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烟用香精香料对人支气管上皮细胞的毒性研究 被引量:1
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作者 谢慧玲 胡旺顺 +5 位作者 钟波 张发明 李映相 李发平 苏仕开 刘姜瑾 《湖南农业科学》 2009年第1期80-84,共5页
为了探讨烟用香精香料对人支气管上皮细胞的毒性作用,并为其安全性评价提供毒理学依据,将永生化的人支气管上皮细胞(BEP2D细胞)分为纯卷烟组和卷烟加香加料组、卷烟加香精和卷烟加香料组、卷烟加不同香精组、卷烟加不同香料组,用MTT法... 为了探讨烟用香精香料对人支气管上皮细胞的毒性作用,并为其安全性评价提供毒理学依据,将永生化的人支气管上皮细胞(BEP2D细胞)分为纯卷烟组和卷烟加香加料组、卷烟加香精和卷烟加香料组、卷烟加不同香精组、卷烟加不同香料组,用MTT法测定细胞存活率,用分子探针氢化乙锭(HE)的荧光产物溴乙锭(EB)相对定量细胞内活性氧(ROS)水平。结果表明加香加料致卷烟烟气冷凝物(CSC)的细胞存活率降低,细胞内ROS水平增高,对细胞的氧化损伤大;与香料比较,香精的细胞存活率低,对细胞的氧化损伤大;1#香精的细胞存活率较高,但对细胞的氧化损伤较大;1#香料的细胞存活率较低,但对细胞的氧化损伤较小,表现在细胞内ROS水平较低。由此可知CSC对BEP2D细胞有毒性,烟用香精香料的添加增加了烟气对BEP2D细胞的毒性作用,而在香精和香料中,香精对细胞毒性较大。 展开更多
关键词 烟用香精香料 人支气管上皮细胞 细胞存活率 活性氧 卷烟烟气冷凝物 细胞毒性
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NNK转化人支气管上皮细胞中p53、MGMT基因表达及意义
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作者 张宏山 吴清玉 +2 位作者 张阳 吕嘉春 柳德斌 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第37期25-26,共2页
目的探讨亚硝胺吡啶基丁酮(NNK)转化人支气管上皮细胞中p53、MGMT基因表达及意义。方法用NNK水溶液处理支气管上皮细胞株16HBE细胞,每隔5代取转化细胞,用免疫组化SP法检测细胞中的p53和MGMT基因表达,并与A549细胞及二羟环氧苯并芘(BPDE... 目的探讨亚硝胺吡啶基丁酮(NNK)转化人支气管上皮细胞中p53、MGMT基因表达及意义。方法用NNK水溶液处理支气管上皮细胞株16HBE细胞,每隔5代取转化细胞,用免疫组化SP法检测细胞中的p53和MGMT基因表达,并与A549细胞及二羟环氧苯并芘(BPDE)成瘤细胞比较。结果免疫组化显示,MGMT基因在正常16HBE细胞呈强阳性表达,随着NNK对16HBE细胞转化代数增加,其表达逐渐减弱,至第20、23代呈阴性表达;在A549细胞及BPDE成瘤细胞中呈阳性表达。突变型p53基因在正常16HBE细胞中呈弱阳性表达,至第20代呈强阳性表达,在NNK成瘤细胞、A549细胞及BPDE成瘤细胞中均呈强阳性表达。结论p53和MGMT基因表达可作为肺癌早期诊断分子标记物的参考指标,用免疫组化SP法检测p53和MGMT基因,适用于高危人群的大规模筛检。 展开更多
关键词 人支气管上皮细胞 亚硝基吡啶基丁酮 免疫组织化学染色
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人支气管上皮细胞原代培养的护理支持
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作者 李智娟 欧雪珍 +1 位作者 肖芳红 罗章英 《中国医药科学》 2013年第14期125-126,共2页
目的探讨人支气管上皮细胞原代培养中护理配合措施。方法做好我院2012年1~9月接收的34例肺癌患者的术前护理工作,包括人支气管上皮细胞分离前科普宣教和心理护理等,了解人支气管上皮细胞原代培养的各种方法,熟悉操作过程,备齐所需要的... 目的探讨人支气管上皮细胞原代培养中护理配合措施。方法做好我院2012年1~9月接收的34例肺癌患者的术前护理工作,包括人支气管上皮细胞分离前科普宣教和心理护理等,了解人支气管上皮细胞原代培养的各种方法,熟悉操作过程,备齐所需要的物品,并且协助研究人员完成人支气管上皮细胞的原代培养。结果经过有效地护理配合,34例患者均顺利完成支气管上皮细胞的分离,无不良反应发生;并且通过组织贴块法、蛋白酶消化+机械刮刷法、纤支镜刷检法三种不同的分离培养方法中探索出组织贴块法获得的支气管上皮细胞成活率高,纯度高,是一种经济、简便、实用的支气管上皮细胞培养方法。结论在人支气管上皮细胞的原代培养中,配合相应的护理,效果良好,为研究出经济、简便、实用的支气管上皮细胞培养方法奠定了基础,值得在临床中推广应用。 展开更多
