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人白细胞介素-12的纯化及鉴定被引量：2: 1; 作者黄进罗果葛正龙《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第14期6353-6355,共3页; [目的]利用人白细胞介素-12(human interleukin 12,hIL-12)转基因马铃薯,探讨hIL-12的纯化条件。[方法]提取转基因马铃薯中的总蛋白,hIL-12的分离纯化步骤包括超滤、MKF-AIW阴离子交换层析、MKF-CIC阳离子交换层析。在阴离子交换层析吸... 展开更多; 关键词人白细胞介素-12 纯化转基因马铃薯; 在线阅读下载PDF 职称材料

马铃薯块茎特异性启动子驱动的人白细胞介素-12的遗传转化研究被引量：2: 2; 作者杨加伟程小玲龙朝康《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期220-225,共6页; 为获得高效表达人白细胞介素-12(h IL-12)蛋白的转基因马铃薯植株,利用根瘤农杆菌侵染法将前期构建的马铃薯块茎特异性启动子Ppatatin驱动的h IL-12植物表达载体导入马铃薯,通过共培养、筛选、分化等过程获得转基因植株,并结合PCR、RT-... 展开更多; 关键词 Ppatatin启动子人白细胞介素-12 转基因马铃薯植物生物反应器; 在线阅读下载PDF 职称材料

从转基因马铃薯中纯化的人白细胞介素-12的生物学活性分析被引量：1: 3; 作者黄进罗果葛正龙《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第16期7334-7334,7347,共2页; [目的]研究从转人白细胞介素-12(hIL-12)基因马铃薯中纯化的hIL-12的生物学活性。[方法]MTT法检测纯化的hIL-12体外抗肿瘤作用。[结果]纯化的hIL-12在体外对NK敏感肿瘤细胞K562有杀伤作用,而野生对照组无作用。[结论]试验中从转hIL-12... 展开更多; 关键词人白细胞介素-12 纯化生物学活性转基因马铃薯; 在线阅读下载PDF 职称材料

人白细胞介素12基因在巴斯德毕赤酵母细胞中的表达(英文) 被引量：4: 4; 作者陈新华敖敬群 +3 位作者杨林龙綮新王珣章陈曲侯《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期423-427,共5页; 人白细胞介素 12 (hIL 12 )是人体内具有多种生物学活性的免疫调节因子 ,由p4 0和p35两个亚基经多对二硫键连接而成 .根据hIL 12的结构特点 ,采用LiCl二次转化将hIL 12的p4 0和p35两亚基基因导入巴斯德毕赤酵母X33细胞中 ,并经同... 展开更多; 关键词人白细胞介素-12基因巴斯德毕赤酵母细胞 LiCl二次转化活性表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

rhIL-12对恒河猴造血系统辐射防护作用的初步研究被引量：12: 5; 作者熊国林赵毅 +10 位作者邢爽申星宁学成卢世香李建郭玲玲郝锐陈廷超缪锦来贺济琛罗庆良《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期150-154,共5页; 本研究旨在初步观察重组人白介素-12(rhIL-12)对急性辐射损伤猴造血系统的防护和治疗作用,为同类型病人的临床救治提供实验依据。在体外实验中,观察了不同浓度rhIL-12(0、1、5、25、125和625 ng/ml)对来自人和健康成年猴骨髓造血祖细胞... 展开更多; 关键词重组人白细胞介素-12 辐射损伤急性放射病恒河猴; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人白细胞介素-12的纯化及鉴定被引量：2: 1; 作者黄进罗果葛正龙; 机构遵义医学院珠海校区生物工程系遵义医学院中心实验室遵义医学院生物化学教研室; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第14期6353-6355,共3页; 基金贵州省科委重大攻关项目(2004NGZ002) 贵州省教育厅重点项目(2004118); 文摘 [目的]利用人白细胞介素-12(human interleukin 12,hIL-12)转基因马铃薯,探讨hIL-12的纯化条件。[方法]提取转基因马铃薯中的总蛋白,hIL-12的分离纯化步骤包括超滤、MKF-AIW阴离子交换层析、MKF-CIC阳离子交换层析。