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人源轮状病毒的小型猪腹泻模型建立 被引量:3
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作者 李晋涛 魏静 +6 位作者 牟芝蓉 张蓓 王靖雪 唐艳 何海洋 费蕾 吴玉章 《中国比较医学杂志》 CAS 2006年第9期577-577,共1页
目的建立人源轮状病毒的小型猪腹泻模型,为人源轮状病毒感染的免疫保护机制、致病机制及疫苗的研制奠定基础。方法ELISA与RT-PCR相结合分离鉴定野生型人源轮状病毒;用野生型人源轮状病毒G1与G3血清型口服接种不同日龄的小型猪,观察... 目的建立人源轮状病毒的小型猪腹泻模型,为人源轮状病毒感染的免疫保护机制、致病机制及疫苗的研制奠定基础。方法ELISA与RT-PCR相结合分离鉴定野生型人源轮状病毒;用野生型人源轮状病毒G1与G3血清型口服接种不同日龄的小型猪,观察粪便排泄等临床症状,ELISA及免疫荧光分别检测粪便与小肠上皮组织中的轮状病毒抗原,光镜及透射电镜观察小肠上皮组织的病理变化与病毒样颗粒。结果3~5日龄小型猪均出现了典型的临床腹泻症状;粪便中轮状病毒抗原排泄可平均持续5~7d;小肠组织可见明显的病理变化,同时用免疫荧光检测方法可在小肠组织中检测到特异性轮状病毒抗原;透射电镜进行观察,在小肠组织的超薄切片中可见到大量的轮状病毒颗粒。30~35日龄小型猪可出现明显腹泻临床症状,粪便中轮状病毒抗原排泄可持续4~7d;56~60日龄小型猪接种野生型人源轮状病毒G1血清型后,均未出现典型的腹泻症状,但可持续排毒2~3d。结论小型猪可作为人源轮状病毒的理想腹泻动物模型。 展开更多
关键词 人源轮状病毒 小型猪 腹泻模型
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猪源A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌电转化条件的优化
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作者 叶丽萍 王春凤 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第1期11-13,共3页
为了提高pW425et-Vp4基因工程乳酸菌的转化效率,对影响电转化效率的主要因素进行研究,以得到最佳的电转化条件。试验结果表明,猪轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌电转化的最佳条件为:当感受态细胞的D600nm值为0.4时,在MRS培养基中加入1%甘氨酸... 为了提高pW425et-Vp4基因工程乳酸菌的转化效率,对影响电转化效率的主要因素进行研究,以得到最佳的电转化条件。试验结果表明,猪轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌电转化的最佳条件为:当感受态细胞的D600nm值为0.4时,在MRS培养基中加入1%甘氨酸+0.3mol/L蔗糖,电场强度为11kV/cm,脉冲时间为3.8ms,电击后细胞复苏3~4h等条件时,得到较高的转化效率,最高可达3.8×104 CFU/μg DNA。 展开更多
关键词 A组轮状病毒Vp4基因 乳酸菌 电转化
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广州地区轮状病毒血清分型的研究 2.应用微量细胞病变定量读数中和试验对急性病毒性胃肠炎患儿HRV各血清型中和抗体的分析
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作者 张晓刚 韩守信 严泳楷 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 1989年第3期10-16,共7页
用微量细胞病变定量读数中和试验,以HRV血清1、2、3、4型的四个标准毒株为抗原,分别检测了1987年广州地区51例健康儿童和30例急性病毒性胃肠炎患儿的急性期及恢复期血清中抗HRV各血清型中和抗体的水平。结果表明30例患儿中的23例,其恢... 用微量细胞病变定量读数中和试验,以HRV血清1、2、3、4型的四个标准毒株为抗原,分别检测了1987年广州地区51例健康儿童和30例急性病毒性胃肠炎患儿的急性期及恢复期血清中抗HRV各血清型中和抗体的水平。结果表明30例患儿中的23例,其恢复期血清中的中和抗体比急性期有4倍以上的增长,抗HRV血清4型者占39.1%,抗HRV血清3型占30.4%,抗HRV2型者8.7%,抗HRA1型为17.4%。初步认为1987年广州地区流行的HRV型别以血清型4型为主。 展开更多