关键词 人支气管上皮细胞 原代培养 护理配合
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线粒体DNA减少在氡及其子体致人支气管上皮细胞凋亡中的作用 被引量:2
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作者 王伟鹏 孙静 +2 位作者 陈玉之 李冰燕 童建 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2014年第1期27-31,共5页
使用溴化乙锭(Ethidium bromide,EtBr)诱导方法构建线粒体数目减少支气管上皮细胞(Human bronchia epithelia with mitochondrial DNA knock-down,ρ?HBE)模型并进行长期氡照射,用克隆形成法测定氡照射后HBE细胞的增殖能力,用流式细胞... 使用溴化乙锭(Ethidium bromide,EtBr)诱导方法构建线粒体数目减少支气管上皮细胞(Human bronchia epithelia with mitochondrial DNA knock-down,ρ?HBE)模型并进行长期氡照射,用克隆形成法测定氡照射后HBE细胞的增殖能力,用流式细胞仪进行细胞凋亡和线粒体膜电位的检测。结果发现,氡照射后,与线粒体DNA数量正常的HBE细胞(ρ+HBE)相比较,ρ?HBE细胞存活分数明显增高,虽然早期凋亡率明显低于正常细胞,但是总凋亡率增加,同时线粒体膜电位也显著降低。结果提示,氡照射后引起的线粒体减少HBE细胞增殖能力提高与总凋亡率的减少有关,并且与线粒体膜电位的变化相关。 展开更多
关键词 线粒体DNA 氡及其子体 人支气管上皮细胞 凋亡 细胞增殖
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低氧对人支气管上皮细胞气道重塑相关因子表达的影响 被引量:2
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作者 邓楠琳 朱芮 李敏超 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期204-209,共6页
目的研究低氧刺激对人支气管上皮细胞(16HBE)中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和转化生长因子-β_1(TGF-β_1)表达的影响及其相关信号机制。方法将细胞分组,低氧组用20mL/L O2培养16HBE细胞,培养时间分别为6、12、24h;对照组于常规条件下培养... 目的研究低氧刺激对人支气管上皮细胞(16HBE)中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和转化生长因子-β_1(TGF-β_1)表达的影响及其相关信号机制。方法将细胞分组,低氧组用20mL/L O2培养16HBE细胞,培养时间分别为6、12、24h;对照组于常规条件下培养。选择MMP-9和TGF-β_1表达较高的时间组予以表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂AG1478、低氧诱导因子(HIF-1α)抑制剂Lificiguat(YC-1)干预。CCK-8法检测各组细胞活力,实时荧光定量PCR检测MMP-9和TGF-β_1的转录水平,Western blot检测HIF-1α、MMP-9和TGF-β_1的蛋白相对表达水平。结果低氧组MMP-9和TGF-β_1转录及蛋白水平均高于对照组(P均<0.05),AG1478、YC-1可抑制低氧引起的上述改变(P<0.05);AG1478能降低在低氧诱导时高水平表达的HIF-1α。结论低氧刺激可能通过EGFR诱导HIF-1α表达,进而促进气道重塑相关因子MMP-9和TGF-β_1的表达。 展开更多
关键词 低氧 人支气管上皮细胞 基质金属蛋白酶-9(MMP-9) 转化生长因子-β1(TGF-β1) 低氧诱导因子(HIF-1α)
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高迁移率族蛋白B1对人支气管上皮细胞的炎症因子和受体表达的影响 被引量:1
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作者 梁悦 薛艳龙 +2 位作者 杨超勉 黄天霞 陈一强 《中国医药科学》 2022年第22期4-7,共4页
