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小干扰RNA沉默hPTTG1基因对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:7
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作者 刘洁 沈文静 +2 位作者 卢瑶 赵恂 宋敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期102-107,共6页
目的:利用RNA干扰技术沉默人垂体瘤转化基因1(hPTTG1)表达,观察卵巢癌细胞增殖能力和细胞凋亡的改变并探讨分子机制。方法:化学合成靶定hPTTG1的小干扰RNA(siRNA)转染体外培养的A2780细胞,RT-PCR和Western blotting检测hPTTG1及c-myc表... 目的:利用RNA干扰技术沉默人垂体瘤转化基因1(hPTTG1)表达,观察卵巢癌细胞增殖能力和细胞凋亡的改变并探讨分子机制。方法:化学合成靶定hPTTG1的小干扰RNA(siRNA)转染体外培养的A2780细胞,RT-PCR和Western blotting检测hPTTG1及c-myc表达水平;MTT法和[3H]-TdR掺入实验检测hPTTG1对细胞增殖的影响;annexin V/PI染色流式细胞术和TUNEL法测定各组细胞凋亡情况。结果:hPTTG1siRNA转染组hPTTG1mRNA和蛋白表达下降,抑制率分别为70.5%±3.9%和63.8%±4.5%;转染hPTTG1siRNA 24 h细胞吸光度值开始下降,48 h抑制效果最明显,抑制率为42.9%±5.2%;转染hPTTG1siRNA后细胞[3H]-TdR放射性计数明显低于空白组和阴性对照组;hPTTG1siRNA干扰组细胞存活率下降,细胞凋亡率和坏死率均增加;TUNEL染色分析结果可见hPTTG1siRNA干扰组凋亡指数明显高于空白组和阴性对照组;hPTTG1干扰后c-mycmRNA和蛋白表达均下调。结论:hPTTG1siRNA通过下调c-myc表达抑制A2780细胞增殖,诱导细胞凋亡,hPTTG1可作为卵巢癌基因治疗的候选靶点。 展开更多
关键词 基因 人垂体瘤转化 卵巢肿廇 细胞增殖 细胞凋亡 c-myc
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