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重组人白细胞介素-3的长期毒性实验研究
1
作者
刘晓宏
粟永萍
+4 位作者
艾国平
王军平
冉新泽
郭朝华
程天民
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第9期1011-1012,共2页
目的 研究重组人白细胞介素 3 (Recombinanthumaninterleukin 3 ,rhIL 3 )长期应用对正常大鼠的毒性作用。方法 分设rhIL 3低剂量组 (5 μg·kg-1·d-1)、中剂量组 (10 μg·kg-1·d-1)、高剂量组 (2 5 0 μg·k...
目的 研究重组人白细胞介素 3 (Recombinanthumaninterleukin 3 ,rhIL 3 )长期应用对正常大鼠的毒性作用。方法 分设rhIL 3低剂量组 (5 μg·kg-1·d-1)、中剂量组 (10 μg·kg-1·d-1)、高剂量组 (2 5 0 μg·kg-1·d-1)及溶媒对照共 4组 ,每组 2 0只 ,每天皮下给药1次至 1、1 5、2及 3个月后 ,分别活杀 ,进行血液、尿液分析和循环免疫复合物检测 ,骨髓细胞培养 ,系统解剖及各脏器组织切片观察。结果 整个实验期动物精神食欲良好 ,无一死亡 ;血液和尿液生化、外周血象、骨髓造血细胞培养及循环免疫复合物等多项指标检测 ,各药物剂量及不同时相之间无显著差异 ;仅高剂量用药 3个月后可见骨髓组织有一定程度纤维化改变。心、肝、脾、肺、肾、脑等重要脏器组织均未见异常病理变化。结论 rhIL 3低剂量 (拟有效治疗剂量 )应用 3个月和中、高剂量应用 2个月 ,无毒副作用 ,具较好安全性 ,大剂量 (高于治疗剂量 5 0倍 )长期 (3个月 )应用可引起骨髓纤维化 。
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关键词
重组
人白细胞介素-3
长期毒性
实验研究
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职称材料
高活性的人白细胞介素-3突变体的构建与表达
2
作者
邹晓燕
杨胜利
龚毅
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期258-260,共3页
目的:在大肠杆菌中构建表达高活性的人白细胞介素-3(hIL-3)突变体。方法:通过定点突变的方法构建hIL-3突变体K116V和K116W的表达载体,并实现hIL-3突变体在大肠杆菌中的表达。对所得包涵体蛋白依次溶解、纯化、透析复性。用Westernblot检...
目的:在大肠杆菌中构建表达高活性的人白细胞介素-3(hIL-3)突变体。方法:通过定点突变的方法构建hIL-3突变体K116V和K116W的表达载体,并实现hIL-3突变体在大肠杆菌中的表达。对所得包涵体蛋白依次溶解、纯化、透析复性。用Westernblot检测hIL-3突变体的特异性。单溶液细胞增殖(MTS)测定hIL-3突变体的生物学活性。结果:hIL-3在大肠杆菌中高效表达,表达量占菌体总蛋白的40%以上,主要以包涵体的形式存在。将包涵体溶解在8mol/L脲中,经Ni-NTA-Sepharose柱纯化后纯度达90%以上。MTS法测定hIL-3突变体K116V的活性为野生型的5倍,K116W的生物学活性也有所增加。结论:获得了高活性的hIL-3突变体K116V,有望成为hIL-3的替代品,也证明了hIL-3第116位的赖氨酸残基对于hIL-3的生物学活性很重要。
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关键词
人白细胞介素-3
K116V
K116W
定点突变
单溶液
细胞
增殖
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职称材料
银染单链构象多态性技术检测人IL-3基因突变
3
作者
毛琼国
刘昕
+1 位作者
王燕
梁红
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第11期1358-1359,共2页
目的 对人白细胞介素 3(hIL 3)基因突变体进行分析和进一步鉴定 ,建立一种灵敏、快捷的检测基因突变和DNA多态性的方法 即银染单链构象多态性技术 (Singlestrandconformationpolymorphism ,SSCP)。方法 将野生型和突变型的人白介素 ...
