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重组慢病毒介导人凝血Ⅸ因子基因感染HUCMSCs的实验研究: 1; 作者李文陈姝《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期1726-1730,共5页; 目的探讨慢病毒介导人凝血Ⅸ因子(human clotting factorⅨ,hFⅨ)感染人脐带间充质干细胞(human um-bilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)后hFⅨ的表达情况。方法重组构建慢病毒载体GV240-hFⅨ-EGFP。以脂质体介导法共转染293... 展开更多; 关键词人脐带间充质干细胞人凝血ⅸ因子重组慢病毒感染; 在线阅读下载PDF 职称材料

应用荧光原位杂交检测人凝血因子Ⅸ在转基因小鼠染色体上的整合被引量：12: 2; 作者肖艳萍奚鹰 +1 位作者黄文英黄英《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期232-236,共5页; 应用荧光原位杂交 (FISH)技术检测两个转基因小鼠家系从F1到F4 代的整合情况。阳性转基因小鼠 98%～ 10 0 %的中期分裂相 ,85 %～ 94%的间期核出现杂交信号 ;阴性对照小鼠 10 0 %的中期分裂相、95 %～ 96 %的间期核未出现杂交信号。结... 展开更多; 关键词荧光原位杂交检测人凝血因子ⅸ 转基因小鼠染色体整合位点; 在线阅读下载PDF 职称材料

逆转录病毒载体转染的人凝血因子Ⅸ基因在人脐带组织源间充质干细胞中的表达被引量：3: 3; 作者陈晓梨董春兰 +8 位作者冯小明陈振萍周泽平许显辉赵钦军邱志勇任倩张蕾韩忠朝《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期184-187,共4页; 为了研究逆转录病毒(pLEGFP-N1)转染的人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)基因在人脐带间充质干细胞中的表达,应用DNA重组技术将hFⅨcDNA构建入pLEGFP-N1载体,转导入包装细胞系Pheonix细胞,应用病毒上清感染人脐带组织源间充质干细胞(hUCT-MSCs),经G41... 展开更多; 关键词逆转录病毒人凝血因子ⅸ 人脐带组织源间充质干细胞基因治疗血友病B; 在线阅读下载PDF 职称材料

人凝血因子Ⅸ基因直接注射入小鼠骨骼肌内表达的进一步研究: 4; 作者郭华阳刘昕 +7 位作者王传松王燕纪贤文许平庆吕银慧王仁鹏谭骏汪江华《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期415-417,共3页; 目的：观察人凝血因子ⅨｃＤＮＡ直接注入小鼠骨骼肌后的存在和表达部位。方法：采用免疫组化和核酸杂交技术检测人Ⅸ因子ｃＤＮＡ注入小鼠肌肉后的存在和表达情况。结果：免疫组化和斑点杂交显示肌注４周时有Ⅸ因子的蛋白质和ｍＲＮＡ... 展开更多; 关键词基因治疗人凝血因子ⅸ 骨骼肌直接注射; 在线阅读下载PDF 职称材料

人凝血因子IX突变型研究现状被引量：5: 5; 作者颜景斌《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期833-838,共6页; 血友病B是一种性连锁隐性遗传病,其发病机制是位于X染色体上的人凝血因子IX(hFIX)基因发生了突变,导致血浆中hFIX含量或活性大幅下降,从而使得内源性凝血途径受到阻碍,无法进行正常的凝血。文章综述了hFIX基因及其编码蛋白质的结构和功... 展开更多; 关键词血友病B 人凝血因子ⅸ 突变凝血活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

