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人前列腺癌细胞系PC-3中PTI-1 cDNA的克隆及序列分析 被引量:1
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作者 付振虹 王禾 +4 位作者 许彦鸣 武国军 袁建林 王成济 杨安钢 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期323-326,共4页
为获取人前列腺癌诱导基因家族新成员 ,以人前列腺癌细胞系PC 3的总RNA为模板 ,用RT PCR方法扩增人前列腺癌诱导基因 1(PTI 1) ,将其亚克隆至克隆载体pUC19,进行测序 .将克隆得到的PTI 1基因片段与国外报道的人PTI 1基因编码区cDNA同源... 为获取人前列腺癌诱导基因家族新成员 ,以人前列腺癌细胞系PC 3的总RNA为模板 ,用RT PCR方法扩增人前列腺癌诱导基因 1(PTI 1) ,将其亚克隆至克隆载体pUC19,进行测序 .将克隆得到的PTI 1基因片段与国外报道的人PTI 1基因编码区cDNA同源性为 99.3% ,但第 72 6、74 6、116 7、12 70、132 6、144 9、16 94和 16 95位碱基分别由A、A、C、C、A、A、T和C替代了文献中的C、C、G、G、G、C、C和T .其中 6个碱基的不同 ,导致了第 36、183、2 17、2 36、2 77和 35 9位密码子代表的氨基酸分别由Lys替代Gln ,Arg替代Gly ,Ala替代Gly ,Ser替代Gly ,Thr替代Pro和Arg替代Cys .将所获得的基因在GenBank登录 ,登录号为AF3974 0 3.结果提示 ,获得了PTI 1家族新成员 ,并且与EF 1α分子的同源性较已报道的PTI 1高 . 展开更多
关键词 人前列腺癌细胞 PC-3 PTI-1 CDNA 克隆 序列分析
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人高转移性和低转移性前列腺癌细胞株荧光差异凝胶电泳图像分析
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作者 李群 李一雷 +5 位作者 常明 杨新宇 王志新 梅红 夏阳 李玉林 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期343-346,共4页
目的:比较人高转移性前列腺癌细胞株(PC-3M)和人低转移性前列腺癌细胞株(PC-3)间差异表达的蛋白质,拟发现早期诊断和逆转前列腺癌转移的分子标志物。方法:应用差异凝胶电泳(DIGE),分离PC-3M和PC-3细胞株的总蛋白,用图像分析软件比较分... 目的:比较人高转移性前列腺癌细胞株(PC-3M)和人低转移性前列腺癌细胞株(PC-3)间差异表达的蛋白质,拟发现早期诊断和逆转前列腺癌转移的分子标志物。方法:应用差异凝胶电泳(DIGE),分离PC-3M和PC-3细胞株的总蛋白,用图像分析软件比较分析并识别细胞间的差异表达蛋白质。结果:应用DIGE进行分离后,成功地获得了蛋白质组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)成功鉴定出11种蛋白质,其中9个蛋白质点仅在PC-3中有表达,2个蛋白质点仅在PC-3M中有表达。结论:人高、低转移前列腺癌细胞株的蛋白质组表达存在明显差异,这些差异蛋白质有可能为进一步发现前列腺癌转移相关分子和阐明前列腺癌侵袭转移的分子机制提供实验证据。 展开更多
关键词 蛋白质组 差异凝胶电泳 人前列腺癌细胞 差异表达
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人前列腺癌多药耐药细胞系的建立 被引量:5
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作者 潘玉琢 赵燕颖 +1 位作者 赵雪俭 李扬 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期651-654,F0002,共5页
目的:建立人前列腺癌多药耐药细胞系。方法:以顺铂为诱导药物,人前列腺癌细胞PC3M为诱导对象,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人前列腺癌多药耐药细胞系PC3M/CDDP;MTT法检测药物敏感性,免疫细胞化学法检测P-糖蛋白(P... 目的:建立人前列腺癌多药耐药细胞系。方法:以顺铂为诱导药物,人前列腺癌细胞PC3M为诱导对象,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人前列腺癌多药耐药细胞系PC3M/CDDP;MTT法检测药物敏感性,免疫细胞化学法检测P-糖蛋白(P-gP)、多药耐药相关蛋白(MRP)的表达。结果:经顺铂诱导建立的人前列腺癌细胞系PC3M/CDDP对顺铂、丝裂霉素、阿霉素、5-氟尿嘧啶、长春新碱等药物的50%抑制浓度(IC50)分别为(0.603±0.102)、(0.201±0.056)、(0.267±0.067)、(1.676±0.321)和(0.657±0.227)mg·L-1,与PC3M细胞系比较差异有显著性(P<0.05);免疫细胞化学染色结果显示,PC3M/CDDP细胞系MRP、P-gP表达强度明显大于PC3M细胞系(P<0.05);PC3M/CDDP细胞系的细胞倍增时间为40.5h,与PC3M细胞系(48.6h)比较差异无显著性(P>0.05)。结论:成功建立稳定的人前列腺癌PC3M/CDDP细胞系,该细胞系具有对多种抗癌药耐药及细胞增殖未受影响的特点,可应用于下游实验。 展开更多
