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重组人凝血酶真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的稳定表达 被引量:1
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作者 刘霞 刘飞 +2 位作者 刘少英 朱希强 凌沛学 《食品与药品》 CAS 2013年第6期381-384,共4页
目的构建含重组人凝血酶基因的重组真核表达载体,并转染哺乳动物细胞CHO,建立稳定表达重组人凝血酶的细胞株。方法利用限制性内切酶EcoR I和Xba I将凝血酶基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建含人凝血酶基因的重组质粒pcDNA3.1(+)/t... 目的构建含重组人凝血酶基因的重组真核表达载体,并转染哺乳动物细胞CHO,建立稳定表达重组人凝血酶的细胞株。方法利用限制性内切酶EcoR I和Xba I将凝血酶基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建含人凝血酶基因的重组质粒pcDNA3.1(+)/thrombin,利用双酶切和测序法鉴定。采用阳离子脂质体介导方法,将构建的表达载体转染到CHO细胞中,通过G418加压筛选出阳性细胞克隆,建立稳定表达人凝血酶的细胞株,并扩大培养。采用RT-PCR和SDS-PAGE法检测其mRNA和蛋白质的表达,并对其生物活性进行鉴定。结果重组质粒pcDNA3.1(+)/thrombin经双酶切和测序鉴定证实插入序列准确无误;经RT-PCR和SDS-PAGE法鉴定,转染的CHO细胞可表达、分泌人凝血酶,得到的重组人凝血酶表观相对分子质量(Mr)为43 000左右,与预测一致,且具有降解并凝固牛纤维蛋白原的活性,其比活为234.1 U/mg。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)/thrombin,并成功地在CHO细胞中表达了具有生物活性的重组人凝血酶,该体系的建立为进一步规模化生产重组人凝血酶奠定了基础。 展开更多
关键词 CHO细胞 真核表达载体 重组人凝血酶 稳定表达 转染
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FDA批准新药
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作者 陈玲 邹栩 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期581-581,共1页
关键词 批准新药 FDA Requip 不宁腿综合征 胰腺外分泌 手术止血 人凝血酶
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血压异常
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 CAS 2002年第9期31-31,共1页
0232384 猪对静脉给予牛和人凝血酶制品的不同的低血压应答/Pusateri A E∥JTrauma.-2001,50(1).-83~90 医科图0232385 钡灌肠时血压的改变/Roach SC∥Clin Radiol.-2001,56(5).
关键词 人凝血酶 低血压 血压异常 钡灌肠 医科 静脉 制品 应答 改变 血红蛋白
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Atrial fibrillation in the elderly 被引量:5
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作者 Roberto A. Franken Ronaldo F. Rosa Silvio CM Santos 《Journal of Geriatric Cardiology》 SCIE CAS CSCD 2012年第2期91-100,共10页
This review discusses atrial fibrillation according to the guidelines of Brazilian Society of Cardiac Arrhythmias and the Brazilian Cardiogeriatrics Guidelines. We stress the thromboembolic burden of atrial fibrillati... This review discusses atrial fibrillation according to the guidelines of Brazilian Society of Cardiac Arrhythmias and the Brazilian Cardiogeriatrics Guidelines. We stress the thromboembolic burden of atrial fibrillation and discuss how to prevent it as well as the best way to conduct cases of atrial fibrillatios in the elderly, reverting the arrhythmia to sinus rhythm, or the option of heart rate control. The new methods to treat atrial fibrillation, such as radiofrequency ablation, new oral direct thrombin inhibitors and Xa factor inhibitors, as well as new antiarrhythmic drugs, are depicted. 展开更多
关键词 Atrial fibrillation Heart failure THROMBO-EMBOLISM TREATMENT PREVENTION
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