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人呼吸道合胞病毒转录调节基因转染肺腺癌细胞系的研究
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作者 张利群 陈杭薇 +3 位作者 王四海 辛庆红 杜玉国 尤兰华 《山东医药》 CAS 北大核心 2005年第12期15-16,共2页
目的 获得稳定表达人呼吸道合胞病毒(h RSV) M2 - 1基因的人肺腺癌细胞系。方法 通过基因重组法构建h RSV M2 - 1基因真核表达载体,用脂质体将其转染人肺腺癌PAa和A5 4 9细胞,经G4 18筛选获得阳性表达细胞株,并用逆转录-聚合酶链反应(... 目的 获得稳定表达人呼吸道合胞病毒(h RSV) M2 - 1基因的人肺腺癌细胞系。方法 通过基因重组法构建h RSV M2 - 1基因真核表达载体,用脂质体将其转染人肺腺癌PAa和A5 4 9细胞,经G4 18筛选获得阳性表达细胞株,并用逆转录-聚合酶链反应(RT- PCR)和Western Blot进行验证。结果 得到了约6 5 0 bp的基因插入片段,DNA测序表明该基因高度保守。筛选出了稳定高量表达M2 - 1基因的PAa和A5 4 9细胞,并被证实有M2 - 1蛋白表达。结论 获得了稳定表达h RSV M2 - 1蛋白的PAa和A5 4 展开更多
关键词 人呼吸道合胞病毒 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 基因转染 转录调节 基因真核表达载体 M2-1基因 人肺腺癌细胞系 Western A549细胞株 HRSV 稳定表达 DNA测序 PAa 基因重组 阳性表达 插入片段 Blot 蛋白表达 脂质体 筛选
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