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人白介素-17B真核蛋白表达及生物学功能的初步研究
1
作者
刘高勤
李龙标
+5 位作者
居颂光
张文朋
钱益勇
朱雪菲
陆培荣
张学光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期255-259,共5页
目的:在真核细胞中表达hIL-17B/mFc融合蛋白并初步研究IL-17B生物学特性。方法:应用RT-PCR法克隆hIL-17B的CDS段基因序列。将测序正确的hIL-17B序列插入pCEP4质粒构建pCEP4/hIL-17B真核表达载体。转染人肾上皮293T细胞后,筛选阳性表达...
目的:在真核细胞中表达hIL-17B/mFc融合蛋白并初步研究IL-17B生物学特性。方法:应用RT-PCR法克隆hIL-17B的CDS段基因序列。将测序正确的hIL-17B序列插入pCEP4质粒构建pCEP4/hIL-17B真核表达载体。转染人肾上皮293T细胞后,筛选阳性表达细胞株。RT-PCR、ELISA和Western blot等法鉴定hIL-17B分子的mRNA和蛋白水平表达。体外和体内实验验证其生物学功能。结果:成功构建了pCEP4/hIL-17B重组表达载体,并在293T细胞中稳定表达。获得的hIL-17B重组蛋白能稳定结合人单核THP-1细胞系上IL-17B受体。体外刺激THP-1,能显著促进IL-1β和TNF-α等炎症因子的分泌。体内实验发现其具有促进中性粒细胞迁移的作用。结论:稳定表达hIL-17B重组蛋白的293T细胞系的建立,为进一步研究hIL-17B的生物学功能奠定了良好的基础。
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关键词
人白细胞介素-17
B
真核表达
融合蛋白
中性粒
细胞
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职称材料
pCEP4/hIL-17真核表达载体的构建及表达
被引量：
1
2
作者
刘高勤
吴鸿雅
+3 位作者
居颂光
李龙标
陆培荣
张学光
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1564-1568,共5页
目的构建pCEP4/hIL-17载体及在真核细胞中表达hIL-17/mFc融合蛋白;初步研究IL-17生物学特性。方法采用RT-PCR的方法克隆hIL-17CDS段基因序列;将测序正确的hIL-17序列插入pCEP4质粒构建pCEP4/IL-17真核表达载体,转染中华仓鼠卵巢(CHO)细...
目的构建pCEP4/hIL-17载体及在真核细胞中表达hIL-17/mFc融合蛋白;初步研究IL-17生物学特性。方法采用RT-PCR的方法克隆hIL-17CDS段基因序列;将测序正确的hIL-17序列插入pCEP4质粒构建pCEP4/IL-17真核表达载体,转染中华仓鼠卵巢(CHO)细胞后,筛选阳性表达细胞株;并用RT-PCR、ELISA和Western blot等法鉴定IL-17基因的mRNA和蛋白表达;流式细胞术分析纯化的蛋白对Raji细胞表达的hIL-17受体的结合能力;以体外实验验证其促炎症作用。结果成功构建了pCEP4/hIL-17重组载体,并在CHO细胞中稳定表达;所获得hIL-17重组蛋白能稳定结合Raji细胞上的IL-17受体;体外刺激HeLa细胞,能明显促进IL-6等炎症因子的分泌。结论稳定表达hIL-17重组蛋白的CHO细胞系的建立,为进一步研究hIL-17的生物学功能奠定了良好的基础。
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关键词
人白细胞介素-17
真核表达
CHO
细胞
融合蛋白
基因
克隆
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职称材料
题名
人白介素-17B真核蛋白表达及生物学功能的初步研究
1
作者
刘高勤
李龙标
居颂光
张文朋
钱益勇
朱雪菲
陆培荣
张学光
机构
苏州大学附属第一医院眼科
苏州大学附属第一医院临床免疫所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期255-259,共5页
基金
国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(2007CB512402)
国家自然科学基金面上项目(30972712)
+1 种基金
苏州大学青年基金项目(Q312203010
Q3122827)
文摘
目的:在真核细胞中表达hIL-17B/mFc融合蛋白并初步研究IL-17B生物学特性。方法:应用RT-PCR法克隆hIL-17B的CDS段基因序列。将测序正确的hIL-17B序列插入pCEP4质粒构建pCEP4/hIL-17B真核表达载体。转染人肾上皮293T细胞后,筛选阳性表达细胞株。RT-PCR、ELISA和Western blot等法鉴定hIL-17B分子的mRNA和蛋白水平表达。体外和体内实验验证其生物学功能。结果:成功构建了pCEP4/hIL-17B重组表达载体,并在293T细胞中稳定表达。获得的hIL-17B重组蛋白能稳定结合人单核THP-1细胞系上IL-17B受体。体外刺激THP-1,能显著促进IL-1β和TNF-α等炎症因子的分泌。体内实验发现其具有促进中性粒细胞迁移的作用。结论:稳定表达hIL-17B重组蛋白的293T细胞系的建立,为进一步研究hIL-17B的生物学功能奠定了良好的基础。
关键词
人白细胞介素-17
B
真核表达
融合蛋白
中性粒
细胞
Keywords
human interleukin
-
17
B
eukaryotic expression
fusion protein
neutrophil
分类号
R392.33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
pCEP4/hIL-17真核表达载体的构建及表达
被引量：
1
2
作者
刘高勤
吴鸿雅
居颂光
李龙标
陆培荣
张学光
机构
苏州大学附属第一医院眼科
苏州大学附属第一医院临床免疫学实验室
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1564-1568,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目资助课题(No30972120)
文摘
目的构建pCEP4/hIL-17载体及在真核细胞中表达hIL-17/mFc融合蛋白;初步研究IL-17生物学特性。方法采用RT-PCR的方法克隆hIL-17CDS段基因序列;将测序正确的hIL-17序列插入pCEP4质粒构建pCEP4/IL-17真核表达载体,转染中华仓鼠卵巢(CHO)细胞后,筛选阳性表达细胞株;并用RT-PCR、ELISA和Western blot等法鉴定IL-17基因的mRNA和蛋白表达;流式细胞术分析纯化的蛋白对Raji细胞表达的hIL-17受体的结合能力;以体外实验验证其促炎症作用。结果成功构建了pCEP4/hIL-17重组载体,并在CHO细胞中稳定表达;所获得hIL-17重组蛋白能稳定结合Raji细胞上的IL-17受体;体外刺激HeLa细胞,能明显促进IL-6等炎症因子的分泌。结论稳定表达hIL-17重组蛋白的CHO细胞系的建立,为进一步研究hIL-17的生物学功能奠定了良好的基础。
关键词
人白细胞介素-17
真核表达
CHO
细胞
融合蛋白
基因
克隆
Keywords
human interleukin
-
17
eukaryotic expression
chinese hamster ovary cell
recombinant protein
gene
clone
分类号
R341 [医药卫生—基础医学]
R394.12 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人白介素-17B真核蛋白表达及生物学功能的初步研究
刘高勤
李龙标
居颂光
张文朋
钱益勇
朱雪菲
陆培荣
张学光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
在线阅读
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职称材料
2
pCEP4/hIL-17真核表达载体的构建及表达
刘高勤
吴鸿雅
居颂光
李龙标
陆培荣
张学光
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
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