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新型人工miRNA表达框架的构建及其有效性验证被引量：2: 1; 作者徐慧范张玲 +2 位作者张旺杨伦宇彭剑雄《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期939-943,共5页; 目的构建针对EGFP基因的人工miRNA表达框架并验证其有效性。方法用融合PCR技术在体外构建针对EGFP基因的人工miRNA表达框架。经测序比对后,以该表达框架与报告基因质粒p EGFP-N2分别共转染人肝癌细胞系Hep G2、人宫颈癌细胞系He La和人... 展开更多; 关键词人工mirna表达框架 EGFP基因 HEP G2细胞 HE La细胞 A549细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于miRNA-30的RNAi表达框架的构建及其有效性验证被引量：1: 2; 作者李亚红赵丹丹 +3 位作者李思佳覃淇邱彤彤彭剑雄《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第8期625-629,共5页; 目的构建基于人源性miRNA-30,针对EGFP基因的RNAi表达框架并验证其有效性。方法融合PCR构建RNAi表达框架,经凝胶电泳、测序比对及二级结构预测后,将该表达框架与p EGFP-N2质粒共转染A549、HCT116及HEK-293细胞,48 h后倒置荧光显微镜观察... 展开更多; 关键词 RNAI 人工mirna表达框架 A549细胞 HCT116细胞 HEK-293细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

麻竹DlSCL6基因amiRNA前体合成及表达载体构建: 3; 作者陈东亮孙化雨 +2 位作者李利超赵韩生高志民《世界竹藤通讯》 2016年第2期1-5,共5页; Web MicroRNA Designer(WMD3)是一个专门应用于植物人工miRNA设计和前体序列设计的专业网站,其中利用重叠PCR法合成amiRNA前体序列,涉及多个PCR和纯化回收过程,步骤繁琐,周期较长。本研究利用WMD3设计了麻竹转录因子DlSCL6基因的人工mi... 展开更多; 关键词麻竹人工mirna 重叠PCR 表达载体构建; 在线阅读下载PDF 职称材料

小RNA重组表达质粒转入猪体内环境释放安全性研究概况被引量：1: 4; 作者寇建平孙亚妮 +1 位作者赵钦周恩民《动物医学进展》北大核心 2015年第12期161-164,共4页; 人工小RNA(MicroRNA,miRNA)是根据内源miRNA的生成途径人工合成的miRNA,可以模拟内源miRNA的作用方式与靶mRNA碱基互配指导靶mRNA的降解或抑制其翻译,从而对基因表达进行转录后负调控。将人工miRNA转入动物体内调控目的基因表达,已在转... 展开更多; 关键词重组表达质粒基因水平转移基因组整合人工mirna; 在线阅读下载PDF 职称材料

