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人体c-Mpl分子配体不同表达载体的构建及其优化表达策略
被引量：
2
1
作者
张擎
葛怡琛
+1 位作者
潘瑞敏
徐培林
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期59-62,81,共5页
利用酵母双杂交系统从人体肝脏cDNA文库筛选到血小板生成素受体Mpl分子配体的xp1基因,构建pET＿28(b)＿xp1,pBV220＿xp1和pBAD gⅢA＿xp1表达质粒,分别进行IPTG、温度和果糖诱导,表达产物利用小鼠巨核细胞集落形成单位测定活性。表达分...
利用酵母双杂交系统从人体肝脏cDNA文库筛选到血小板生成素受体Mpl分子配体的xp1基因,构建pET＿28(b)＿xp1,pBV220＿xp1和pBAD gⅢA＿xp1表达质粒,分别进行IPTG、温度和果糖诱导,表达产物利用小鼠巨核细胞集落形成单位测定活性。表达分析显示BL21 pET＿28(b)＿xp1水溶性XP1目的蛋白表达量为最高,活性最大;BL21 pBV220＿xp1被短时、低温诱导后可增加表达目的蛋白的水溶性,但稳定性差,表达量和活性均不及BL21 pET＿28(b)＿xp1高;TOP10 pBAD gⅢA＿xp1不能分泌到细胞质周膜,以包涵体形式存在细胞内中,并且为无活性表达。
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关键词
人体c-mpl分子配体
血小板生成素受体
xpl基因
基因表达
表达载体
表达策略
表达量
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职称材料
题名
人体c-Mpl分子配体不同表达载体的构建及其优化表达策略
被引量：
2
1
作者
张擎
葛怡琛
潘瑞敏
徐培林
机构
中山大学生命科学学院基因工程教育部重点实验室
出处
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期59-62,81,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30070424)
文摘
利用酵母双杂交系统从人体肝脏cDNA文库筛选到血小板生成素受体Mpl分子配体的xp1基因,构建pET＿28(b)＿xp1,pBV220＿xp1和pBAD gⅢA＿xp1表达质粒,分别进行IPTG、温度和果糖诱导,表达产物利用小鼠巨核细胞集落形成单位测定活性。表达分析显示BL21 pET＿28(b)＿xp1水溶性XP1目的蛋白表达量为最高,活性最大;BL21 pBV220＿xp1被短时、低温诱导后可增加表达目的蛋白的水溶性,但稳定性差,表达量和活性均不及BL21 pET＿28(b)＿xp1高;TOP10 pBAD gⅢA＿xp1不能分泌到细胞质周膜,以包涵体形式存在细胞内中,并且为无活性表达。
关键词
人体c-mpl分子配体
血小板生成素受体
xpl基因
基因表达
表达载体
表达策略
表达量
Keywords
c-mpl
XP1
expression
solution
stability
activity
分类号
R394.8 [医药卫生—医学遗传学]
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人体c-Mpl分子配体不同表达载体的构建及其优化表达策略
张擎
葛怡琛
潘瑞敏
徐培林
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2003
2
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