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人白介素-29变异体在毕赤酵母中的表达及抗肿瘤活性
被引量：
1
1
作者
陆源
陈伟
+3 位作者
李利云
彭荣刚
李菲
邬敏辰
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期185-191,共7页
基于生物信息学分析的结果,采用基因突变和大引物PCR技术完成人白细胞介素-29(h IL-29)成熟肽第33位氨基酸的定点突变,成功实现其在毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115中的异源表达。重组人白细胞介素-29变异体蛋白(rh IL-29mut33)在不同质...
基于生物信息学分析的结果,采用基因突变和大引物PCR技术完成人白细胞介素-29(h IL-29)成熟肽第33位氨基酸的定点突变,成功实现其在毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115中的异源表达。重组人白细胞介素-29变异体蛋白(rh IL-29mut33)在不同质量浓度时,对肝癌细胞BEL7402、结肠癌细胞HCT8和胃癌细胞SGC7901的增殖均有抑制作用,而且抑制增殖效应强于野生型rh IL-29。与低质量浓度相比,高质量浓度下rh IL-29mut33对肿瘤细胞增殖抑制作用更强,对上述3种肿瘤细胞的增殖抑制率分别达到(31.76±2.87)%、(22.47±0.26)%和(34.41±0.40)%。rh IL-29mut33良好的生物学活性表明该变异体具有较大的应用潜力。
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关键词
人白细胞介素-29
定点突变
基因克隆
表达
抗肿瘤活性
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职称材料
人IL-29定点突变体抗肿瘤细胞增殖活性分析
2
作者
李利云
陆源
+5 位作者
葛春蕾
彭荣刚
李昕哲
谭敬
陈永康
陈伟
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期553-559,共7页
为分析人白细胞介素-29(h IL-29)变异体抗肿瘤细胞增殖活性,采用大引物PCR方法对人h IL-29基因第104位碱基进行点突变,使h IL-29肽链第35位Arg定点改造为Lys。得到的h IL-29变异体基因经重组后转化毕赤酵母GS115和诱导表达,经纯化获得...
为分析人白细胞介素-29(h IL-29)变异体抗肿瘤细胞增殖活性,采用大引物PCR方法对人h IL-29基因第104位碱基进行点突变,使h IL-29肽链第35位Arg定点改造为Lys。得到的h IL-29变异体基因经重组后转化毕赤酵母GS115和诱导表达,经纯化获得重组蛋白rh IL-29mut35。SDS-PAGE分析显示rh IL-29mut35的相对分子质量约23×103,Western Blotting鉴定显示其与羊抗人IL-29多克隆抗体发生特异性结合反应。用CCK-8试剂检测rh IL-29mut35对肿瘤细胞增殖的影响,rh IL-29mut35在不同质量浓度时对胃癌细胞SGC7901、肝癌细胞BEL7402、肺腺癌细胞A549和结肠癌细胞HCT8的增殖均有抑制作用,高剂量组(1 000 ng/m L)rh IL-29mut35对胃癌细胞SGC7901、肝癌细胞BEL7402、肺腺癌细胞A549和结肠癌细胞HCT8增值的抑制率分别为(34.20±1.50)%、(27.30±0.31)%、(30.20±0.68)%、(29.13±1.40)%,与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。而且高剂量组的抗增殖效应高于野生型rh IL-29的(P<0.01),这为进一步研制开发IL-29的抗肿瘤药物奠定基础。
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关键词
人白细胞介素-29
定点突变
重组蛋白
抗肿瘤活性
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职称材料
题名
人白介素-29变异体在毕赤酵母中的表达及抗肿瘤活性
被引量：
1
1
作者
陆源
陈伟
李利云
彭荣刚
李菲
邬敏辰
机构
江南大学药学院
江南大学无锡医学院
江南大学生物工程学院
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期185-191,共7页
基金
国家大学生创新训练计划项目(201210295024)
文摘
基于生物信息学分析的结果,采用基因突变和大引物PCR技术完成人白细胞介素-29(h IL-29)成熟肽第33位氨基酸的定点突变,成功实现其在毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115中的异源表达。重组人白细胞介素-29变异体蛋白(rh IL-29mut33)在不同质量浓度时,对肝癌细胞BEL7402、结肠癌细胞HCT8和胃癌细胞SGC7901的增殖均有抑制作用,而且抑制增殖效应强于野生型rh IL-29。与低质量浓度相比,高质量浓度下rh IL-29mut33对肿瘤细胞增殖抑制作用更强,对上述3种肿瘤细胞的增殖抑制率分别达到(31.76±2.87)%、(22.47±0.26)%和(34.41±0.40)%。rh IL-29mut33良好的生物学活性表明该变异体具有较大的应用潜力。
关键词
人白细胞介素-29
定点突变
基因克隆
表达
抗肿瘤活性
Keywords
human interleukin
-
29
site
-
directed mutation
gene cloning
expression
antineoplastic activity
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
人IL-29定点突变体抗肿瘤细胞增殖活性分析
2
作者
李利云
陆源
葛春蕾
彭荣刚
李昕哲
谭敬
陈永康
陈伟
机构
江南大学生物工程学院
江南大学药学院
江南大学无锡医学院
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期553-559,共7页
文摘
为分析人白细胞介素-29(h IL-29)变异体抗肿瘤细胞增殖活性,采用大引物PCR方法对人h IL-29基因第104位碱基进行点突变,使h IL-29肽链第35位Arg定点改造为Lys。得到的h IL-29变异体基因经重组后转化毕赤酵母GS115和诱导表达,经纯化获得重组蛋白rh IL-29mut35。SDS-PAGE分析显示rh IL-29mut35的相对分子质量约23×103,Western Blotting鉴定显示其与羊抗人IL-29多克隆抗体发生特异性结合反应。用CCK-8试剂检测rh IL-29mut35对肿瘤细胞增殖的影响,rh IL-29mut35在不同质量浓度时对胃癌细胞SGC7901、肝癌细胞BEL7402、肺腺癌细胞A549和结肠癌细胞HCT8的增殖均有抑制作用,高剂量组(1 000 ng/m L)rh IL-29mut35对胃癌细胞SGC7901、肝癌细胞BEL7402、肺腺癌细胞A549和结肠癌细胞HCT8增值的抑制率分别为(34.20±1.50)%、(27.30±0.31)%、(30.20±0.68)%、(29.13±1.40)%,与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。而且高剂量组的抗增殖效应高于野生型rh IL-29的(P<0.01),这为进一步研制开发IL-29的抗肿瘤药物奠定基础。
关键词
人白细胞介素-29
定点突变
重组蛋白
抗肿瘤活性
Keywords
human interleukin
-
29
, site
-
directed mutation, recombinant protein, antineoplastic activity
分类号
R730.5 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人白介素-29变异体在毕赤酵母中的表达及抗肿瘤活性
陆源
陈伟
李利云
彭荣刚
李菲
邬敏辰
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人IL-29定点突变体抗肿瘤细胞增殖活性分析
李利云
陆源
葛春蕾
彭荣刚
李昕哲
谭敬
陈永康
陈伟
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
0
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