期刊文献+
共找到3篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
人原始生殖细胞分离培养的初步研究 被引量:4
1
作者 撒亚莲 黄锦桃 李海标 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期325-328,共4页
[目的]探讨分离培养人原始生殖细胞的最佳条件。[方法]用胰蛋白酶消化5~9周人流组织中的人胚生殖嵴,获取人原始生殖细胞。以小鼠胚胎成纤维细胞作饲养层,在高糖DMEM培养基中添加10μmol/L福司克林(forskolin)和5~μg/L碱性成纤维细胞... [目的]探讨分离培养人原始生殖细胞的最佳条件。[方法]用胰蛋白酶消化5~9周人流组织中的人胚生殖嵴,获取人原始生殖细胞。以小鼠胚胎成纤维细胞作饲养层,在高糖DMEM培养基中添加10μmol/L福司克林(forskolin)和5~μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的培养液中培养、传代,并对子代细胞进行碱性磷酸酶活性检测和体外分化实验。[结果]原代培养时形成许多大小不等,形态各异的由人原始生殖细胞组成的集落,约5~7d传代。传代后,集落生长,变大。细胞培养到第七代,检测碱性磷酸酶染色为强阳性,体外分化实验有拟胚体形成。[结论]人原始生殖细胞可以用胰蛋白酶消化分离培养。用高糖DMEM培养基,添加forskolin和bFGF有利于人原始生殖细胞增殖。体外分化实验初步证实人原始生殖细胞具有多向分化潜能。 展开更多
关键词 人原始生殖细胞 细胞培养 胰蛋白酶消化法 福司克林 碱性成纤维细胞生长因子 高糖DMEM培养基
在线阅读 下载PDF
人原始生殖细胞的分离和培养 被引量:1
2
作者 冷少华 李彩霞 +1 位作者 梁志清 王凤英 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期679-683,共5页
目的探讨体外分离培养人原始生殖细胞的条件和方法。方法分离、培养2~3个月人胚胎的成纤维细胞,经60Co照射后作为饲养层;从5~9周人胚胎的生殖嵴和肠背系膜组织中分离原始生殖细胞,培养在含有bFGF、LIF和Forskolin的人胚胎成纤维细胞... 目的探讨体外分离培养人原始生殖细胞的条件和方法。方法分离、培养2~3个月人胚胎的成纤维细胞,经60Co照射后作为饲养层;从5~9周人胚胎的生殖嵴和肠背系膜组织中分离原始生殖细胞,培养在含有bFGF、LIF和Forskolin的人胚胎成纤维细胞饲养层上;同时采用免疫细胞化学和RT-PCR方法检测人原始生殖细胞阶段特异性胚胎抗原SSEA-1、SSEA-4以及特异性基因Oct-4、Ifitm-3、stella、Mvh、DAZL的表达,并进行类胚体培养。结果分离的人原始生殖细胞在饲养层上可以增殖形成典型的鸟巢状集落;细胞染色体均为正常的二倍体核型;阶段特异性胚胎抗原SSEA-1、SSEA-4表达阳性,同时检测到生殖干细胞特异性基因Oct-4、Ifitm-3、stella、Mvh、DAZL表达。人原始生殖细胞在悬滴培养时能够形成类胚体,表明其具有多项分化潜能。结论用人胚胎成纤维细胞作为饲养层进行体外培养人胚胎生殖嵴和肠背系膜组织,分离的原始生殖细胞形成EG细胞集落,初步鉴定为人胚胎生殖细胞。 展开更多
关键词 人原始生殖细胞 细胞培养 胚胎生殖细胞
在线阅读 下载PDF
人原始生殖细胞的分离和体外培养 被引量:2
3
作者 劳滔滔 陆永良 +3 位作者 戴利成 姚行 张念慈 张铭1 《浙江大学学报(理学版)》 CAS CSCD 2004年第5期575-579,共5页
从 4~ 10周龄药物流产胚胎的生殖嵴和肠系膜组织中分离原始生殖细胞 (primordial germ cells,PGCs) ,培养在添加人重组白血病抑制因子 (rh L IF)、人重组碱性成纤维细胞生长因子 (rh b FGF)和 Forskolin的小鼠饲养层细胞上 .经过 4~ 7... 从 4~ 10周龄药物流产胚胎的生殖嵴和肠系膜组织中分离原始生殖细胞 (primordial germ cells,PGCs) ,培养在添加人重组白血病抑制因子 (rh L IF)、人重组碱性成纤维细胞生长因子 (rh b FGF)和 Forskolin的小鼠饲养层细胞上 .经过 4~ 7d培养 ,PGCs形成典型的鸟巢状集落 .集落在传代过程中保持碱性磷酸酶活性 ,且胚胎阶段性特异抗原 1(SSEA- 1)、胚胎阶段性特异抗原 3(SSEA- 3)免疫荧光染色呈阳性 .具有分化潜能的 PGCs能在体外连续传代培养 12代 .结果表明从药物流产胚胎中分离的人类 PGCs可以在体外培养成为具有分化潜能的多能性干细胞 . 展开更多
关键词 人原始生殖细胞 体外培养 多能干细胞
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部