关键词 人前列腺癌细胞 多药耐药相关蛋白质类 P-糖蛋白 抗肿瘤药
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siRNA抑制人高迁移率族蛋白1表达对前列腺癌PC-3增殖的影响 被引量:5
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作者 宋登新 陈安民 +4 位作者 郭风劲 谢柏臻 廖晖 祝文涛 王江 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期339-343,共5页
目的:研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制高迁移率族蛋白1(HMGB1)基因的表达对人前列腺癌细胞PC-3增殖的影响。方法:构建真核表达载体Pgenesil-1/HMGB1 siRNA,在脂质体Lipofectamine 2000的介导下转染前列腺癌PC-3细胞株,... 目的:研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制高迁移率族蛋白1(HMGB1)基因的表达对人前列腺癌细胞PC-3增殖的影响。方法:构建真核表达载体Pgenesil-1/HMGB1 siRNA,在脂质体Lipofectamine 2000的介导下转染前列腺癌PC-3细胞株,通过RT-PCR和Western Blot检测HMGB1的mRNA及蛋白质的变化;流式细胞仪检测细胞周期;噻唑蓝(MTT)检测细胞生长曲线。观察转染后PC-3细胞HMGB1基因表达和体外增殖活性的变化。结果:成功构建siRNA表达载体Pgenesil-1/HMGB1 siRNA,所获表达载体转染可使PC-3细胞HMGB1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),并能有效抑制PC-3增殖活性(P<0.05)。结论:应用siRNA干扰技术能有效的抑制HMGB1基因的表达,同时也可有效抑制癌细胞的体外增殖活性,为肿瘤的生物学治疗提供新思路。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白1 SIRNA 人前列腺癌细胞
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淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤模型小鼠雄激素受体信号通路的影响 被引量:10
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作者 何华琼 饶红 +1 位作者 郑君 陈德森 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2019年第4期641-646,共6页
目的:探讨淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤模型SCID小鼠雄激素受体信号通路的影响机制。方法:雄性SCID小鼠64只,均采用前列腺腺体背外侧包膜内注射人前列腺癌细胞株(LNCaP)悬液的方法构建前列腺癌原位移植瘤模型,然后分为移植瘤组、10 mg&... 目的:探讨淫羊藿苷对前列腺癌原位移植瘤模型SCID小鼠雄激素受体信号通路的影响机制。方法:雄性SCID小鼠64只,均采用前列腺腺体背外侧包膜内注射人前列腺癌细胞株(LNCaP)悬液的方法构建前列腺癌原位移植瘤模型,然后分为移植瘤组、10 mg·kg^-1组、40 mg·kg^-1组和80 mg·kg^-1组,除移植瘤组灌生理盐水对照外其它3组灌胃给予相应剂量的淫羊藿苷治疗5周。采用western blotting检测前列腺癌特异性抗原(PSA)和磷酸化AR(p-AR)表达,采用RT-PCR检测治疗前后前列腺瘤体雄激素受体(AR)和张力蛋白同源第10号染色体缺失的磷酸酶基因(PTEN)表达,采用流式细胞学方法检测前列腺体肿瘤瘤体LNCaP前列腺癌细胞在肿瘤瘤体增殖周期。结果:40mg·kg^-1组和80 mg·kg^-1组治疗后AR mRNA为(0.25±0.02,0.27±0.03)、pAR为(1.45±0.22,1.64±0.24),PSA为(0.31±0.02,0.38±0.05),两组PSA、p-AR和AR mRN治疗后相对表达量均低表达,而PTEN mRNA高表达(0.91±0.07,0.95±0.09),与治疗前和移植瘤组比较差异均有统计学意义(P <0.05)。两组治疗后抑瘤率分别为(41.59±4.51)%和(42.76±5.13)%,瘤质量为(86.34±9.07,84.73±7.58)mg、瘤体积为(11.83±0. 84,10.27±1.14)mm^2,均较同组治疗前和移植瘤组比较明显降低(P <0.05);两组治疗后G0/G1期比例降低[两组G0/G1分别为(34.97±4.52,35.03±3.97)%、且S期比例明显提高[两组S期比例分别为(39.59±5.03,40.27±4.82)%],与同组治疗前和移植瘤组比较差异均均有统计学意义(P <0.05)。结论:淫羊藿苷抑制LNCaP增殖的机制应与其抑制雄激素受体信号通路中AR的磷酸化并增强PTEN表达而将癌细胞增阻滞于S期有关。 展开更多
