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题名两种HSV-1及猴B病毒相关抗体测定方法的比较
被引量：2
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作者
乔红伟
佟巍
蒋虹
丛喆
王卫
魏强
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机构
中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所
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出处
《中国比较医学杂志》
CAS
2010年第3期57-60,87,共5页
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基金
中央级公益性科研院所级本科研业务费项目,项目号:DWS200708
科技部基础专项重点项目,项目号:2002DEA20023
科技部条件基础平台专项重点项目,项目号:2003DIA7J033
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文摘
目的以人单纯疱疹病毒（HSV-1）做为抗原,利用空斑法和IFA法比较猴BV和人HSV-1阳性血清两种不同血清的中和能力的差异,建立一种实用、准确、可靠的病毒毒力的检测方法。方法首先,将HSV-1病毒悬液作连续的10倍稀释,取1 mL接种于已经长成单层的Vero-E6细胞上,用1%甲基纤维素覆盖,待其出现蚀斑后计数,算出病毒悬液中每毫升所含蚀斑单位,即滴定出HSV-1的TC ID50。同时,用免疫荧光方法（IFA）对猴和人疱疹阳性血清进行滴定,得到其血清的效价。其次,用滴定出的病毒液分别与两种阳性血清体外中和后,接种到单层的Vero-E6细胞上,用1%甲基纤维素覆盖,待其出现蚀斑后计数。最后,计算出其蚀斑减少率。结果用1%甲基纤维素作覆盖层的蚀斑数量平均为10-5PFU,能形成115-116个/mL蚀斑,形状呈黍米大小的规则圆形,其蚀斑边缘清晰。IFA滴定的人HSV-1阳性血清与猴BV阳性血清的中和抗体均为1∶80。人HSV-1和猴BV两种阳性血清的空斑减少率均为100%。结论确定了利用1%甲基纤维素做为覆盖层可得到清晰可靠的蚀斑,由此方法检测到用人HSV-1可以代替猴B病毒,筛查猴B病毒抗体。且为将来进行药物筛选和中和实验中利用病毒空斑法建立方便、可靠的方法。
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关键词
猕猴疱疹病毒1型
人单纯疱疹病毒ⅰ型
空斑减少
免疫荧光
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Keywords
Ceropithecine Herpesvirus type 1 （BV）
Herpes simplex virus type 1 （ HSV-1 ）
Plaque reduction
Immunofluoresence assay（IFA）
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分类号
R373
[医药卫生—病原生物学]
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