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人原始生殖细胞分离培养的初步研究
被引量:
4
1
作者
撒亚莲
黄锦桃
李海标
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第4期325-328,共4页
[目的]探讨分离培养人原始生殖细胞的最佳条件。[方法]用胰蛋白酶消化5~9周人流组织中的人胚生殖嵴,获取人原始生殖细胞。以小鼠胚胎成纤维细胞作饲养层,在高糖DMEM培养基中添加10μmol/L福司克林(forskolin)和5~μg/L碱性成纤维细胞...
[目的]探讨分离培养人原始生殖细胞的最佳条件。[方法]用胰蛋白酶消化5~9周人流组织中的人胚生殖嵴,获取人原始生殖细胞。以小鼠胚胎成纤维细胞作饲养层,在高糖DMEM培养基中添加10μmol/L福司克林(forskolin)和5~μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的培养液中培养、传代,并对子代细胞进行碱性磷酸酶活性检测和体外分化实验。[结果]原代培养时形成许多大小不等,形态各异的由人原始生殖细胞组成的集落,约5~7d传代。传代后,集落生长,变大。细胞培养到第七代,检测碱性磷酸酶染色为强阳性,体外分化实验有拟胚体形成。[结论]人原始生殖细胞可以用胰蛋白酶消化分离培养。用高糖DMEM培养基,添加forskolin和bFGF有利于人原始生殖细胞增殖。体外分化实验初步证实人原始生殖细胞具有多向分化潜能。
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关键词
人原始生殖细胞
细胞
培养
胰蛋白酶消化法
福司克林
碱性成纤维
细胞
生长因子
高糖DMEM培养基
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职称材料
人原始生殖细胞的分离和培养
被引量:
1
2
作者
冷少华
李彩霞
+1 位作者
梁志清
王凤英
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期679-683,共5页
目的探讨体外分离培养人原始生殖细胞的条件和方法。方法分离、培养2~3个月人胚胎的成纤维细胞,经60Co照射后作为饲养层;从5~9周人胚胎的生殖嵴和肠背系膜组织中分离原始生殖细胞,培养在含有bFGF、LIF和Forskolin的人胚胎成纤维细胞...
目的探讨体外分离培养人原始生殖细胞的条件和方法。方法分离、培养2~3个月人胚胎的成纤维细胞,经60Co照射后作为饲养层;从5~9周人胚胎的生殖嵴和肠背系膜组织中分离原始生殖细胞,培养在含有bFGF、LIF和Forskolin的人胚胎成纤维细胞饲养层上;同时采用免疫细胞化学和RT-PCR方法检测人原始生殖细胞阶段特异性胚胎抗原SSEA-1、SSEA-4以及特异性基因Oct-4、Ifitm-3、stella、Mvh、DAZL的表达,并进行类胚体培养。结果分离的人原始生殖细胞在饲养层上可以增殖形成典型的鸟巢状集落;细胞染色体均为正常的二倍体核型;阶段特异性胚胎抗原SSEA-1、SSEA-4表达阳性,同时检测到生殖干细胞特异性基因Oct-4、Ifitm-3、stella、Mvh、DAZL表达。人原始生殖细胞在悬滴培养时能够形成类胚体,表明其具有多项分化潜能。结论用人胚胎成纤维细胞作为饲养层进行体外培养人胚胎生殖嵴和肠背系膜组织,分离的原始生殖细胞形成EG细胞集落,初步鉴定为人胚胎生殖细胞。
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关键词
人原始生殖细胞
细胞
培养
胚胎
生殖细胞
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职称材料
人原始生殖细胞的分离和体外培养
被引量:
2
3
作者
劳滔滔
陆永良
+3 位作者
戴利成
姚行
张念慈
张铭1
《浙江大学学报(理学版)》
CAS
CSCD
2004年第5期575-579,共5页
从 4~ 10周龄药物流产胚胎的生殖嵴和肠系膜组织中分离原始生殖细胞 (primordial germ cells,PGCs) ,培养在添加人重组白血病抑制因子 (rh L IF)、人重组碱性成纤维细胞生长因子 (rh b FGF)和 Forskolin的小鼠饲养层细胞上 .经过 4~ 7...
从 4~ 10周龄药物流产胚胎的生殖嵴和肠系膜组织中分离原始生殖细胞 (primordial germ cells,PGCs) ,培养在添加人重组白血病抑制因子 (rh L IF)、人重组碱性成纤维细胞生长因子 (rh b FGF)和 Forskolin的小鼠饲养层细胞上 .经过 4~ 7d培养 ,PGCs形成典型的鸟巢状集落 .集落在传代过程中保持碱性磷酸酶活性 ,且胚胎阶段性特异抗原 1(SSEA- 1)、胚胎阶段性特异抗原 3(SSEA- 3)免疫荧光染色呈阳性 .具有分化潜能的 PGCs能在体外连续传代培养 12代 .结果表明从药物流产胚胎中分离的人类 PGCs可以在体外培养成为具有分化潜能的多能性干细胞 .