目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对人支气管上皮细胞(16-HBE)的炎症因子和受体表达的影响。方法将16-HBE按照随机数表法分为对照组a(不含HMGB1的培养基)、HMGB1-100 ng/ml组、HMGB1-500 ng/ml组、HMGB1-2000 ng/ml组a,上述分组细胞皆培... 目的探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对人支气管上皮细胞(16-HBE)的炎症因子和受体表达的影响。方法将16-HBE按照随机数表法分为对照组a(不含HMGB1的培养基)、HMGB1-100 ng/ml组、HMGB1-500 ng/ml组、HMGB1-2000 ng/ml组a,上述分组细胞皆培养48 h。使用酶联免疫吸附实验法(ELISA)检测16-HBE的白介素-8(IL-8)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、胸腺基质淋巴生成素(TSLP)、血管内皮生长因子(VEGF)释放水平;使用蛋白质印迹法(Western blot)检测16-HBE的糖基化终产物受体(RAGE)、Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)蛋白水平。将16-HBE按照随机数表法分为对照组b(不含HMGB1的培养基)、HMGB1-2000 ng/ml组b、RAGE拮抗组(anti-RAGE组)、anti-RAGE+HMGB1-2000 ng/ml组,上述分组细胞皆培养48 h,用ELISA检测16-HBE的IL-8、MMP-9、TSLP、VEGF释放水平。结果与对照组a比较,HMGB1-500 ng/ml组和HMGB1-2000 ng/ml组a明显增加16-HBE的IL-8、MMP-9、TSLP、VEGF释放和RAGE蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05);与HMGB1-2000 ng/ml组b比较,anti-RAGE+HMGB1-2000 ng/ml组中IL-8、MMP-9、TSLP、VEGF的释放明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HMGB1可依赖RAGE受体增加16-HBE的IL-8、MMP-9、TSLP、VEGF的释放,可能以此来调控支气管哮喘的气道炎症反应。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白B1 人支气管上皮细胞 糖基化终产物受体 支气管哮喘
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香烟烟雾提取物对人支气管上皮细胞中LIGHT及其受体基因表达的影响 被引量:1
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作者 陈翠芬 吴东 吴斌 《山东医药》 CAS 2020年第17期5-8,共4页
目的观察香烟烟雾提取物(CSE)对人支气管上皮细胞16HBE中肿瘤坏死因子超家族成员14(LIGHT)及其受体LTβR和HVEM基因表达的影响。方法将体外培养的16HBE细胞分为干预组和对照组,干预组分别加1%、2%、3%、4%、5%CSE培养48 h,或以3%CSE分... 目的观察香烟烟雾提取物(CSE)对人支气管上皮细胞16HBE中肿瘤坏死因子超家族成员14(LIGHT)及其受体LTβR和HVEM基因表达的影响。方法将体外培养的16HBE细胞分为干预组和对照组,干预组分别加1%、2%、3%、4%、5%CSE培养48 h,或以3%CSE分别培养6、12、24、36、48 h;对照组加同样体积的无血清DMEM处理。收集对照组和干预组不同浓度和不同作用时点的细胞,采用real-time PCR法检测LIGHT、LTβR、HVEM mRNA。结果与对照组比较,干预组CSE作用16HBE细胞48 h后LIGHT LTβR mRNA表达升高,分别于3%~5%、2%~5%CSE时差异有统计学意义(P均<0.05);干预组1%~4%CSE作用16HBE细胞48 h后HVEM mRNA表达升高(P均<0.05),3%CSE时到达峰值,5%CSE时HVEM mRNA表达较对照组降低(P<0.05)。与对照组比较,3%CSE作用16HBE细胞后各时点LIGHT、LTβR mRNA表达逐渐升高,分别于36、48 h和24、36、48 h时差异有统计学意义(P均<0.05);3%CSE作用16HBE细胞48 h时HVEM mRNA表达升高(P<0.01),其余时点表达变化不显著。结论随着CSE浓度升高和作用时间延长,可引起16HBE细胞LIGHT、LTβR、HVEM基因表达的改变。 展开更多