以山羊BLG基因调控成分构建乳腺特异性表达载体的研究: 6; 作者张恩平石玉强 +1 位作者潘庆杰刘林丽《莱阳农学院学报》 2002年第3期168-170,182,共4页; 为构建乳腺特异性表达载体 ,本研究利用PCR方法克隆了山羊BLG基因 5′调控成分 (2 .9Kb) ,包含 5′侧翼序列 (2 .1Kb) ,第一外显子及第一内含子 (80 0bp)。经序列分析后 ,用于构建表达载体。为验证此调控成分的活性 ,将人凝血因子ⅨcDN... 展开更多; 关键词基因调控成分山羊 BLG基因人凝血因子ⅸcDNA 乳腺上皮细胞表达载体外源活性蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组慢病毒介导人凝血Ⅸ因子基因感染HUCMSCs的实验研究: 1; 作者李文陈姝; 机构重庆医科大学附属第二医院血液科; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期1726-1730,共5页; 文摘目的探讨慢病毒介导人凝血Ⅸ因子(human clotting factorⅨ,hFⅨ)感染人脐带间充质干细胞(human um-bilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)后hFⅨ的表达情况。方法重组构建慢病毒载体GV240-hFⅨ-EGFP。以脂质体介导法共转染293T细胞包装生产慢病毒。以不同感染复数(multiple of infection,MOI)感染hUCMSCs,荧光显微镜观察细胞感染效率,流式细胞仪检测验证。以最适MOI感染hUCMSCs,RT-PCR检测hFⅨmRNA水平,ELISA检测FⅨ蛋白含量(FⅨ∶Ag)及一期法检测FIX凝血活性(FⅨ∶C)。结果制备出了滴度为2×108TU/mL的重组慢病毒。MOI=10时能高效感染hUCMSCs,感染效率为(92.92±6.32)%。RT-PCR结果示只有转染组有hFⅨmRNA转录。感染后1 d,hUCMSCs即可有效分泌hFⅨ,在5 d时达到最高峰,FⅨ∶Ag为(87.18±0.86)ng/(106.24 h),FⅨ∶C为(44.3±3.2)%,高水平分泌可至少持续29 d。结论重组GV240-hFⅨ-EGFP慢病毒感染hUCMSCs后能持续高水平分泌具有凝血功能活性的hFⅨ蛋白。; 关键词人脐带间充质干细胞人凝血ⅸ因子重组慢病毒感染; Keywords human umbilical cord mesenchymal stem cells human clotting factor IX lentiviral vectortransfection; 分类号 R331.1 [医药卫生—人体生理学] R373 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名应用荧光原位杂交检测人凝血因子Ⅸ在转基因小鼠染色体上的整合被引量：12: 2; 作者肖艳萍奚鹰黄文英黄英; 机构上海市儿童医院; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期232-236,共5页; 基金国家"8 6 3"高技术项目 (编号 2 0 0 1AA2 130 1) 上海市现代生物与新药产业发展基金 ( 9943190 4)资助; 文摘应用荧光原位杂交 (FISH)技术检测两个转基因小鼠家系从F1到F4 代的整合情况。阳性转基因小鼠 98%～ 10 0 %的中期分裂相 ,85 %～ 94%的间期核出现杂交信号 ;阴性对照小鼠 10 0 %的中期分裂相、95 %～ 96 %的间期核未出现杂交信号。结果表明 ,该FISH实验条件能对转基因整合位点进行高效特异检测。本文分析的两家系转基因小鼠均为单位点整合 ,但整合位点不同。各家系内F1到F4 代的转基因小鼠均可检出整合染色体 ,且整合位点相同 ,表明外源基因稳定整合并遗传给后代。; 关键词荧光原位杂交检测人凝血因子ⅸ 转基因小鼠染色体整合位点; Keywords fluorescence in situ hybridization (FISH) transgenic mice integration site human clotting factor ⅸ (hFⅸ); 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名逆转录病毒载体转染的人凝血因子Ⅸ基因在人脐带组织源间充质干细胞中的表达被引量：3: 3; 作者陈晓梨董春兰冯小明陈振萍周泽平许显辉赵钦军邱志勇任倩张蕾韩忠朝; 机构中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期184-187,共4页; 基金中国科学与技术部863资助项目(2006AA02A110) 国家自然科学基金(30570357和30600238); 文摘为了研究逆转录病毒(pLEGFP-N1)转染的人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)基因在人脐带间充质干细胞中的表达,应用DNA重组技术将hFⅨcDNA构建入pLEGFP-N1载体,转导入包装细胞系Pheonix细胞,应用病毒上清感染人脐带组织源间充质干细胞(hUCT-MSCs),经G418筛选10天后获得全部的转染阳性细胞,从蛋白质水平和其功能活性上检测hFⅨ的表达。结果显示:配养上清液中可检测到hFⅨ的表达,每24小时分泌量达2.68±0.36μg/106细胞。Western blot检测表明,转导hFⅨ的hUCT-MSCs能分泌预期分子大小的hFⅨ入上清。功能性凝集测定实验表明了转导FⅨ的hUCT-MSCs2天培养上清中hFⅨ的活性为100%-130%。结论:pLEGFP-N1-hFⅨ能有效地转导hUCT-MSCs,并在其子代细胞中表达具有凝血活性的hFⅨ,这为hUCT-MSCs成为血友病B基因治疗的细胞载体研究奠定了基础。