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关键词
人原始生殖细胞
体外培养
多能干
细胞
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职称材料
题名
人原始生殖细胞分离培养的初步研究
被引量:
4
1
作者
撒亚莲
黄锦桃
李海标
机构
中山大学中山医学院组织胚胎学教研室
出处
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第4期325-328,共4页
基金
国家重点基础研究课题(973)基金(G1999054301-2)
文摘
[目的]探讨分离培养人原始生殖细胞的最佳条件。[方法]用胰蛋白酶消化5~9周人流组织中的人胚生殖嵴,获取人原始生殖细胞。以小鼠胚胎成纤维细胞作饲养层,在高糖DMEM培养基中添加10μmol/L福司克林(forskolin)和5~μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的培养液中培养、传代,并对子代细胞进行碱性磷酸酶活性检测和体外分化实验。[结果]原代培养时形成许多大小不等,形态各异的由人原始生殖细胞组成的集落,约5~7d传代。传代后,集落生长,变大。细胞培养到第七代,检测碱性磷酸酶染色为强阳性,体外分化实验有拟胚体形成。[结论]人原始生殖细胞可以用胰蛋白酶消化分离培养。用高糖DMEM培养基,添加forskolin和bFGF有利于人原始生殖细胞增殖。体外分化实验初步证实人原始生殖细胞具有多向分化潜能。
关键词
人原始生殖细胞
细胞
培养
胰蛋白酶消化法
福司克林
碱性成纤维
细胞
生长因子
高糖DMEM培养基
Keywords
germ cell, primordial
cell culture
cell differentiation
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
在线阅读
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职称材料
题名
人原始生殖细胞的分离和培养
被引量:
1
2
作者
冷少华
李彩霞
梁志清
王凤英
机构
第三军医大学西南医院妇产科
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期679-683,共5页
基金
第三军医大学西南医院优生优育技术中心专项基金(2005)~~
文摘
目的探讨体外分离培养人原始生殖细胞的条件和方法。方法分离、培养2~3个月人胚胎的成纤维细胞,经60Co照射后作为饲养层;从5~9周人胚胎的生殖嵴和肠背系膜组织中分离原始生殖细胞,培养在含有bFGF、LIF和Forskolin的人胚胎成纤维细胞饲养层上;同时采用免疫细胞化学和RT-PCR方法检测人原始生殖细胞阶段特异性胚胎抗原SSEA-1、SSEA-4以及特异性基因Oct-4、Ifitm-3、stella、Mvh、DAZL的表达,并进行类胚体培养。结果分离的人原始生殖细胞在饲养层上可以增殖形成典型的鸟巢状集落;细胞染色体均为正常的二倍体核型;阶段特异性胚胎抗原SSEA-1、SSEA-4表达阳性,同时检测到生殖干细胞特异性基因Oct-4、Ifitm-3、stella、Mvh、DAZL表达。人原始生殖细胞在悬滴培养时能够形成类胚体,表明其具有多项分化潜能。结论用人胚胎成纤维细胞作为饲养层进行体外培养人胚胎生殖嵴和肠背系膜组织,分离的原始生殖细胞形成EG细胞集落,初步鉴定为人胚胎生殖细胞。
关键词
人原始生殖细胞
细胞
培养
胚胎
生殖细胞
Keywords
human primordial germ cells
cell culture
embryonic germ cells
分类号
R321.1 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R329.33 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
在线阅读
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职称材料
题名
人原始生殖细胞的分离和体外培养
被引量:
2
3
作者
劳滔滔
陆永良
戴利成
姚行
张念慈
张铭1
机构
浙江大学生命科学学院
湖州市中心医院
出处
《浙江大学学报(理学版)》
CAS
CSCD
2004年第5期575-579,共5页
基金
浙江省重大科技项目资助 ( J3 0 2 0 3 ) .
文摘
从 4~ 10周龄药物流产胚胎的生殖嵴和肠系膜组织中分离原始生殖细胞 (primordial germ cells,PGCs) ,培养在添加人重组白血病抑制因子 (rh L IF)、人重组碱性成纤维细胞生长因子 (rh b FGF)和 Forskolin的小鼠饲养层细胞上 .经过 4~ 7d培养 ,PGCs形成典型的鸟巢状集落 .集落在传代过程中保持碱性磷酸酶活性 ,且胚胎阶段性特异抗原 1(SSEA- 1)、胚胎阶段性特异抗原 3(SSEA- 3)免疫荧光染色呈阳性 .具有分化潜能的 PGCs能在体外连续传代培养 12代 .结果表明从药物流产胚胎中分离的人类 PGCs可以在体外培养成为具有分化潜能的多能性干细胞 .
关键词
人原始生殖细胞
体外培养
多能干
细胞
Keywords
human primordial germ cells (PGCs)
pluripotent stem cell
in vitro culture
分类号
R321.33 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R321.1 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人原始生殖细胞分离培养的初步研究
撒亚莲
黄锦桃
李海标
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人原始生殖细胞的分离和培养
冷少华
李彩霞
梁志清
王凤英
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
人原始生殖细胞的分离和体外培养
劳滔滔
陆永良
戴利成
姚行
张念慈
张铭1
《浙江大学学报(理学版)》
CAS
CSCD
2004
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
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