关键词 香烟烟雾提取物 人支气管上皮细胞 LIGHT基因 LTβR基因 HVEM基因
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人支气管上皮细胞地塞米松耐药与MUC1表达的关系
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作者 韩丽丽 李明娴 +1 位作者 尹凤先 丁艳艳 《山东医药》 CAS 2020年第34期57-60,共4页
目的探讨人支气管上皮细胞地塞米松耐药与黏蛋白1(MUC1)表达的关系。方法制备香烟烟雾提取物(CSE),体外培养人正常支气管上皮细胞NHBE(以下称NHBE细胞),分别给予终浓度为0、1%、2.5%、5%、10%CSE干预,采用MTT法检测细胞存活率,采用ELIS... 目的探讨人支气管上皮细胞地塞米松耐药与黏蛋白1(MUC1)表达的关系。方法制备香烟烟雾提取物(CSE),体外培养人正常支气管上皮细胞NHBE(以下称NHBE细胞),分别给予终浓度为0、1%、2.5%、5%、10%CSE干预,采用MTT法检测细胞存活率,采用ELISA法检测培养上清液炎症因子IL-8、粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。选择引起NHBE细胞炎症因子IL-8、GM-CSF分泌增加的CSE最小浓度进行后续实验。取NHBE细胞,予终浓度为1×10-8 mol/L的地塞米松干预1个月,收集细胞,设为耐药细胞组,加入适量CSE溶液和地塞米松,使CSE终浓度达到上述筛选的最小浓度、地塞米松终浓度达到1×10-8 mol/L;另取NHBE细胞,随机分为非耐药细胞1组和非耐药细胞2组,非耐药细胞1组加入适量CSE溶液,使CSE终浓度达到上述筛选的最小浓度;非耐药细胞2组加入适量地塞米松,使地塞米松终浓度达到1×10-8 mol/L。各组干预48 h,采用ELISA法检测培养上清液炎症因子IL-8、GM-CSF,采用RT-qPCR法检测MUC1 mRNA相对表达量。结果随着CSE浓度升高,NHBE细胞存活率逐渐降低,呈剂量依赖性(F=8.520,P<0.01)。5%、10%CSE干预后NHBE细胞存活率明显低于0、1%、2.5%CSE干预后,并且10%CSE干预后NHBE细胞存活率低于5%CSE干预后(P均<0.05)。而0、1%、2.5%CSE干预后NHBE细胞存活率两两比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。与0、1%、2.5%CSE比较,5%、10%CSE均能使NHBE细胞炎症因子IL-8、GM-CSF分泌明显升高(P均<0.05)。引起炎症因子IL-8、GM-CSF水平增加的CSE最小浓度为5%,故选择5%CSE进行后续实验。耐药细胞组炎症因子IL-8、GM-CSF水平明显高于非耐药细胞2组(P均<0.05),而与非耐药细胞2组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。耐药细胞组MUC1 mRNA相对表达量均低于非耐药细胞1组和非耐药细胞2组(P均<0.01),而非耐药细胞1组与非耐药细胞2组MUC1 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论人支气管上皮细胞地塞米松耐药可能与MUC1表达降低有关。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 人支气管上皮细胞 地塞米松 耐药 黏蛋白1
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烟草烟雾暴露的人支气管上皮细胞铁死亡情况观察及其机制
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作者 贺红霞 周金玲 金明 《山东医药》 CAS 2023年第5期31-36,共6页
