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重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体体外活性作用的研究
1
作者
倪之嘉
潘卫
+4 位作者
王元和
戚中田
傅宏
傅志仁
王强
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期261-263,共3页
目的 :研究表达人内皮细胞抑制素 ( endostatin)的腺病毒载体的体外活性作用。 方法 :用重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体体外转染人结肠癌 SW62 0细胞 ,观察肿瘤细胞生长情况 ,并观察其上清对大鼠肺毛细血管内皮细胞、新生牛主动脉内皮...
目的 :研究表达人内皮细胞抑制素 ( endostatin)的腺病毒载体的体外活性作用。 方法 :用重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体体外转染人结肠癌 SW62 0细胞 ,观察肿瘤细胞生长情况 ,并观察其上清对大鼠肺毛细血管内皮细胞、新生牛主动脉内皮细胞及人脐静脉内皮细胞生长的影响。 结果 :MTT法检查证实重组腺病毒对结肠癌细胞生长无抑制 ,锥虫蓝染色证实转染的人结肠癌 SW62 0细胞上清对各种血管内皮细胞的生长均有较强的抑制作用。 结论 :重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体体外对各种血管内皮细胞生长均有较强的抑制作用 。
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关键词
重组
人内皮细胞抑制素
腺病毒科
血管
内皮
体外活性
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职称材料
内皮细胞抑制素在毕节酵母中的表达与活性分析
被引量：
2
2
作者
吴江雪
符武钊
+2 位作者
张添元
罗进贤
吴群悦
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期83-86,共4页
采用PCR技术从人胎脑cDNA库中扩增了人内皮细胞抑制素基因。经DNA序列分析后将扩增的基因克隆至酵母载体pPIC9K,获得的重组质粒pPIC9K＿EDN转化毕节酵母GS115,构建表达内皮细胞抑制素的酵母工程菌P.pastorisGS115(pPIC9K＿EDN)。SDS＿P...
采用PCR技术从人胎脑cDNA库中扩增了人内皮细胞抑制素基因。经DNA序列分析后将扩增的基因克隆至酵母载体pPIC9K,获得的重组质粒pPIC9K＿EDN转化毕节酵母GS115,构建表达内皮细胞抑制素的酵母工程菌P.pastorisGS115(pPIC9K＿EDN)。SDS＿PAGE分析结果显示:人内皮细胞抑制素在重组酵母GS115(pPIC9K＿EDN)中获得高效表达。用30L发酵罐构对建的工程菌进行高密度发酵,经甲醇诱导48h,生物量达到250OD,分泌量为150mg L,发酵液经SPStreamline,SPSepharoseFF阳离子交换柱和SepharoseHeparinHiTrap柱纯化,产物纯度达到98%。纯化产物具有免疫活性并能抑制bFGF诱导的鸡胚绒毛尿囊膜血管生成。
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关键词
人内皮细胞抑制素
基因表达
毕节酵母
高密度发酵
纯化
生物活性分析
肿瘤
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职称材料
题名
重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体体外活性作用的研究
1
作者
倪之嘉
潘卫
王元和
戚中田
傅宏
傅志仁
王强
机构
第二军医大学长征医院普通外科
第二军医大学长征医院基础医学部微生物学教研室
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第3期261-263,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目 ( 39970 819)
文摘
目的 :研究表达人内皮细胞抑制素 ( endostatin)的腺病毒载体的体外活性作用。 方法 :用重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体体外转染人结肠癌 SW62 0细胞 ,观察肿瘤细胞生长情况 ,并观察其上清对大鼠肺毛细血管内皮细胞、新生牛主动脉内皮细胞及人脐静脉内皮细胞生长的影响。 结果 :MTT法检查证实重组腺病毒对结肠癌细胞生长无抑制 ,锥虫蓝染色证实转染的人结肠癌 SW62 0细胞上清对各种血管内皮细胞的生长均有较强的抑制作用。 结论 :重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体体外对各种血管内皮细胞生长均有较强的抑制作用 。
关键词
重组
人内皮细胞抑制素
腺病毒科
血管
内皮
体外活性
Keywords
endostatin
adenovidae
endothelium, vascular
分类号
R543 [医药卫生—心血管疾病]
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
内皮细胞抑制素在毕节酵母中的表达与活性分析
被引量：
2
2
作者
吴江雪
符武钊
张添元
罗进贤
吴群悦
机构
中山大学基因工程教育部重点实验室生物化学系
出处
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期83-86,共4页
基金
广东省重点科技攻关资助项目(2KMO2502G)
文摘
采用PCR技术从人胎脑cDNA库中扩增了人内皮细胞抑制素基因。经DNA序列分析后将扩增的基因克隆至酵母载体pPIC9K,获得的重组质粒pPIC9K＿EDN转化毕节酵母GS115,构建表达内皮细胞抑制素的酵母工程菌P.pastorisGS115(pPIC9K＿EDN)。SDS＿PAGE分析结果显示:人内皮细胞抑制素在重组酵母GS115(pPIC9K＿EDN)中获得高效表达。用30L发酵罐构对建的工程菌进行高密度发酵,经甲醇诱导48h,生物量达到250OD,分泌量为150mg L,发酵液经SPStreamline,SPSepharoseFF阳离子交换柱和SepharoseHeparinHiTrap柱纯化,产物纯度达到98%。纯化产物具有免疫活性并能抑制bFGF诱导的鸡胚绒毛尿囊膜血管生成。
关键词
人内皮细胞抑制素
基因表达
毕节酵母
高密度发酵
纯化
生物活性分析
肿瘤
Keywords
human endostatin
gene expression
P. pastoris
high cell density culture
purification and bioactivity
分类号
R730.1 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体体外活性作用的研究
倪之嘉
潘卫
王元和
戚中田
傅宏
傅志仁
王强
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
0
在线阅读
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职称材料
2
内皮细胞抑制素在毕节酵母中的表达与活性分析
吴江雪
符武钊
张添元
罗进贤
吴群悦
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2003
2
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