毛细血管渗漏综合征发生。结论 :12 5Ser rhIL 2对晚期肾癌、恶性黑色素瘤、癌性胸 /腹腔积液具有客观抗肿瘤作用 ,不良反应较轻。 展开更多

关键词 重组人白细胞介素-2 腹腔积液 恶性黑色素瘤 肾癌 胸腔积液

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将IL-2基因构建到叶绿体转化载体并转入烟草 被引量：2

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作者 黄益洪 刘蔼民 +5 位作者 汤日圣 张大栋 童红玉 朱鑫泉 沙钟瑞 吴光南 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2006年第4期379-383,共5页

以人白细胞介素2（IL-2）基因为目的基因，烟草accD和ORF184同源序列为侧翼引导序列构建成烟草叶绿体转化载体pAIL。以火烟草NC89为转化受体，通过基因枪方法对烟草叶片进行轰击转化。轰击参数为：每枪0．6μm的金粉300～500μg，轰击距... 以人白细胞介素2（IL-2）基因为目的基因，烟草accD和ORF184同源序列为侧翼引导序列构建成烟草叶绿体转化载体pAIL。以火烟草NC89为转化受体，通过基因枪方法对烟草叶片进行轰击转化。轰击参数为：每枪0．6μm的金粉300～500μg，轰击距离6cm，真空度9．48×10^4Pa。在500mg/L的壮观霉素筛选眶下，经约30d的筛选分化，逐渐产牛绿色的抗壮观霉素芽或愈伤，目前已获得31株（丛）抗性芽及8块抗性愈伤。用IL-2基因的PCR引物对4株较大的小苗进行检测，初步证明3株为转基因植株。 展开更多

关键词 烟草 叶绿体转化 壮观霉素 人白细胞介素2基因

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联合应用hIL-2和hGM-CSF基因瘤苗抗肿瘤作用的研究 被引量：2

16

作者 宋永胜 杨威 张学 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期21-22,29,共3页

目的 :探讨联合应用人白细胞介素 2 (hIL 2 )和人粒细胞巨噬细胞刺激因子 (hGM CSF)基因瘤苗抗肿瘤作用。方法 :经逆转录病毒载体将hIL 2基因及hGM CSF基因导入大鼠Walker瘤细胞WRC2 5 6中 ,制备瘤苗接种荷瘤大鼠。结果 :经PCR Southern... 目的 :探讨联合应用人白细胞介素 2 (hIL 2 )和人粒细胞巨噬细胞刺激因子 (hGM CSF)基因瘤苗抗肿瘤作用。方法 :经逆转录病毒载体将hIL 2基因及hGM CSF基因导入大鼠Walker瘤细胞WRC2 5 6中 ,制备瘤苗接种荷瘤大鼠。结果 :经PCR SouthernBlot检测证实hIL 2基因及hGM CSF基因已成功导入WRC2 5 6细胞基因组中 ,经生物学活性检测证实转基因细胞具有分泌hIL 2及hGM CSF活性。转基因瘤苗经 6 0GyX线灭活 ,接种荷瘤Walker瘤模型。两种瘤苗确可诱导有效抗肿瘤反应 ,但与单独应用一种瘤苗相比较 ,联合应用无相加或协同作用。结论 :两种瘤苗可诱导有效抗肿瘤反应 。 展开更多

关键词 人白细胞介素2 人粒细胞巨噬细胞刺激因子 基因转移 肿瘤疫苗

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重组hIL-2表达载体的构建及在毕赤酵母中的表达

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作者 王松 苗利光 +4 位作者 李海涛 刘艳环 王文昊 安亚雄 冯卓 《特产研究》 2012年第1期8-11,共4页

本试验根据hIL-2氨基酸序列、三维结构及其与受体IL-2R结合机制,设计并合成IL-2Rα亚基结合位点修饰性hIL-2基因片段。合成的修饰性hIL-2基因序列被插入真核表达载体pPIC9K,并转化入毕赤酵母基因组中。经筛选得到阳性重组子后,通过诱导... 本试验根据hIL-2氨基酸序列、三维结构及其与受体IL-2R结合机制,设计并合成IL-2Rα亚基结合位点修饰性hIL-2基因片段。合成的修饰性hIL-2基因序列被插入真核表达载体pPIC9K,并转化入毕赤酵母基因组中。经筛选得到阳性重组子后,通过诱导培养得到了表达产物。对表达产物进行Elisa初步测定,结果成功表达出重组hIL-2,表达水平达0.93g/L。本项研究为进一步开展IL-2Rα结合位点修饰性hIL-2的生物活性研究奠定了基础。 展开更多

关键词 人白细胞介素2 修饰 载体构建 表达

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