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人工设计的HIV-1重组鸡痘病毒诱导恒河猴产生免疫应答的研究
1
作者
张立树
金宁一
+8 位作者
宋英
洪宝庆
马鹤雯
尚玉璞
王宏
孙岩松
金洪涛
战大伟
李昌
《高技术通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期1198-1203,共6页
将人工设计的HIV-1多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒rFPV-MEGp24大量制备并纯化后,分别在0周、8周、18周肌肉注射至实验恒河猴中,在第2次免疫后2周和第3次免疫后2周采集血液,分离血清和外周血淋巴细胞（PBMC）,ELISA法检测血清HIV-1抗体...
将人工设计的HIV-1多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒rFPV-MEGp24大量制备并纯化后,分别在0周、8周、18周肌肉注射至实验恒河猴中,在第2次免疫后2周和第3次免疫后2周采集血液,分离血清和外周血淋巴细胞（PBMC）,ELISA法检测血清HIV-1抗体和PBMC培养上清Th1类细胞因子的含量,MTT法测定PBMC的增殖能力,乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测PBMC特异性CTL杀伤活性。结果表明：HIV-1多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒可刺激恒河猴产生HIV-1特异性抗体;免疫猴的PBMC在HIV-1抗原肽刺激下细胞增殖能力加强,针对HIV-1靶细胞的特异性CTL杀伤活性产生,分泌Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2的水平升高。研究提示,HIV-1多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒能诱导恒河猴产生特异性细胞和体液免疫应答。
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关键词
人免疫缺陷病毒i型
人工设计
重组鸡痘
病毒
恒河猴
免疫
应答
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职称材料
HIV-1外膜蛋白gp120在酵母Pichia pastoris中的表达
2
作者
冯劼
朱娟莉
+1 位作者
董兆麟
陈超
《西北大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期801-804,813,共5页
目的用巴斯德毕赤酵母系统表达HIV外膜糖蛋白gp 120。方法将从HIV-1型国际标准株pHXB2-gp 160的基因序列中扩增出的gp 120分子的长片段基因(1 419 bp)和短片段基因(417bp)分别克隆入真核表达载体pPICZαA与pPICZB中,以电穿孔法转化酵母G...
目的用巴斯德毕赤酵母系统表达HIV外膜糖蛋白gp 120。方法将从HIV-1型国际标准株pHXB2-gp 160的基因序列中扩增出的gp 120分子的长片段基因(1 419 bp)和短片段基因(417bp)分别克隆入真核表达载体pPICZαA与pPICZB中,以电穿孔法转化酵母GS 115。用YPDS-zeo平板筛选重组子、PCR方法检测整合到酵母菌GS 115基因组中的gp 120片段基因,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE和免疫印迹分析表达产物。结果诱导后gp 120短片段多肽在GS 115中少量表达,在诱导表达24 h重组蛋白表达量及抗原性达到最高,表达产物被降解,具有良好的抗原特异性。诱导后gp 120长片段多肽未被GS 115所表达。结论在巴斯德毕赤酵母中成功表达gp 120分子长片段需要优化gp 120基因,为制备HIV-1的诊断抗原和基因工程重组疫苗打下基础。
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关键词
人免疫缺陷病毒i型
GP
120
基因克隆
蛋白表达
毕赤酵母
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职称材料
题名
人工设计的HIV-1重组鸡痘病毒诱导恒河猴产生免疫应答的研究
1
作者
张立树
金宁一
宋英
洪宝庆
马鹤雯
尚玉璞
王宏
孙岩松
金洪涛
战大伟
李昌
机构
军事医学科学院
天津大学农业与生物工程学院
军事医学科学院实验动物中心
Department of Biochemistry and Molecular Biology
暨南大学生命科学院生物系
出处
《高技术通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期1198-1203,共6页
基金
863计划（2003AA219051）资助项目.
文摘
将人工设计的HIV-1多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒rFPV-MEGp24大量制备并纯化后,分别在0周、8周、18周肌肉注射至实验恒河猴中,在第2次免疫后2周和第3次免疫后2周采集血液,分离血清和外周血淋巴细胞（PBMC）,ELISA法检测血清HIV-1抗体和PBMC培养上清Th1类细胞因子的含量,MTT法测定PBMC的增殖能力,乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测PBMC特异性CTL杀伤活性。结果表明：HIV-1多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒可刺激恒河猴产生HIV-1特异性抗体;免疫猴的PBMC在HIV-1抗原肽刺激下细胞增殖能力加强,针对HIV-1靶细胞的特异性CTL杀伤活性产生,分泌Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2的水平升高。研究提示,HIV-1多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒能诱导恒河猴产生特异性细胞和体液免疫应答。
关键词
人免疫缺陷病毒i型
人工设计
重组鸡痘
病毒
恒河猴
免疫
应答
Keywords
HIV-1, designed vaccine, recombinant fowlpex virus （FPV）, Macaca mulatta, immune response
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
HIV-1外膜蛋白gp120在酵母Pichia pastoris中的表达
2
作者
冯劼
朱娟莉
董兆麟
陈超
机构
西北大学生命科学学院
陕西北美基因股份公司
国家微检测系统工程技术研究中心
出处
《西北大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期801-804,813,共5页
基金
国家高技术研究发展计划基金资助项目(2005AA205220)
文摘
目的用巴斯德毕赤酵母系统表达HIV外膜糖蛋白gp 120。方法将从HIV-1型国际标准株pHXB2-gp 160的基因序列中扩增出的gp 120分子的长片段基因(1 419 bp)和短片段基因(417bp)分别克隆入真核表达载体pPICZαA与pPICZB中,以电穿孔法转化酵母GS 115。用YPDS-zeo平板筛选重组子、PCR方法检测整合到酵母菌GS 115基因组中的gp 120片段基因,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE和免疫印迹分析表达产物。结果诱导后gp 120短片段多肽在GS 115中少量表达,在诱导表达24 h重组蛋白表达量及抗原性达到最高,表达产物被降解,具有良好的抗原特异性。诱导后gp 120长片段多肽未被GS 115所表达。结论在巴斯德毕赤酵母中成功表达gp 120分子长片段需要优化gp 120基因,为制备HIV-1的诊断抗原和基因工程重组疫苗打下基础。
关键词
人免疫缺陷病毒i型
GP
120
基因克隆
蛋白表达
毕赤酵母
Keywords
HIV-1
gp 120
gene cloning
protein expression
Pichia Pastoris
分类号
Q513.2 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人工设计的HIV-1重组鸡痘病毒诱导恒河猴产生免疫应答的研究
张立树
金宁一
宋英
洪宝庆
马鹤雯
尚玉璞
王宏
孙岩松
金洪涛
战大伟
李昌
《高技术通讯》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
HIV-1外膜蛋白gp120在酵母Pichia pastoris中的表达
冯劼
朱娟莉
董兆麟
陈超
《西北大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
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职称材料
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