关键词 轮状病毒(hrv) 微量细胞病变定量读数中和试验 hrv-RNA电泳型
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猪A组轮状病毒pW425et-Vp4基因工程乳酸菌的构建及表达 被引量:3
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作者 叶丽萍 王春玲 王春凤 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2012年第1期3-6,共4页
以嗜酸乳杆菌为受体菌株,将pW425et-Vp4重组质粒电转化入嗜酸乳杆菌,构建猪源A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌,对影响电转化效率的主要因素进行研究,并对构建的乳酸菌进行表达分析。结果表明,在MRS培养基中加入1%甘氨酸+0.3mol/L蔗糖,电... 以嗜酸乳杆菌为受体菌株,将pW425et-Vp4重组质粒电转化入嗜酸乳杆菌,构建猪源A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌,对影响电转化效率的主要因素进行研究,并对构建的乳酸菌进行表达分析。结果表明,在MRS培养基中加入1%甘氨酸+0.3mol/L蔗糖,电场强度为11kV/cm,脉冲时间为3.8ms,电击后细胞复苏3~4h等条件时,得到较高的转化效率,最高可达3.8×104 CFU/μg DNA。pW425et-Vp4乳酸菌阳性克隆经Western-blot分析表明,其蛋白具有与猪轮状病毒多克隆抗体的反应原性。 展开更多
关键词 A组轮状病毒Vp4基因 乳酸菌 电转化 表达
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婴幼儿轮状病毒腹泻 被引量:5
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作者 吕绳敏 《中国医科大学学报》 CAS 1985年第2期177-179,183,共4页
婴幼儿寒冷季节流行性腹泻是一种遍及全世界的多发病,人类轮状病毒(HRV)是引起婴幼儿流行性腹泻最重要的病因(12、3)。据世界卫生组织统计每年全世界因腹泻死亡的婴儿为8百万至1千5百万。1973年澳大利亚学者Bishop(4)和英国学者Flewett... 婴幼儿寒冷季节流行性腹泻是一种遍及全世界的多发病,人类轮状病毒(HRV)是引起婴幼儿流行性腹泻最重要的病因(12、3)。据世界卫生组织统计每年全世界因腹泻死亡的婴儿为8百万至1千5百万。1973年澳大利亚学者Bishop(4)和英国学者Flewett(5)在电子显微镜下发现轮状病毒颗粒以来,世界各地开展对此疾病的研究。 展开更多
关键词 轮状病毒 ELISA 免疫电镜 hrv 婴幼儿 粪便悬液
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诺如病毒和轮状病毒三重荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:5
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作者 安微 郑晶 +5 位作者 车颖欣 陈世界 张婧 杨苗 谢礼 林华 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第8期49-54,58,共7页
