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人疱疹病毒8型K12基因在大肠杆菌中的克隆和表达
被引量：
6
1
作者
朱建中
卢春
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期274-276,共3页
目的:将人疱疹病毒8型(HHV-8)K12基因在大肠杆菌中进行融合表达。方法:设计一对PCR引物,在引物的5'端分别引入EcoRI和XhoI酶切位点,用此引物从质粒pCR-K12中扩增出HHV-8的K12基因,PCR产物经双酶切后按正确阅读框连接到原核表达载体p...
目的:将人疱疹病毒8型(HHV-8)K12基因在大肠杆菌中进行融合表达。方法:设计一对PCR引物,在引物的5'端分别引入EcoRI和XhoI酶切位点,用此引物从质粒pCR-K12中扩增出HHV-8的K12基因,PCR产物经双酶切后按正确阅读框连接到原核表达载体pGEX-6p-1上相应酶切位点,并转化BL21感受态细胞。结果:重组菌经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后,菌体SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)显示有一个大小为33ku的融合表达蛋白产生。结论:初步表明K12基因在大肠杆菌中获得正确表达。
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关键词
人疱疹病毒8型
K12基因
原核表达
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职称材料
含绿色荧光蛋白基因与人疱疹病毒8型K12基因重组真核表达载体的构建
被引量：
2
2
作者
朱建中
卢春
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第6期453-454,共2页
目的:构建含绿色荧光蛋白(GFP)基因与人疱疹病毒8型K12基因的重组真核表达载体。方法:将人疱疹病毒8型(HHV-8)K12基因插入到真核表达质粒pCR3.1的EcoRI和XhoI位点,构建重组质粒pCR-K12;PCR扩增GFP基因,将GFP基因插入到重组质粒pCR-K12中...
目的:构建含绿色荧光蛋白(GFP)基因与人疱疹病毒8型K12基因的重组真核表达载体。方法:将人疱疹病毒8型(HHV-8)K12基因插入到真核表达质粒pCR3.1的EcoRI和XhoI位点,构建重组质粒pCR-K12;PCR扩增GFP基因,将GFP基因插入到重组质粒pCR-K12中K12上游的KpnI和EcoRI位点中,获得重组表达质粒pCR-GFP-K12。结果:重组表达质粒pCR-GFP-K12的酶切鉴定符合预期结果,此重组质粒中的K12与GFP融合表达并受上游启动子pCMV控制。结论:重组表达质粒pCR-GFP-K12已构建成功,为研究K12的生物学活性及其作用机制打下基础。
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关键词
绿色荧光蛋白
人疱疹病毒8型
K12基因
重组真核表达载体
构建
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职称材料
题名
人疱疹病毒8型K12基因在大肠杆菌中的克隆和表达
被引量：
6
1
作者
朱建中
卢春
机构
南京医科大学基础医学院病原生物系
出处
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期274-276,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30100160)
江苏省教育厅科研基金资助项目(99KJB310002)
南京医科大学科技发展基金资助项目(NY200001)
文摘
目的:将人疱疹病毒8型(HHV-8)K12基因在大肠杆菌中进行融合表达。方法:设计一对PCR引物,在引物的5'端分别引入EcoRI和XhoI酶切位点,用此引物从质粒pCR-K12中扩增出HHV-8的K12基因,PCR产物经双酶切后按正确阅读框连接到原核表达载体pGEX-6p-1上相应酶切位点,并转化BL21感受态细胞。结果:重组菌经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后,菌体SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)显示有一个大小为33ku的融合表达蛋白产生。结论:初步表明K12基因在大肠杆菌中获得正确表达。
关键词
人疱疹病毒8型
K12基因
原核表达
Keywords
human herpesvirus (HHV
8
)
K12 gene
prokaryotic expression
分类号
R373.11 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
含绿色荧光蛋白基因与人疱疹病毒8型K12基因重组真核表达载体的构建
被引量：
2
2
作者
朱建中
卢春
机构
南京医科大学微生物与免疫学教研室
出处
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第6期453-454,共2页
基金
国家自然科学基金资助项目(30100160)
江苏省教育厅科研基金资助项目(99KJB310002)
文摘
目的:构建含绿色荧光蛋白(GFP)基因与人疱疹病毒8型K12基因的重组真核表达载体。方法:将人疱疹病毒8型(HHV-8)K12基因插入到真核表达质粒pCR3.1的EcoRI和XhoI位点,构建重组质粒pCR-K12;PCR扩增GFP基因,将GFP基因插入到重组质粒pCR-K12中K12上游的KpnI和EcoRI位点中,获得重组表达质粒pCR-GFP-K12。结果:重组表达质粒pCR-GFP-K12的酶切鉴定符合预期结果,此重组质粒中的K12与GFP融合表达并受上游启动子pCMV控制。结论:重组表达质粒pCR-GFP-K12已构建成功,为研究K12的生物学活性及其作用机制打下基础。
关键词
绿色荧光蛋白
人疱疹病毒8型
K12基因
重组真核表达载体
构建
Keywords
human herpesvirus
8
K12 gene
green fluoresent protein
recombinant expression plasmid
分类号
R373.11 [医药卫生—病原生物学]
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人疱疹病毒8型K12基因在大肠杆菌中的克隆和表达
朱建中
卢春
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2002
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
含绿色荧光蛋白基因与人疱疹病毒8型K12基因重组真核表达载体的构建
朱建中
卢春
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2002
2
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