目的观察烟草烟雾暴露对体外培养的人支气管上皮细胞铁死亡的影响并分析其机制。方法正常人支气管上皮细胞BEAS-2B分别使用0、0.5%、1.0%和2.0%的烟草烟雾提取物(CSE)处理24 h,即为对照组、0.5%CSE组、1.0%CSE组及2.0%CSE组。采用EdU染... 目的观察烟草烟雾暴露对体外培养的人支气管上皮细胞铁死亡的影响并分析其机制。方法正常人支气管上皮细胞BEAS-2B分别使用0、0.5%、1.0%和2.0%的烟草烟雾提取物(CSE)处理24 h,即为对照组、0.5%CSE组、1.0%CSE组及2.0%CSE组。采用EdU染色观察细胞增殖能力,CCK-8法观察细胞活性;比色法检测细胞Fe2+水平和还原型谷胱甘肽(GSH)水平;流式细胞术观察细胞活性氧(ROS)水平;q-PCR法及Western blotting法观察铁死亡相关因子谷胱甘肽过氧化酶4(GPx4)、铁蛋白重链1(FTH1)及环加氧酶2(Ptgs2)mRNA及蛋白;碘化丙啶染色观察细胞死亡情况;透射电镜观察细胞线粒体结构。将BEAS-2B细胞分为Fer-1组、Nec-1组、Z-VAD-FMK组及CSE组,分别给予铁死亡抑制剂Fer-1、坏死抑制剂Nec-1、凋亡抑制剂Z-VAD-FMK及不加试剂预处理后,加入2.0%CSE培养基处理24 h。采用CCK-8法观察各组细胞活性;比色法检测Fer-1组、CSE组细胞Fe2+及GSH水平,流式细胞术观察Fer-1组、CSE组细胞ROS水平;q-PCR法及Western blotting法观察Fer-1组、CSE组细胞FTH1、Ptgs2、GPx4mRNA及蛋白表达;碘化丙啶染色观察Fer-1组、CSE组细胞死亡情况。结果EdU阳性细胞数、细胞OD值对照组>0.5%CSE组>1.0%CSE组>2.0%CSE组;细胞Fe2+水平、ROS水平对照组<0.5%CSE组<1.0%CSE组<2.0%CSE组,GSH水平对照组>0.5%CSE组>1.0%CSE组>2.0%CSE组;细胞FTH1、GPx4 mRNA及蛋白对照组>0.5%CSE组>1.0%CSE组>2.0%CSE组,Ptgs2 mRNA及蛋白对照组<0.5%CSE组<1.0%CSE组<2.0%CSE组;细胞死亡率对照组<0.5%CSE组<1.0%CSE组<2.0%CSE组(P均<0.05)。透射电镜结果显示,BEAS-2B细胞经2.0%CSE处理后出现线粒体萎缩变小,线粒体双层膜密度增高,线粒体脊减少甚至消失等典型铁死亡线粒体超微结构改变。细胞OD值Fer-1组>Nec-1组、Z-VAD-FMK组、CSE组;Fer-1组细胞Fe^(2+)、ROS水平低于CSE组,GSH水平高于CSE组;Fer-1组细胞FTH1、GPx4 mRNA及蛋白高于CSE组,Ptgs2 mRNA及蛋白低于CSE组;细胞死亡率Fer-1组低于CSE组(P均<0.05)。结论烟草烟雾暴露可诱导BEAS-2B细胞发生铁死亡,该作用可能通过介导BEAS-2B细胞铁超载和氧化还原紊乱来实现。 展开更多
关键词 烟雾暴露 铁死亡 氧化还原 铁超载 人支气管上皮细胞
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二甲亚砜对染毒支气管上皮细胞的保护作用分析 被引量:3
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作者 李世珍 黄波 +1 位作者 黄锐 贺性鹏 《中国医学工程》 2008年第1期26-28,31,共4页
目的在观察铀矿粉对体外培养的支气管上皮细胞的毒性作用同时,加入二甲亚砜,以了解其在支气管上皮细胞受铀矿粉染毒时的可能保护机制。方法将不同浓度的铀矿粉与体外培养的支气管上皮细胞进行长时间接触,分为对照组、染毒组和二甲亚砜(D... 目的在观察铀矿粉对体外培养的支气管上皮细胞的毒性作用同时,加入二甲亚砜,以了解其在支气管上皮细胞受铀矿粉染毒时的可能保护机制。方法将不同浓度的铀矿粉与体外培养的支气管上皮细胞进行长时间接触,分为对照组、染毒组和二甲亚砜(DMSO)保护组,通过血清抗性实验等,观察各组间细胞受损的情况。结果随着铀矿粉浓度的增高,支气管上皮细胞受损明显加重,加入二甲亚砜的支气管上皮细胞受损情况好于未加入者。DMSO对铀矿尘作用于BEAS-2B细胞后,可引起细胞DNA断裂,造成细胞拖尾率、彗星尾部DNA含量、尾长、尾部面积、尾距增加具有较好的抑制作用。结论铀矿粉对支气管上皮细胞有明显的恶性转化作用,可能是铀矿粉对肺损伤的主要机制,二甲亚砜具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 铀矿粉 人支气管上皮细胞 二甲亚砜
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16HBE细胞上皮间质转化模型建立以及麻黄-甘草药对对其影响 被引量:4
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作者 姚露 魏盼 +4 位作者 王思齐 袁为远 王霄彤 郑劼 洪敏 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期284-289,共6页