在阴离子交换层析吸附过程中采用试管法选择最佳吸附pH值,选择洗脱过程最佳洗脱pH值;选择阳离子交换层析洗脱过程最佳洗脱pH值;ELISA法测定各纯化阶段收集的上清液或洗脱峰中的hIL-12的含量;非还原SDS-PAGE电泳鉴定蛋白纯度;Western Blot检测纯化的hIL-12。[结果]阴离子交换层析吸附过程最佳吸附pH值为7.5,洗脱过程最佳洗脱pH值为7,阳离子交换层析洗脱过程最佳洗脱pH值为6.5。纯化的hIL-12经非还原SDS-PAGE分析蛋白纯度为91%。Western Blot分析结果表明,在40 kD处有特异的蛋白条带出现。[结论]hIL-12转基因马铃薯经总蛋白提取,超滤,阴离子交换层析,阳离子交换层析纯化,获得了高纯度的hIL-12。; 关键词人白细胞介素-12 纯化转基因马铃薯; Keywords Human interleukin 12 Purification Transgenic potato; 分类号 S188 [农业科学—农业基础科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马铃薯块茎特异性启动子驱动的人白细胞介素-12的遗传转化研究被引量：2: 2; 作者杨加伟程小玲龙朝康; 机构遵义医学院生物化学教研室遵义医学院细胞生物学教研室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期220-225,共6页; 基金贵州省科学技术基金项目(黔科合J字[2013]2324) 遵义医学院博士启动基金项目(F-587); 文摘为获得高效表达人白细胞介素-12(h IL-12)蛋白的转基因马铃薯植株,利用根瘤农杆菌侵染法将前期构建的马铃薯块茎特异性启动子Ppatatin驱动的h IL-12植物表达载体导入马铃薯,通过共培养、筛选、分化等过程获得转基因植株,并结合PCR、RT-PCR、GUS染色及ELISA分析对转基因植株进行鉴定。结果显示,获得12个马铃薯转基因株系,PCR检测表明其中的10个株系目的基因已导入马铃薯基因组,转基因阳性率为83%;RT-PCR分析表明其中的7个株系外源基因在转录水平成功获得表达,ELISA分析表明其中的5个株系有明显的蛋白水平表达。对这7个株系后代的检测表明外源基因成功表达且具有良好的遗传稳定性。; 关键词 Ppatatin启动子人白细胞介素-12 转基因马铃薯植物生物反应器; Keywords promoter Ppatatin human IL-12 transgenic potato plant bioreactor; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名从转基因马铃薯中纯化的人白细胞介素-12的生物学活性分析被引量：1: 3; 作者黄进罗果葛正龙; 机构遵义医学院珠海校区生物工程系遵义医学院中心实验室遵义医学院生物化学教研室; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第16期7334-7334,7347,共2页; 基金贵州省科委重大攻关项目(2004NGZ002) 贵州省教育厅重点项目(2004118); 文摘 [目的]研究从转人白细胞介素-12(hIL-12)基因马铃薯中纯化的hIL-12的生物学活性。[方法]MTT法检测纯化的hIL-12体外抗肿瘤作用。[结果]纯化的hIL-12在体外对NK敏感肿瘤细胞K562有杀伤作用,而野生对照组无作用。[结论]试验中从转hIL-12基因马铃薯中纯化的hIL-12具有生物学活性。; 关键词人白细胞介素-12 纯化生物学活性转基因马铃薯; Keywords Human interleukin 12 Purification Bioactivity Transgenie potato; 分类号 S188 [农业科学—农业基础科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人白细胞介素12基因在巴斯德毕赤酵母细胞中的表达(英文) 被引量：4: 4; 作者陈新华敖敬群杨林龙綮新王珣章陈曲侯; 机构中山大学生物防治国家重点实验室华中师范大学昆虫学研究所; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期423-427,共5页; 基金广东省自然科学基金资助项目 (NO960 0 5 9); 文摘人白细胞介素 12 (hIL 12 )是人体内具有多种生物学活性的免疫调节因子 ,由p4 0和p35两个亚基经多对二硫键连接而成 .