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人小细胞肺癌多药耐药细胞H446/CDDP基因组DNA甲基化状态的变化 被引量:4
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作者 郭芮伶 吴国明 +4 位作者 李海东 潘峰 李文碧 戢福云 钱桂生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第23期2533-2535,共3页
目的探讨基因组DNA甲基化状态与人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)H446/CDDP细胞获得性多药耐药的关系。方法分别提取人SCLC多药耐药细胞H446/CDDP及其亲代细胞H446的基因组DNA,应用甲基化敏感性随机引物PCR(MS-AP-PCR)方法检... 目的探讨基因组DNA甲基化状态与人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)H446/CDDP细胞获得性多药耐药的关系。方法分别提取人SCLC多药耐药细胞H446/CDDP及其亲代细胞H446的基因组DNA,应用甲基化敏感性随机引物PCR(MS-AP-PCR)方法检测其甲基化状态。结果 H446/CDDP细胞经酶解后的扩增谱带较H446细胞明显增多,且荧光强度较强,表明其基因组DNA甲基化水平较亲代细胞明显增高。结论 H446/CDDP细胞多药耐药性的获得可能与其基因组DNA甲基化水平增高有关。 展开更多
关键词 人小细胞肺癌 多药耐药 DNA甲基化 甲基化敏感性随机引物PCR法
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联合新型Bcl-2反义核酸与足叶乙苷抑制人小细胞肺癌细胞的增殖 被引量:5
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作者 林芸秀 吕联煌 +1 位作者 林振兴 陈英玉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期58-60,共3页
目的 研究一种新型Bcl 2反义寡核苷酸 F95 1在与足叶乙苷 (VP16 )联合使用时 ,对人小细胞肺癌细胞增殖的影响。方法 分别单独及联合应用F95 1、VP16于人小细胞肺癌细胞株NCI H4 4 6 ,通过MTT法检测细胞存活率 ,通过集落形成法检测集... 目的 研究一种新型Bcl 2反义寡核苷酸 F95 1在与足叶乙苷 (VP16 )联合使用时 ,对人小细胞肺癌细胞增殖的影响。方法 分别单独及联合应用F95 1、VP16于人小细胞肺癌细胞株NCI H4 4 6 ,通过MTT法检测细胞存活率 ,通过集落形成法检测集落生存率 ,按Welander法计算联合应用组的预测值 ,通过实测值与预测值的比较进行效应分析。结果 细胞存活率 (MTT法 )和集落生存率 (集落形成法 )均显示联合应用F95 1、VP16组的实测值明显低于预测值。结论 联合应用F95 1与VP16对人小细胞肺癌细胞的增殖有协同的抑制作用。 展开更多
关键词 F951(Bcl-2反义硫代磷酸寡核苷酸) 人小细胞肺癌 细胞增殖 协同效应
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抗人小细胞肺癌单抗2F7人-鼠嵌合Fab片段基因的构建和表达
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作者 林琳 鲁驰 +2 位作者 朱明洁 胡晶莹 赵新泰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期173-176,共4页
目的 :通过基因工程抗体改造获得具有与人小细胞肺癌有特异性反应的人 鼠嵌合抗体 2F7Fab片段。方法 :采用RT PCR技术从抗人小细胞肺癌单克隆抗体 2F7杂交瘤中克隆该抗体的重、轻链可变区基因 ,将 2F7单抗的重、轻链可变区基因装入带... 目的 :通过基因工程抗体改造获得具有与人小细胞肺癌有特异性反应的人 鼠嵌合抗体 2F7Fab片段。方法 :采用RT PCR技术从抗人小细胞肺癌单克隆抗体 2F7杂交瘤中克隆该抗体的重、轻链可变区基因 ,将 2F7单抗的重、轻链可变区基因装入带有人恒定区基因的表达载体pSW1 Fab中 ,构建得到pSW1 2F7Fab ,转化受体菌E .coilXL1 Blue ,IPTG诱导表达 ,经Westernblot和ELISA鉴定表达蛋白的活性。结果 :从抗人小细胞肺癌单克隆抗体 2F7杂交瘤中克隆获得了抗体重、轻链可变区基因。测序证实 2F7单抗的重链 (VH)可变区基因全长 36 2bp ,编码 12 0个氨基酸 ;轻链 (VL)可变区基因全长 319bp ,编码10 5个氨基酸。构建的 2F7人 鼠嵌合Fab表达载体诱导后获得了目的蛋白的表达 ,主要分泌在菌液的上清中 ,表达量较高且稳定 ,具有与NCI H1 2 8细胞特异性结合的活性。结论 :构建和表达了抗人小细胞肺癌单抗 2F7人 鼠嵌合Fab片段 ,表达产物具有与抗原结合的特异性 ,为进一步研究和应用打下了基础。 展开更多
关键词 人小细胞肺癌单抗 人-鼠嵌合抗体 FAB片段 基因工程
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人小细胞肺癌细胞H446 Snail基因表达及其在顺铂耐药中的作用 被引量:6
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作者 况里杉 周向东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1197-1199,共3页
目的观察锌指转录因子snail在耐顺铂(cisplatin,CDDP)的人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)H446/CDDP细胞中的表达情况,探讨snail表达在人SCLC顺铂耐药中的作用。方法培养H446细胞系和H446/CDDP细胞系,采用MTT法检测H446/CDDP... 目的观察锌指转录因子snail在耐顺铂(cisplatin,CDDP)的人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)H446/CDDP细胞中的表达情况,探讨snail表达在人SCLC顺铂耐药中的作用。方法培养H446细胞系和H446/CDDP细胞系,采用MTT法检测H446/CDDP的耐药指数;分别提取人SCLC顺铂耐药细胞H446/CDDP及其亲代细胞H446的mRNA及总蛋白,应用sybgreen实时荧光RT-PCR、Western blot方法检测snail mRNA及蛋白表达水平。结果 H446/CDDP细胞snail蛋白及mRNA表达水平较H446细胞显著性升高(P<0.05)。结论 SCLC的顺铂耐药性可能与snail表达水平增高有关。 展开更多
关键词 人小细胞肺癌 顺铂耐药 SNAIL real time RT-PCR WESTERN BLOT
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