目的 体外诱导人支气管上皮细胞(16HBE)上皮间质转化(EMT)最适条件摸索以及探讨麻黄甘草对EMT的影响。方法 以16HBE细胞株为研究对象,分别给予转化生长因子β1(TGF-β1)单一刺激以及血清饥饿联合刺激,运用Western blot法检测上皮及间质... 目的 体外诱导人支气管上皮细胞(16HBE)上皮间质转化(EMT)最适条件摸索以及探讨麻黄甘草对EMT的影响。方法 以16HBE细胞株为研究对象,分别给予转化生长因子β1(TGF-β1)单一刺激以及血清饥饿联合刺激,运用Western blot法检测上皮及间质特征性蛋白的表达。运用免疫荧光检测E-Cadherin和N-Cadherin胞内表达分布情况。运用qPCR检测上皮及间质特征性基因的表达水平。血清饥饿联合TGF-β1刺激,给予麻黄甘草药对干预,Western blot法检测上皮及间质特征性蛋白的表达水平。结果 TGF-β1可诱导16HBE细胞由结构规则、质密均匀的鹅卵石状向纺锤体状转化。TGF-β1单独刺激可诱导16HBE细胞N-Cadherin、α-SMA蛋白表达升高,对E-Cadherin、ZO-1蛋白表达未见明显影响。而当细胞密度为15%时,血清饥饿联合TGF-β1可诱导16HBE细胞N-Cadherin、α-SMA、Vimentin、CollagenⅠ蛋白、基因水平升高以及E-Cadherin、ZO-1蛋白、基因水平降低,并且ECadherin蛋白分布紊乱,上皮结构破坏。血清饥饿联合TGF-β1刺激,麻黄甘草药对可抑制NCadherin、α-SMA的表达,并恢复ECadherin蛋白的表达,对ZO1无明显影响。结论 血清饥饿联合TGF-β1能体外诱导16HBE细胞建立稳定可重复的EMT模型,可用于体外研究哮喘发生EMT相关机制。麻黄甘草药对一定程度上可抑制16HBE细胞EMT过程。 展开更多
关键词 人支气管上皮细胞 上皮间质转化 TGF-Β1 血清饥饿 药对
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基于TLR4/PI3K/Akt/NF-κB信号通路探讨热毒宁注射液抑制脂多糖刺激的BEAS-2B细胞炎症因子表达的作用机制 被引量:1
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作者 康建英 颜丽珊 +4 位作者 顾春宇 邱新宇 王亦巍 罗赣 张翼 《中国现代中药》 CAS 2024年第11期1938-1946,共9页
目的:基于Toll样受体4(TLR4)/磷脂肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探究热毒宁注射液(RDN)对脂多糖(LPS)刺激的人支气管上皮细胞BEAS-2B炎症因子表达的影响及机制。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定RD... 目的:基于Toll样受体4(TLR4)/磷脂肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探究热毒宁注射液(RDN)对脂多糖(LPS)刺激的人支气管上皮细胞BEAS-2B炎症因子表达的影响及机制。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定RDN冻干粉中栀子苷和绿原酸含量;采用分子对接技术评估栀子苷和绿原酸与TLR4的结合能力。通过体外实验构建LPS(1μg·mL^(–1))刺激的BEAS-2B细胞气道炎症模型;采用噻唑蓝(MTT)法检测LPS诱导的BEAS-2B细胞活力;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测LPS诱导的BEAS-2B细胞炎症因子mRNA的表达;通过免疫印迹法(WB)检测LPS诱导的BEAS-2B细胞TLR4/PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关蛋白质的表达;采用免疫荧光法(IF)检测转录因子c-Jun和p65的入核情况。结果:RDN冻干粉中栀子苷和绿原酸的质量分数分别为127.00、70.26 mg·g^(–1);栀子苷和绿原酸均能与TLR4结合,结合能分别为–7.0、–7.9 kcal·mol^(–1)。质量浓度为12.5~400.0μg·mL^(–1)时,RDN对LPS刺激的BEAS-2B细胞活力无显著的抑制作用;质量浓度为200.0~400.0μg·mL^(–1)时,RDN能明显下调白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、趋化因子CXC配体2(CXCL2)、CXCL5、趋化因子配体5(CCL5)、CCL20 mRNA的表达。