关键词 SCID小鼠 淫羊藿苷 人前列腺癌细胞 移植瘤 雄激素受体信号通路
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灵芝多糖对肿瘤细胞与内皮细胞相互作用的影响 被引量:47
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作者 李颖博 李宇华 +2 位作者 王瑞 林志彬 李学军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期250-253,共4页
目的研究灵芝多糖(GlPS)抗肿瘤作用及其机制。方法通过相差显微镜和间接免疫荧光的方法鉴定了人脐静脉内皮细胞(HUVECs)。采用MTT法检测GlPS对人前列腺癌细胞(PC-3M)和HUVECs增殖的影响。检测GlPS对PC-3M细胞与HUVECs粘附的影响。采用tr... 目的研究灵芝多糖(GlPS)抗肿瘤作用及其机制。方法通过相差显微镜和间接免疫荧光的方法鉴定了人脐静脉内皮细胞(HUVECs)。采用MTT法检测GlPS对人前列腺癌细胞(PC-3M)和HUVECs增殖的影响。检测GlPS对PC-3M细胞与HUVECs粘附的影响。采用transwell双层小室观察GlPS对PC-3M迁移穿过单层HUVECs的影响。结果GlPS对PC-3M无直接细胞毒作用,对HUVECs增殖无显著性作用。GlPS能够减少粘附和迁移穿过单层内皮细胞的肿瘤细胞数目。结论灵芝多糖通过抑制肿瘤细胞粘附并迁移穿过内皮细胞发挥其抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 灵芝多糖 PC-3M人前列腺癌细胞 人脐静脉内皮细胞 肿瘤细胞粘附 肿瘤细胞迁移
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猪A型塞内卡毒株CH-01-2015的溶瘤效果 被引量:1
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作者 李如意 高龙 +3 位作者 韩晓晖 龚文成 孙媛 马静云 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期40-46,共7页
为探究猪A型塞内卡毒株(SVA)CH-01-2015的溶瘤效果,本试验以SVA CH-01-2015为研究对象,在体外通过显微镜观察和细胞活性测定检测该毒株对前列腺癌细胞(PC-3)、非小细胞肺癌细胞(H1299、A549)、子宫内膜癌细胞(Ishikawa)、胶质瘤细胞(U2... 为探究猪A型塞内卡毒株(SVA)CH-01-2015的溶瘤效果,本试验以SVA CH-01-2015为研究对象,在体外通过显微镜观察和细胞活性测定检测该毒株对前列腺癌细胞(PC-3)、非小细胞肺癌细胞(H1299、A549)、子宫内膜癌细胞(Ishikawa)、胶质瘤细胞(U251)和宫颈癌细胞(Hela)共6种肿瘤细胞的杀伤情况,通过病毒复制动力学测定检测SVA CH-01-2015在不同肿瘤细胞中的复制情况;在体内,通过PC-3裸鼠荷瘤试验检测SVA CH-01-2015的溶瘤效果,通过免疫组化和组织病理学染色检测肿瘤组织中病毒的复制以及治疗后肿瘤组织的形态变化。体外试验结果显示,与对照组细胞相比,感染SVA CH-01-2015的PC-3、H1299和Ishikawa肿瘤细胞被显著裂解,而U251、A549和Hela肿瘤细胞形态无显著变化;且与对照组细胞相比,SVA CH-01-2015毒株能极显著杀伤PC-3、H1299和Ishikawa肿瘤细胞(P<0.01),对U251、A549和Hela肿瘤细胞几乎无杀伤作用(P>0.05);以感染复数(MOI)为1的SVA CH-01-2015分别感染6种肿瘤细胞,其在PC-3、H1299和Ishikawa中复制能力极强,在U251和A549中复制能力较弱,在Hela中基本不复制。体内试验结果显示,与对照组相比,静脉单针、瘤内单针和瘤内2针注射10^(8) TCID_(50)/针的SVA CH-01-2015均能极显著抑制PC-3裸鼠移植瘤的生长(P<0.01),且瘤内2针注射的抑制效果更为显著(P<0.01)。结果表明,SVA CH-01-2015能显著杀伤PC-3、H1299和Ishikawa肿瘤细胞,对U251、A549和Hela肿瘤细胞无杀伤作用,且该病毒能抑制体内PC-3裸鼠移植瘤的生长,瘤内2针注射的抑制效果更为显著。 展开更多
关键词 猪A型塞内卡病毒 溶瘤病毒 人前列腺癌细胞PC-3
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