目的·从人根尖乳头干细胞(human stem cells from the apical papilla,hSCAPs)中提取外泌体并进行鉴定。方法·使用改良组织块法培养hSCAPs并检测干细胞表面标志物CD105、CD45、CD44、CD31、CD34、CD29的表达情况。体外诱导hSC...目的·从人根尖乳头干细胞(human stem cells from the apical papilla,hSCAPs)中提取外泌体并进行鉴定。方法·使用改良组织块法培养hSCAPs并检测干细胞表面标志物CD105、CD45、CD44、CD31、CD34、CD29的表达情况。体外诱导hSCAPs向成骨细胞和脂肪细胞分化以检测其多向分化能力。使用梯度离心方法从hSCAPs培养上清中分离出外泌体。通过粒径分析确定外泌体粒径大小,透射电镜观察外泌体形态特征,Western blotting进行外泌体特异性抗原分子CD81、CD9、CD63和TSG101的鉴定。结果·在hSCAPs中检测到间充质干细胞表面抗原标志物CD105、CD44和CD29表达呈强阳性,而造血干细胞标志物CD45、CD31和CD34呈阴性。hSCAPs能够向成骨细胞和脂肪细胞分化。从hSCAPs的上清中分离出来的囊泡样物质,其外形为圆形囊泡并且具有完整的膜结构,粒径为30～100 nm,而且表达外泌体特性蛋白CD81、CD9、CD63和TSG101。结论·成功地从hSCAPs中分离出囊泡样物质,并鉴定其为外泌体。展开更多
文摘目的·从人根尖乳头干细胞(human stem cells from the apical papilla,hSCAPs)中提取外泌体并进行鉴定。方法·使用改良组织块法培养hSCAPs并检测干细胞表面标志物CD105、CD45、CD44、CD31、CD34、CD29的表达情况。体外诱导hSCAPs向成骨细胞和脂肪细胞分化以检测其多向分化能力。使用梯度离心方法从hSCAPs培养上清中分离出外泌体。通过粒径分析确定外泌体粒径大小,透射电镜观察外泌体形态特征,Western blotting进行外泌体特异性抗原分子CD81、CD9、CD63和TSG101的鉴定。结果·在hSCAPs中检测到间充质干细胞表面抗原标志物CD105、CD44和CD29表达呈强阳性,而造血干细胞标志物CD45、CD31和CD34呈阴性。hSCAPs能够向成骨细胞和脂肪细胞分化。从hSCAPs的上清中分离出来的囊泡样物质,其外形为圆形囊泡并且具有完整的膜结构,粒径为30～100 nm,而且表达外泌体特性蛋白CD81、CD9、CD63和TSG101。结论·成功地从hSCAPs中分离出囊泡样物质,并鉴定其为外泌体。