此外,RDN能降低TLR4/PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关蛋白质PI3K、Akt、TANK结合激酶1(TBK1)、IκB激酶(IKK)α/β、NF-κB抑制因子α(IκBα)、p65、p38、c-Jun N-末端激酶(JNK)、胞外信号调节激酶(ERK)和c-Jun的磷酸化水平,同时抑制LPS激活的BEAS-2B细胞p65和c-Jun的入核。结论:RDN能下调LPS诱导的BEAS-2B细胞炎症因子mRNA的表达,其机制与RDN阻断TLR4/PI3K/Akt/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 热毒宁注射液 气道炎症 人支气管上皮细胞 Toll样受体4/磷脂肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/核转录因子-κB信号通路 脂多糖
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气管和支气管疾病
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 1999年第12期25-25,共1页
9943653 弥漫性全细支气管炎合并MPO-ANCA 关连血管炎1例[日,英摘]/宫本大介//日呼吸会志.-1998,36(5).-453~458 冀医情9943654 羟甲异丁肾上腺素(Salbuta-mol)对人支气管上皮细胞增殖的影响:关于 MAP 激酶的参与[日,英摘]/西村和幸//... 9943653 弥漫性全细支气管炎合并MPO-ANCA 关连血管炎1例[日,英摘]/宫本大介//日呼吸会志.-1998,36(5).-453~458 冀医情9943654 羟甲异丁肾上腺素(Salbuta-mol)对人支气管上皮细胞增殖的影响:关于 MAP 激酶的参与[日,英摘]/西村和幸//日呼吸会志.-1998,36(5).-428~432 冀医情9943655 Simkania E 的高度流行/Ka-haneS//J Infect Dis.-1998,177(5).- 展开更多
关键词 人支气管上皮细胞 支气管 肾上腺素 支气管疾病 血管炎 呼吸 弥漫性 哮喘发作 增殖 合并
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支气管疾病
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 1998年第1期63-64,共2页
9801287 致敏豚鼠反复接触过敏原会增加非肾上腺能非胆硷能神经介导的支气管收缩的兴奋性/Kagegama N//Eur Respir J.-1996,9(7).-1439~1444 一军大9801288 细胞诱导性支气管上皮细胞炎介质的释放/Khair O A//Eur Respir J.-1996,9(9).... 9801287 致敏豚鼠反复接触过敏原会增加非肾上腺能非胆硷能神经介导的支气管收缩的兴奋性/Kagegama N//Eur Respir J.-1996,9(7).-1439~1444 一军大9801288 细胞诱导性支气管上皮细胞炎介质的释放/Khair O A//Eur Respir J.-1996,9(9).-1913~1922 一军大9801289 支气管阻塞若干病理生理机制的诊断法[俄,英摘]///.-1996,68(3). 展开更多
关键词 诱导性 人支气管上皮细胞 支气管收缩 支气管阻塞 支气管扩张症 豚鼠 病理生理机制 接触过敏 支气管疾病 肾上腺
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辐射诱发细胞内活性氧增高与DNA氧化损伤研究 被引量:14
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作者 朱茂祥 杨陟华 +2 位作者 龚诒芬 陆颖 曹珍山 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期270-274,共5页
用60 Coγ射线照射人支气管上皮细胞 (BEP2D)。细胞内过氧化氢 (H2 O2 )和超氧阴离子(O2 · - )分别用分子探针 2’ ,7’ -二氯荧光黄双乙酸盐 (DCFH -DA)和氢化乙锭 (HE)进行标记 ,并通过流式细胞仪测定荧光产物 2’ ,7’ -二氯荧... 用60 Coγ射线照射人支气管上皮细胞 (BEP2D)。细胞内过氧化氢 (H2 O2 )和超氧阴离子(O2 · - )分别用分子探针 2’ ,7’ -二氯荧光黄双乙酸盐 (DCFH -DA)和氢化乙锭 (HE)进行标记 ,并通过流式细胞仪测定荧光产物 2’ ,7’ -二氯荧光黄 (DCF)和溴乙锭 (EB)荧光强度进行相对定量分析。DNA氧化损伤产物 8-羟基脱氧鸟嘌呤 (OH8dG)含量用高压液相色谱结合电化学方法 (HPLC-ECD)测定。结果表明 ,60Coγ射线诱发BEP2D细胞内活性氧 (ROS)水平和OH8dG含量均显著增高 ,并有良好的剂量效应关系。进一步分析显示 ,60 Coγ射线照射诱发BEP2D细胞内ROS增高与DNA氧化损伤产物OH8dG含量呈明显正相关 。 展开更多