为了建立一种能同时检测GI型诺如病毒(GI-NV)、GII型诺如病毒(GII-NV)和A群轮状病毒(A-RV)的三重荧光定量PCR检测方法,本试验根据GI-NV和GII-NV的开放阅读框1(Orf1)与开放阅读框2(Orf2)基因之间保守序列、A-RV的非结构蛋白3(Nsp3)基因... 为了建立一种能同时检测GI型诺如病毒(GI-NV)、GII型诺如病毒(GII-NV)和A群轮状病毒(A-RV)的三重荧光定量PCR检测方法,本试验根据GI-NV和GII-NV的开放阅读框1(Orf1)与开放阅读框2(Orf2)基因之间保守序列、A-RV的非结构蛋白3(Nsp3)基因保守序列,分别设计合成3对特异性引物和3个TaqMan探针,人工合成含有目标序列的基因,制备重组质粒标准品,绘制标准曲线,并对该检测方法的特异性、灵敏度、重复性进行评估。同时通过检测收集的109份动物源食品样品,对建立的方法与商品化试剂盒进行检测比对。结果显示:该方法可以特异性地区分GI-NV、GII-NV和A-RV,而与其他病原无交叉反应;该方法的最低检出限均为1×102 copies/μL的质粒标准品,具有较高的敏感性;组内和组间重复性试验结果显示,变异系数均小于5%,重复性较好;该方法与商品化的试剂盒检测结果符合率为100%。结果表明,本试验建立的检测方法能够快速、准确区分GI-NV、GII-NV和A-RV。 展开更多
关键词 诺如病毒 轮状病毒 三重荧光定量PCR 标准曲线 动物食品
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HRV间接ELISA检测方法的建立及大庆市区腹泻患儿HRV感染率的调查 被引量:1
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作者 文程 王薇 +4 位作者 余丽芸 侯喜林 单春桥 谭军 孙景秀 《黑龙江八一农垦大学学报》 2012年第5期60-64,共5页
为了监测近期大庆市儿童人源轮状病毒(HRV)的感染情况,利用已分离鉴定好的一株HRV当地流行株,对该HRV流行株进行浓缩纯化后,以纯化的HRV作为包被抗原,按照设定的间接ELISA程序进行试验,确定并优化各种检测条件,从而建立HRV间接ELISA检... 为了监测近期大庆市儿童人源轮状病毒(HRV)的感染情况,利用已分离鉴定好的一株HRV当地流行株,对该HRV流行株进行浓缩纯化后,以纯化的HRV作为包被抗原,按照设定的间接ELISA程序进行试验,确定并优化各种检测条件,从而建立HRV间接ELISA检测方法;利用建立的方法对2011年7月—2012年3月期间大庆地区1 452例腹泻患儿中的HRV感染情况进行初步调查,并按季节、年龄、区域、性别等方面对HRV感染率的检测结果进行统计学分析。结果显示,建立的HRV间接ELISA检测方法敏感度高、特异性强、重复性好,且检测结果灵敏、准确;利用该方法检测大庆市区1 452例腹泻患儿中HRV感染率平均为39.9%,而且得出寒冷的秋冬季是HRV感染的高发期,婴幼儿为HRV感染的易感时期;此外,卫生条件、经济状况及机体免疫力等因素也与HRV感染有一定的相关性。 展开更多
关键词 人源轮状病毒(hrv) 分离鉴定 间接ELISA方法 感染率
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我国猪主要腹泻性疾病的现状与综合防制概况
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作者 佟有恩 冯力 +3 位作者 焦静波 田荣福 张海彬 时洪艳 《畜牧兽医科技信息》 2002年第6期15-18,共4页
目前,我国养猪业已从家庭户养和分散饲养发展到今天的集约化饲养.集约化养猪场与传统的饲养方式相比具有规模大、数量多、密度高、生产工艺先进等特点.通过党的改革开放政策的不断深入,我国养猪业取得了长足的发展,据不完全统计,除西藏... 目前,我国养猪业已从家庭户养和分散饲养发展到今天的集约化饲养.集约化养猪场与传统的饲养方式相比具有规模大、数量多、密度高、生产工艺先进等特点.通过党的改革开放政策的不断深入,我国养猪业取得了长足的发展,据不完全统计,除西藏外全国30个省,2001年1月到6月我国生猪的饲养头数达到4.46亿头.但是各种疾病特别是猪的腹泻病也越来越严重地制约着养猪业的进一步发展,它可以造成仔猪的死亡,成猪的掉膘,饲料报酬的降低,增加人工费和药费的开支等危害.根据发病原因,猪的腹泻病主要包括病毒性的、细菌性的、寄生虫性及营养性代谢因素引起的腹泻.现就集约化猪场上述几种常见的腹泻疾病发生的特点及防制对策进行概述. 展开更多
关键词 TGEV 传染 感染 轮状病毒 大肠杆菌病 仔猪黄痢 猪腹泻病 性疾病
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