目的 对人白细胞介素 3(hIL 3)基因突变体进行分析和进一步鉴定 ,建立一种灵敏、快捷的检测基因突变和DNA多态性的方法 即银染单链构象多态性技术 (Singlestrandconformationpolymorphism ,SSCP)。方法 将野生型和突变型的人白介素 3(hIL 3)cDNA连接到PUC9和PUC19质粒载体上 ,转化入大肠杆菌 ,扩增质粒 ,用常规方法抽提 ,酶切 ,然后将酶切后的DNA片段进行PAGE胶电泳 ,银染检测野生型和突变型的异同。结果 以野生型hIL 3cDNA作为对照 ,连接到PUC9和PUC19上的电泳结果均为一致 ,突变型hIL 3cDNA的电泳带明显比野生型的电泳带靠后。结论 SSCP方法具有简便 ,快捷较灵敏的特点 ,对人白细胞介素 3(hIL 3)基因的点突变得到进一步的鉴定。
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关键词
单链构象多态性
人白细胞介素-3
基因突变
基因诊断
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职称材料
题名
重组人白细胞介素-3的长期毒性实验研究
1
作者
刘晓宏
粟永萍
艾国平
王军平
冉新泽
郭朝华
程天民
机构
第三军医大学预防医学系防原医学教研室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第9期1011-1012,共2页
基金
重庆市院士基金资助项目 ( 46 43)
文摘
目的 研究重组人白细胞介素 3 (Recombinanthumaninterleukin 3 ,rhIL 3 )长期应用对正常大鼠的毒性作用。方法 分设rhIL 3低剂量组 (5 μg·kg-1·d-1)、中剂量组 (10 μg·kg-1·d-1)、高剂量组 (2 5 0 μg·kg-1·d-1)及溶媒对照共 4组 ,每组 2 0只 ,每天皮下给药1次至 1、1 5、2及 3个月后 ,分别活杀 ,进行血液、尿液分析和循环免疫复合物检测 ,骨髓细胞培养 ,系统解剖及各脏器组织切片观察。结果 整个实验期动物精神食欲良好 ,无一死亡 ;血液和尿液生化、外周血象、骨髓造血细胞培养及循环免疫复合物等多项指标检测 ,各药物剂量及不同时相之间无显著差异 ;仅高剂量用药 3个月后可见骨髓组织有一定程度纤维化改变。心、肝、脾、肺、肾、脑等重要脏器组织均未见异常病理变化。结论 rhIL 3低剂量 (拟有效治疗剂量 )应用 3个月和中、高剂量应用 2个月 ,无毒副作用 ,具较好安全性 ,大剂量 (高于治疗剂量 5 0倍 )长期 (3个月 )应用可引起骨髓纤维化 。
关键词
重组
人白细胞介素-3
长期毒性
实验研究
Keywords
rhIL
3
hemopoietic factor
long term toxicity
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
R979.5 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
高活性的人白细胞介素-3突变体的构建与表达
2
作者
邹晓燕
杨胜利
龚毅
机构
上海中科伍佰豪生物工程有限公司
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期258-260,共3页
文摘
目的:在大肠杆菌中构建表达高活性的人白细胞介素-3(hIL-3)突变体。方法:通过定点突变的方法构建hIL-3突变体K116V和K116W的表达载体,并实现hIL-3突变体在大肠杆菌中的表达。对所得包涵体蛋白依次溶解、纯化、透析复性。用Westernblot检测hIL-3突变体的特异性。单溶液细胞增殖(MTS)测定hIL-3突变体的生物学活性。结果:hIL-3在大肠杆菌中高效表达,表达量占菌体总蛋白的40%以上,主要以包涵体的形式存在。将包涵体溶解在8mol/L脲中,经Ni-NTA-Sepharose柱纯化后纯度达90%以上。MTS法测定hIL-3突变体K116V的活性为野生型的5倍,K116W的生物学活性也有所增加。结论:获得了高活性的hIL-3突变体K116V,有望成为hIL-3的替代品,也证明了hIL-3第116位的赖氨酸残基对于hIL-3的生物学活性很重要。
关键词
人白细胞介素-3
K116V
K116W
定点突变
单溶液
细胞
增殖
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
银染单链构象多态性技术检测人IL-3基因突变
3
作者
毛琼国
刘昕
王燕
梁红
机构
第三军医大学基础医学部分子遗传学教研室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第11期1358-1359,共2页
文摘
目的 对人白细胞介素 3(hIL 3)基因突变体进行分析和进一步鉴定 ,建立一种灵敏、快捷的检测基因突变和DNA多态性的方法 即银染单链构象多态性技术 (Singlestrandconformationpolymorphism ,SSCP)。方法 将野生型和突变型的人白介素 3(hIL 3)cDNA连接到PUC9和PUC19质粒载体上 ,转化入大肠杆菌 ,扩增质粒 ,用常规方法抽提 ,酶切 ,然后将酶切后的DNA片段进行PAGE胶电泳 ,银染检测野生型和突变型的异同。结果 以野生型hIL 3cDNA作为对照 ,连接到PUC9和PUC19上的电泳结果均为一致 ,突变型hIL 3cDNA的电泳带明显比野生型的电泳带靠后。结论 SSCP方法具有简便 ,快捷较灵敏的特点 ,对人白细胞介素 3(hIL 3)基因的点突变得到进一步的鉴定。
关键词
单链构象多态性
人白细胞介素-3
基因突变
基因诊断
分类号
R394－33 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组人白细胞介素-3的长期毒性实验研究
刘晓宏
粟永萍
艾国平
王军平
冉新泽
郭朝华
程天民
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
0
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职称材料
2
高活性的人白细胞介素-3突变体的构建与表达
邹晓燕
杨胜利
龚毅
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
银染单链构象多态性技术检测人IL-3基因突变
毛琼国
刘昕
王燕
梁红
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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