根据hIL 12的结构特点 ,采用LiCl二次转化将hIL 12的p4 0和p35两亚基基因导入巴斯德毕赤酵母X33细胞中 ,并经同源交换分别插入酵母基因组AOX1区域 ,构建成含hIL 12双亚基基因的酵母工程菌PichiapastorisX33 p4 0 p35 .经 0 .5 %甲醇诱导 ,p4 0和p35两亚基在同一酵母细胞中得到了表达 ,并组装成具有生物学活性的hIL; 关键词人白细胞介素-12基因巴斯德毕赤酵母细胞 LiCl二次转化活性表达; Keywords human interleukin 12, Pichia expression system, two LiCl transformation, activity expression; 分类号 R394.8 [医药卫生—医学遗传学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名rhIL-12对恒河猴造血系统辐射防护作用的初步研究被引量：12: 5; 作者熊国林赵毅邢爽申星宁学成卢世香李建郭玲玲郝锐陈廷超缪锦来贺济琛罗庆良; 机构军事医学科学院放射与辐射医学研究所青岛康立泰药业有限公司南昌市疾病预防控制中心; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期150-154,共5页; 文摘本研究旨在初步观察重组人白介素-12(rhIL-12)对急性辐射损伤猴造血系统的防护和治疗作用,为同类型病人的临床救治提供实验依据。在体外实验中,观察了不同浓度rhIL-12(0、1、5、25、125和625 ng/ml)对来自人和健康成年猴骨髓造血祖细胞集落形成能力的影响。在体内实验中,用11只经3.0 Gy全身照射后90 d活存猴再经致死剂量60Coγ(6.0 Gy)射线全身1次照射以建立重度骨髓型急性放射病动物模型。模型动物被随机分为照射对照组(n=4)、单次给药组(n=3)和分次给药组(n=4)。单次给药组于照射后2 h皮下注射rhIL-12 4μg/kg,分次给药组分别于照射后2 h和3、6、9 d皮下注射rhIL-12 1μg/kg,对照组于皮下注射同样体积的PBS。观察照射后动物活存情况和外周血象变化。体外培养结果显示,不同浓度rhIL-12可明显促进正常猴和人骨髓单个核细胞形成各系造血祖细胞集落,特别是CFU-E和CFU-GM最为明显。照射对照组动物于照射后22 d内全部死亡,死亡动物平均活存时间为(20.3±1.2)d;rhIL-12单次给药组3只动物全部存活,rhIL-12分次给药组1只动物于照射后17 d因贫血死亡。与对照组比较,rhIL-12治疗能明显提高动物存活(P=0.018),并促进外周血白细胞数、血红蛋白水平、血小板以及网织红细胞数的恢复(P<0.05)。结论:rhIL-12可明显促进灵长类骨髓造血祖细胞体外集落形成,并明显促进重度骨髓型急性放射病猴的造血功能恢复,提高动物存活率。; 关键词重组人白细胞介素-12 辐射损伤急性放射病恒河猴; Keywords recombinant human interleukin-12 radiation injury acute radiation sickness rhesus monkey; 分类号 R818 [医药卫生—放射医学] R818.05 [医药卫生—放射医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人白细胞介素-12的纯化及鉴定	黄进罗果葛正龙	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	马铃薯块茎特异性启动子驱动的人白细胞介素-12的遗传转化研究	杨加伟程小玲龙朝康	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	从转基因马铃薯中纯化的人白细胞介素-12的生物学活性分析	黄进罗果葛正龙	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人白细胞介素12基因在巴斯德毕赤酵母细胞中的表达(英文)	陈新华敖敬群杨林龙綮新王珣章陈曲侯	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2002	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	rhIL-12对恒河猴造血系统辐射防护作用的初步研究	熊国林赵毅邢爽申星宁学成卢世香李建郭玲玲郝锐陈廷超缪锦来贺济琛罗庆良	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2013	12	在线阅读下载PDF 职称材料