; 关键词逆转录病毒人凝血因子ⅸ 人脐带组织源间充质干细胞基因治疗血友病B; Keywords retrovirus human factor ⅸ hUCT-MSC gene therapy hemophilia B; 分类号 R554.1 [医药卫生—血液循环系统疾病] Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人凝血因子Ⅸ基因直接注射入小鼠骨骼肌内表达的进一步研究: 4; 作者郭华阳刘昕王传松王燕纪贤文许平庆吕银慧王仁鹏谭骏汪江华; 机构第三军医大学基础医学部分子生物学教研室; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期415-417,共3页; 基金国家自然科学基金; 文摘目的：观察人凝血因子ⅨｃＤＮＡ直接注入小鼠骨骼肌后的存在和表达部位。方法：采用免疫组化和核酸杂交技术检测人Ⅸ因子ｃＤＮＡ注入小鼠肌肉后的存在和表达情况。结果：免疫组化和斑点杂交显示肌注４周时有Ⅸ因子的蛋白质和ｍＲＮＡ表达。原位杂交显示肌注４周时局部肌细胞内仍有Ⅸ因子ｃＤＮＡ存在。; 关键词基因治疗人凝血因子ⅸ 骨骼肌直接注射; 分类号 R394 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人凝血因子IX突变型研究现状被引量：5: 5; 作者颜景斌; 机构上海交通大学医学遗传研究所; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期833-838,共6页; 基金国家863高科技研究发展项目(编号:2002AA206201)~~; 文摘血友病B是一种性连锁隐性遗传病,其发病机制是位于X染色体上的人凝血因子IX(hFIX)基因发生了突变,导致血浆中hFIX含量或活性大幅下降,从而使得内源性凝血途径受到阻碍,无法进行正常的凝血。文章综述了hFIX基因及其编码蛋白质的结构和功能,并分类详细论述了血友病B中发现的几种主要突变类型。其中包括奠基者效应造成的突变、调控区的突变、编码区的突变、内含子剪切位点的突变及另外两种较为特殊的突变,同时介绍了这些突变所造成的生物学效应。最后还简要介绍了一种能提高hFIX蛋白凝血活性的突变类型(第338位Arg→Ala),并对其应用作了展望。; 关键词血友病B 人凝血因子ⅸ 突变凝血活性; Keywords hemophilia B human coagulation factor ⅸ （hFIX） mutation clotting activity; 分类号 R554 [医药卫生—血液循环系统疾病]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名以山羊BLG基因调控成分构建乳腺特异性表达载体的研究: 6; 作者张恩平石玉强潘庆杰刘林丽; 机构西北农林科技大学动物科技学院莱阳农学院动物科学系西北农林科技大学生命科学院; 出处《莱阳农学院学报》 2002年第3期168-170,182,共4页; 文摘为构建乳腺特异性表达载体 ,本研究利用PCR方法克隆了山羊BLG基因 5′调控成分 (2 .9Kb) ,包含 5′侧翼序列 (2 .1Kb) ,第一外显子及第一内含子 (80 0bp)。经序列分析后 ,用于构建表达载体。为验证此调控成分的活性 ,将人凝血因子ⅨcDNA克隆在其下游构建表达载体 ,转化原代培养的山羊乳腺上皮细胞 ,提取细胞培养液经ELISA免疫法测定人凝血因子Ⅸ蛋白的含量高达 15ng/ml。基于此 ,可以初步断定此调控序列可以调节外源基因在乳腺细胞中特异性表达。; 关键词基因调控成分山羊 BLG基因人凝血因子ⅸcDNA 乳腺上皮细胞表达载体外源活性蛋白; Keywords goatβ-lactoglobulin gene human factor ⅸcDNA gland epithelia expressional vector; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	重组慢病毒介导人凝血Ⅸ因子基因感染HUCMSCs的实验研究	李文陈姝	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	应用荧光原位杂交检测人凝血因子Ⅸ在转基因小鼠染色体上的整合	肖艳萍奚鹰黄文英黄英	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	2002	12	在线阅读下载PDF 职称材料
3	逆转录病毒载体转染的人凝血因子Ⅸ基因在人脐带组织源间充质干细胞中的表达	陈晓梨董春兰冯小明陈振萍周泽平许显辉赵钦军邱志勇任倩张蕾韩忠朝	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2009	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人凝血因子Ⅸ基因直接注射入小鼠骨骼肌内表达的进一步研究	郭华阳刘昕王传松王燕纪贤文许平庆吕银慧王仁鹏谭骏汪江华	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	1997	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人凝血因子IX突变型研究现状	颜景斌	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	2005	5	在线阅读下载PDF 职称材料
6	以山羊BLG基因调控成分构建乳腺特异性表达载体的研究	张恩平石玉强潘庆杰刘林丽	《莱阳农学院学报》	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料