知识表达及其理论被引量：1: 5; 作者张令振《应用心理学》 CSSCI 1989年第1期49-53,共5页; 知识表达是认知心理学和人工智能研究中倍受重视的一个问题,认知心理学研究怎样把知识表征在人的大脑中,而人工智能研究则关心怎样把知识表达在系统的知识库中。本文主要介了绍人工智能研究中知识表达的三种形式(语义网络、产生式和框... 展开更多; 关键词知识表达产生式系统语义网络智能研究框架理论认知心理学知识表征人工智能知识库心理学研究; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新型人工miRNA表达框架的构建及其有效性验证被引量：2: 1; 作者徐慧范张玲张旺杨伦宇彭剑雄; 机构中南大学湘雅医学院医学检验系; 出处《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期939-943,共5页; 基金中南大学本科生自由探索计划项目(2282014bks193); 文摘目的构建针对EGFP基因的人工miRNA表达框架并验证其有效性。方法用融合PCR技术在体外构建针对EGFP基因的人工miRNA表达框架。经测序比对后,以该表达框架与报告基因质粒p EGFP-N2分别共转染人肝癌细胞系Hep G2、人宫颈癌细胞系He La和人肺腺癌细胞系A549,48 h后用倒置荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况并用流式细胞仪定量检测其抑制效率。结果构建的人工miRNA表达框架经测序比对正确;共转染该表达框架和报告基因质粒p EGFP-N2后,倒置荧光显微镜观察结果显示,3种细胞中发出荧光的细胞数量减少,荧光强度明显降低。流式细胞术检测结果显示,Hep G2细胞、He La细胞和A549细胞中共转染组和单独转染组的细胞荧光表达率差异均有统计学意义(t分别为20.80、30.35和20.34,P均<0.01)。结论成功构建靶向EGFP的人工miRNA表达框架,且此表达框架能有效而特异地抑制EGFP蛋白在Hep G2细胞、He La细胞和肺癌A549细胞中的表达。; 关键词人工mirna表达框架 EGFP基因 HEP G2细胞 HE La细胞 A549细胞; Keywords expression cassettes of artificial mirna EGFP gene Hep G2 cells He La cells A549 cells; 分类号 R34 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于miRNA-30的RNAi表达框架的构建及其有效性验证被引量：1: 2; 作者李亚红赵丹丹李思佳覃淇邱彤彤彭剑雄; 机构中南大学湘雅医学院医学检验系; 出处《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第8期625-629,共5页; 基金中南大学研究生科研创新项目(2016zzts500) 中南大学本科生自由探索项目(201610533579); 文摘目的构建基于人源性miRNA-30,针对EGFP基因的RNAi表达框架并验证其有效性。方法融合PCR构建RNAi表达框架,经凝胶电泳、测序比对及二级结构预测后,将该表达框架与p EGFP-N2质粒共转染A549、HCT116及HEK-293细胞,48 h后倒置荧光显微镜观察EGFP的表达情况并用流式细胞仪检测平均荧光强度。结果凝胶电泳和测序比对均显示RNAi表达框架与设计的相符,二级结构预测显示,新型RNAi表达框架与人源性miRNA-30的二级结构高度相似;共转染该表达框架与p EGFP-N2质粒48 h后,倒置荧光显微镜观察结果显示,3种细胞的荧光强度均明显减弱,流式细胞仪检测结果显示,3种细胞中共转染组与单独转染组相比平均荧光强度的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论新型RNAi表达框架构建成功,且能有效干扰EGFP在A549,HCT116和HEK-293细胞中的表达。; 关键词 RNAI 人工mirna表达框架 A549细胞 HCT116细胞 HEK-293细胞; Keywords RNAi expression cassettes of artificial mirna A549 cells HCT116 cells HEK-293 cells; 分类号 R34 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名麻竹DlSCL6基因amiRNA前体合成及表达载体构建: 3; 作者陈东亮孙化雨李利超赵韩生高志民; 机构北京市农林科学研究院北京农业生物技术研究中心国际竹藤中心国家林业局竹藤科学与技术重点实验室; 出处《世界竹藤通讯》 2016年第2期1-5,共5页; 基金国家林业公益性行业科研专项经费项目(编号:201504106) "十二五"国家科技支撑计划专题(编号:2012BAD23B0504); 文摘 Web MicroRNA Designer(WMD3)是一个专门应用于植物人工miRNA设计和前体序列设计的专业网站,其中利用重叠PCR法合成amiRNA前体序列,涉及多个PCR和纯化回收过程,步骤繁琐,周期较长。本研究利用WMD3设计了麻竹转录因子DlSCL6基因的人工miRNA序列和其前体序列,采用改进的重叠PCR方法,快速克隆获得了该前体序列,并以改造的pCMABIA1301载体为框架,构建了该前体的植物表达载体,为进一步研究利用amiRNA调控SCL6基因的表达奠定了基础。; 关键词麻竹人工mirna 重叠PCR 表达载体构建; Keywords Dendrocalamus latiflorus amirna overlap PCR construction of expression vector; 分类号 S795.5 [农业科学—林木遗传育种]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小RNA重组表达质粒转入猪体内环境释放安全性研究概况被引量：1: 4; 作者寇建平孙亚妮赵钦周恩民; 机构农业部优质农产品开发服务中心西北农林科技大学动物医学院农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站; 出处《动物医学进展》北大核心 2015年第12期161-164,共4页; 基金农业部食品质量安全监管项目(转NMHCⅡ-A人工miRNA猪的安全评价); 文摘人工小RNA(MicroRNA,miRNA)是根据内源miRNA的生成途径人工合成的miRNA,可以模拟内源miRNA的作用方式与靶mRNA碱基互配指导靶mRNA的降解或抑制其翻译,从而对基因表达进行转录后负调控。将人工miRNA转入动物体内调控目的基因表达,已在转基因动物抗病育种方面得到广泛的研究,与此同时其环境释放导致的生物安全性问题也成为国际关注的重要问题。论文综述了以RNA干扰为基础的转人工miRNA抗猪蓝耳病猪在动物逃逸、环境释放以及与转入基因与宿主基因整合等方面对环境生物安全的影响,以期为猪蓝耳病NMHCⅡ-A转基因猪的进一步研究提供生物安全保障。; 关键词重组表达质粒基因水平转移基因组整合人工mirna; Keywords recombinant expression plasmid horizontal gene transfer gene integration artificial mirna; 分类号 S852.2 [农业科学—基础兽医学] Q788 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名知识表达及其理论被引量：1: 5; 作者张令振; 机构北京师范大学; 出处《应用心理学》 CSSCI 1989年第1期49-53,共5页; 文摘知识表达是认知心理学和人工智能研究中倍受重视的一个问题,认知心理学研究怎样把知识表征在人的大脑中,而人工智能研究则关心怎样把知识表达在系统的知识库中。本文主要介了绍人工智能研究中知识表达的三种形式(语义网络、产生式和框架),并介绍了有关的知识表达理论。; 关键词知识表达产生式系统语义网络智能研究框架理论认知心理学知识表征人工智能知识库心理学研究; 分类号 B84 [哲学宗教—心理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	新型人工miRNA表达框架的构建及其有效性验证	徐慧范张玲张旺杨伦宇彭剑雄	《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	基于miRNA-30的RNAi表达框架的构建及其有效性验证	李亚红赵丹丹李思佳覃淇邱彤彤彭剑雄	《临床检验杂志》 CAS CSCD	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	麻竹DlSCL6基因amiRNA前体合成及表达载体构建	陈东亮孙化雨李利超赵韩生高志民	《世界竹藤通讯》	2016	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	小RNA重组表达质粒转入猪体内环境释放安全性研究概况	寇建平孙亚妮赵钦周恩民	《动物医学进展》北大核心	2015	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	知识表达及其理论	张令振	《应用心理学》 CSSCI	1989	1	在线阅读下载PDF 职称材料