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重组人白细胞介素17A对结肠癌细胞生长的影响及其作用机制 被引量:4
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作者 杨学良 王明华 +4 位作者 刘艳波 孙雪梅 赵晓晖 杨丽娟 肖梓屾 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期258-261,共4页
目的:探讨重组人白细胞介素17A (IL-17A)对结肠癌细胞生长的影响,并阐明其作用机制。方法:将结肠癌SW480细胞分为对照组和实验组,对照组细胞未经处理,实验组细胞加入50μg·L-1重组人IL-17A。采用CKK-8法检测2组SW480细胞增殖活性,... 目的:探讨重组人白细胞介素17A (IL-17A)对结肠癌细胞生长的影响,并阐明其作用机制。方法:将结肠癌SW480细胞分为对照组和实验组,对照组细胞未经处理,实验组细胞加入50μg·L-1重组人IL-17A。采用CKK-8法检测2组SW480细胞增殖活性,采用ELISA法检测2组细胞中IL-17A水平,Western blotting法检测2组SW480细胞中信号传导及转录激活因子3 (STAT3)和磷酸化信号传导及转录激活因子3(p-STAT3)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,实验组细胞增殖活性明显升高(P<0.05)。与对照组比较,实验组SW480细胞中IL-17A水平、STAT3和p-STAT3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:重组人IL-17A可刺激结肠癌细胞SW480细胞的生长,其作用机制可能与激活STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 人白细胞介素17a 结肠癌细胞 信号通路 信号传导及转录激活因子
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白细胞介素17及其家族 被引量:5
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作者 朱慧萌 李德山 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期137-140,共4页
人白细胞介素17(hIL-17)是一种炎症前因子,因能诱导产生炎症介质,从而与许多疾病密切相关。文章就IL-17的分子结构、生物学功能及其家族成员加以综述。
关键词 人白细胞介素17 炎症因子 家族成员
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重组人白细胞介素17的纯化及生物活性鉴定
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作者 张傅山 李荣秀 +1 位作者 刘钟滨 秦霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2005年第6期1101-1104,共4页
目的:探讨重组人白细胞介素17的复性与纯化方法,并进行活性鉴定。方法:表达重组人白细胞介素17(rhIL17)的大肠杆菌经破碎、包涵体洗涤、裂解提取、复性、SephacrylS100层析柱纯化等方法,获得rhIL17;通过ELISA方法检测IL6的含量,间接反映... 目的:探讨重组人白细胞介素17的复性与纯化方法,并进行活性鉴定。方法:表达重组人白细胞介素17(rhIL17)的大肠杆菌经破碎、包涵体洗涤、裂解提取、复性、SephacrylS100层析柱纯化等方法,获得rhIL17;通过ELISA方法检测IL6的含量,间接反映rhIL17的生物学活性。结果:经纯化得到rhIL17,其相对分子质量为159000,蛋白纯度为97.2%,能够刺激人胚肺成纤维细胞MRC5产生IL6,呈浓度依赖关系。结论:通过本方法复性与纯化获得高纯度、有生物学活性的rhIL17。 展开更多
关键词 人白细胞介素17 纯化 生物学活性
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人白介素-17B真核蛋白表达及生物学功能的初步研究
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作者 刘高勤 李龙标 +5 位作者 居颂光 张文朋 钱益勇 朱雪菲 陆培荣 张学光 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期255-259,共5页
目的:在真核细胞中表达hIL-17B/mFc融合蛋白并初步研究IL-17B生物学特性。方法:应用RT-PCR法克隆hIL-17B的CDS段基因序列。将测序正确的hIL-17B序列插入pCEP4质粒构建pCEP4/hIL-17B真核表达载体。转染人肾上皮293T细胞后,筛选阳性表达... 目的:在真核细胞中表达hIL-17B/mFc融合蛋白并初步研究IL-17B生物学特性。方法:应用RT-PCR法克隆hIL-17B的CDS段基因序列。将测序正确的hIL-17B序列插入pCEP4质粒构建pCEP4/hIL-17B真核表达载体。转染人肾上皮293T细胞后,筛选阳性表达细胞株。RT-PCR、ELISA和Western blot等法鉴定hIL-17B分子的mRNA和蛋白水平表达。体外和体内实验验证其生物学功能。结果:成功构建了pCEP4/hIL-17B重组表达载体,并在293T细胞中稳定表达。获得的hIL-17B重组蛋白能稳定结合人单核THP-1细胞系上IL-17B受体。体外刺激THP-1,能显著促进IL-1β和TNF-α等炎症因子的分泌。体内实验发现其具有促进中性粒细胞迁移的作用。结论:稳定表达hIL-17B重组蛋白的293T细胞系的建立,为进一步研究hIL-17B的生物学功能奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 人白细胞介素-17B 真核表达 融合蛋白 中性粒细胞
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pCEP4/hIL-17真核表达载体的构建及表达 被引量:1
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作者 刘高勤 吴鸿雅 +3 位作者 居颂光 李龙标 陆培荣 张学光 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1564-1568,共5页
目的构建pCEP4/hIL-17载体及在真核细胞中表达hIL-17/mFc融合蛋白;初步研究IL-17生物学特性。方法采用RT-PCR的方法克隆hIL-17CDS段基因序列;将测序正确的hIL-17序列插入pCEP4质粒构建pCEP4/IL-17真核表达载体,转染中华仓鼠卵巢(CHO)细... 目的构建pCEP4/hIL-17载体及在真核细胞中表达hIL-17/mFc融合蛋白;初步研究IL-17生物学特性。方法采用RT-PCR的方法克隆hIL-17CDS段基因序列;将测序正确的hIL-17序列插入pCEP4质粒构建pCEP4/IL-17真核表达载体,转染中华仓鼠卵巢(CHO)细胞后,筛选阳性表达细胞株;并用RT-PCR、ELISA和Western blot等法鉴定IL-17基因的mRNA和蛋白表达;流式细胞术分析纯化的蛋白对Raji细胞表达的hIL-17受体的结合能力;以体外实验验证其促炎症作用。结果成功构建了pCEP4/hIL-17重组载体,并在CHO细胞中稳定表达;所获得hIL-17重组蛋白能稳定结合Raji细胞上的IL-17受体;体外刺激HeLa细胞,能明显促进IL-6等炎症因子的分泌。结论稳定表达hIL-17重组蛋白的CHO细胞系的建立,为进一步研究hIL-17的生物学功能奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 人白细胞介素-17 真核表达 CHO细胞 融合蛋白 基因 克隆
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