关键词 ^60COΓ射线照射 人支气管上皮细胞 活性氧 DNA氧化损伤 8-羟基脱氧鸟嘌呤 肿瘤 病因学
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呼吸系统药物
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 CAS 2002年第11期191-191,共1页
0243602 福莫特罗和布地奈德对由人支气管上皮细胞触发的GM-CSF和IL-8分泌的影响/Korn S H//Eur Respir J.-2001,17(6).-1071~1077 医科图0243603 氟替卡松和沙丁胺醇下调成纤维细胞增生和ICAM-1或H-CAM表达的体外试验/Silvestri M//Eu... 0243602 福莫特罗和布地奈德对由人支气管上皮细胞触发的GM-CSF和IL-8分泌的影响/Korn S H//Eur Respir J.-2001,17(6).-1071~1077 医科图0243603 氟替卡松和沙丁胺醇下调成纤维细胞增生和ICAM-1或H-CAM表达的体外试验/Silvestri M//Eur Respir J.-2001,18(1).-139~145 展开更多
关键词 人支气管上皮细胞 布地奈德 福莫特罗 成纤维细胞 沙丁胺醇 氟替卡松 呼吸系统 医科 体外试验 触发
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放射医学
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 CAS 2002年第11期180-185,共6页
0243389 非洲放射学家呼唤高标准/Siringi S//Lancet.-2001,358(9283).-736医科图0243390 热诱导的XRCC5(Ku80)在非耐受的和温度耐受的细胞中的集聚/Beck BD//Radiat Res.-2001,156(6).
关键词 医科 射频照射 电离辐射 辐射诱导 人淋巴细胞 人支气管上皮细胞 染色体畸变 体内试验 人成纤维细胞 射线
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分子免疫学
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 CAS 2002年第5期36-37,共2页
0216418 细胞因子领域与免疫应答的两极分化/Kourilsky P∥Trends Immunol.-2001,22(9).-502~509 北大图0216419 gp 130结合细胞因子上Broncho-Vaxom(OM-85 BV)的清晰的效应/RothM∥Thorax.-2000,55(8).
关键词 细胞因子 免疫应答 两极分化 医科 北大 分子免疫学 自身抗体 基因 效应 人支气管上皮细胞
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抗肿瘤、抗癌药物
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 2000年第11期199-199,共1页
0043336 周期素 D1蛋白溶解:一种维甲酸化学预防信号在正常永生化及转化的人支气管上皮细胞中的表达/Boyle J O//JNat Cancer Inst.-1999,91(4).
关键词 维甲酸 人支气管上皮细胞 化学预防 永生化 周期素 抗癌药物 抗肿瘤 溶解 蛋白 信号
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呼吸系统药物
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 1998年第1期188-189,共2页
9803789 H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>
关键词 肺泡巨噬细胞 呼吸系统 豚鼠 收缩力 人支气管上皮细胞 肺纤维化 免疫组织化学 钾通道开放剂 不同治疗方案 培养
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