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抗结核杆菌人源噬菌体单链抗体库的构建及筛选
被引量：
1
1
作者
何光志
田维毅
+5 位作者
高英
王平
王文佳
王乾宇
黄高
安传伟
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2011年第5期70-74,共5页
目的:构建人源噬菌体展示单链抗体(ScFv)库,筛选抗结核杆菌特异性、高亲和力的ScFv.方法:从结核患者的外周血淋巴细胞中,提取RNA并通过RT-PCR扩增出VH和VL基因,并采用SOE-PCR构建ScFv基因,将其克隆入噬粒载pCANTAB5E中,转化于大肠杆菌T...
目的:构建人源噬菌体展示单链抗体(ScFv)库,筛选抗结核杆菌特异性、高亲和力的ScFv.方法:从结核患者的外周血淋巴细胞中,提取RNA并通过RT-PCR扩增出VH和VL基因,并采用SOE-PCR构建ScFv基因,将其克隆入噬粒载pCANTAB5E中,转化于大肠杆菌TG1,通过辅助噬菌体M13K07援救构建噬菌体单链抗体库.结果:初级库库容量为3.5×106,在大肠杆菌TG1中重组后得到2.6×106的次级抗体库.结论:成功构建噬菌体展示ScFv库并获得人源抗结核杆菌特异性ScFv,为进一步研制抗抗结核杆菌的高特异性、高亲和力的基因工程抗体奠定了基础.
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关键词
结核杆菌
人源噬菌体单链抗体
制备及筛选
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职称材料
胰腺癌人源噬菌体单链抗体库的构建及初步筛选
2
作者
何光志
田维毅
+5 位作者
高英
王平
王文佳
黄高
蔡琨
安传伟
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第7期158-160,共3页
提取胰腺癌患者的外周淋巴细胞总RNA,以RT-PCR技术分别扩增出人源抗体H链和L链的可变区基因,采用SOE-PCR法将VH和VL片段随机拼接成scFv片段,然后将scFv片段克隆至pCANTAB5E载体,并电转化至感受态TG1菌,经辅助噬菌体M13K07拯救,获得胰腺...
提取胰腺癌患者的外周淋巴细胞总RNA,以RT-PCR技术分别扩增出人源抗体H链和L链的可变区基因,采用SOE-PCR法将VH和VL片段随机拼接成scFv片段,然后将scFv片段克隆至pCANTAB5E载体,并电转化至感受态TG1菌,经辅助噬菌体M13K07拯救,获得胰腺癌人源噬菌体单链抗体库。结果表明,从外周血淋巴细胞中获取可变区基因,利用噬菌体抗体库技术制备人源抗胰腺癌单链抗体的策略是可行的。
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关键词
胰腺癌
人源噬菌体单链抗体
构建与筛选
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职称材料
题名
抗结核杆菌人源噬菌体单链抗体库的构建及筛选
被引量：
1
1
作者
何光志
田维毅
高英
王平
王文佳
王乾宇
黄高
安传伟
机构
贵阳中医学院
遵义医学院附属医院
出处
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2011年第5期70-74,共5页
基金
贵州省2011年社会发展科技攻关资助项目(黔科合SY字(2011)3020)
文摘
目的:构建人源噬菌体展示单链抗体(ScFv)库,筛选抗结核杆菌特异性、高亲和力的ScFv.方法:从结核患者的外周血淋巴细胞中,提取RNA并通过RT-PCR扩增出VH和VL基因,并采用SOE-PCR构建ScFv基因,将其克隆入噬粒载pCANTAB5E中,转化于大肠杆菌TG1,通过辅助噬菌体M13K07援救构建噬菌体单链抗体库.结果:初级库库容量为3.5×106,在大肠杆菌TG1中重组后得到2.6×106的次级抗体库.结论:成功构建噬菌体展示ScFv库并获得人源抗结核杆菌特异性ScFv,为进一步研制抗抗结核杆菌的高特异性、高亲和力的基因工程抗体奠定了基础.
关键词
结核杆菌
人源噬菌体单链抗体
制备及筛选
Keywords
Mycobacterium Smegmatis
human single-chain antibody
construction and screening
分类号
R378.91 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
胰腺癌人源噬菌体单链抗体库的构建及初步筛选
2
作者
何光志
田维毅
高英
王平
王文佳
黄高
蔡琨
安传伟
机构
贵阳中医学院
遵义医学院附院
出处
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第7期158-160,共3页
基金
贵州省科学技术基金(黔科合J字[2010]2262号)
文摘
提取胰腺癌患者的外周淋巴细胞总RNA,以RT-PCR技术分别扩增出人源抗体H链和L链的可变区基因,采用SOE-PCR法将VH和VL片段随机拼接成scFv片段,然后将scFv片段克隆至pCANTAB5E载体,并电转化至感受态TG1菌,经辅助噬菌体M13K07拯救,获得胰腺癌人源噬菌体单链抗体库。结果表明,从外周血淋巴细胞中获取可变区基因,利用噬菌体抗体库技术制备人源抗胰腺癌单链抗体的策略是可行的。
关键词
胰腺癌
人源噬菌体单链抗体
构建与筛选
Keywords
pancreatic cancer
human phage antibody
construction and screening
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗结核杆菌人源噬菌体单链抗体库的构建及筛选
何光志
田维毅
高英
王平
王文佳
王乾宇
黄高
安传伟
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2011
1
在线阅读
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职称材料
2
胰腺癌人源噬菌体单链抗体库的构建及初步筛选
何光志
田维毅
高英
王平
王文佳
黄高
蔡琨
安传伟
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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