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siRNA对人-单核巨噬细胞TLR2基因表达的抑制
被引量：
1
1
作者
潘沛江
叶力
+8 位作者
陈晖
黄颉刚
梁冰玉
蒋俊俊
廖艳研
李彧
苏锦明
陈荣凤
梁浩
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第8期1032-1035,1045,共5页
目的:筛选特异性抑制人-单核巨噬细胞TLR2基因表达的siRNA(small interference RNA)序列,在分子水平上初步讨论其在HIV治疗方面的前景。方法:在基因库中寻找TLR2基因的mRNA序列,针对TLR2基因设计并合成3条siRNA,阳性对照为人类看家基因G...
目的:筛选特异性抑制人-单核巨噬细胞TLR2基因表达的siRNA(small interference RNA)序列,在分子水平上初步讨论其在HIV治疗方面的前景。方法:在基因库中寻找TLR2基因的mRNA序列,针对TLR2基因设计并合成3条siRNA,阳性对照为人类看家基因GAPDH siRNA,阴性对照为6-羧基荧光素标记的siRNA(NC-FAM)。采集健康人新鲜外周血,分离单个核细胞,再经贴壁法培养纯化为人-单核巨噬细胞。采用阳离子脂质体试剂Lipofectamine 2000介导转染培养的人-单核巨噬细胞。用q-PCR法测定干扰后单核巨噬细胞的TLR2 mRNA的表达,Western blot法测定干扰后TLR2蛋白表达。结果:转染72 h后,阳性对照组GAPDH mRNA及蛋白的表达明显降低(P<0.05)。siRNAs组TLR2 mRNA表达水平整体有显著性差异(F=41.957,P<0.001),与阴性对照组比较,TLR2 siRNA各组的TLR2 mRNA相对表达水平均明显降低(P<0.05),抑制率分别为46%、43%、43%。WB结果显示,TLR2 siRNA各组的TLR2蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论:本研究设计的siRNA能够有效抑制人-单核巨噬细胞TLR2基因的表达,从分子免疫学角度出发,表明通过阻断siRNA介导的TLR2信号传导通路能够为HIV治疗提供新思路。
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关键词
TLR2
SIRNA
人一单核巨噬细胞
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职称材料
题名
siRNA对人-单核巨噬细胞TLR2基因表达的抑制
被引量：
1
1
作者
潘沛江
叶力
陈晖
黄颉刚
梁冰玉
蒋俊俊
廖艳研
李彧
苏锦明
陈荣凤
梁浩
机构
广西艾滋病防治研究重点实验室、广西医科大学公共卫生学院
广西医科大学第一附属医院老年消化内科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第8期1032-1035,1045,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(31360033)
广西教育厅高校科研重点资助项目(2013ZD012)资助
文摘
目的:筛选特异性抑制人-单核巨噬细胞TLR2基因表达的siRNA(small interference RNA)序列,在分子水平上初步讨论其在HIV治疗方面的前景。方法:在基因库中寻找TLR2基因的mRNA序列,针对TLR2基因设计并合成3条siRNA,阳性对照为人类看家基因GAPDH siRNA,阴性对照为6-羧基荧光素标记的siRNA(NC-FAM)。采集健康人新鲜外周血,分离单个核细胞,再经贴壁法培养纯化为人-单核巨噬细胞。采用阳离子脂质体试剂Lipofectamine 2000介导转染培养的人-单核巨噬细胞。用q-PCR法测定干扰后单核巨噬细胞的TLR2 mRNA的表达,Western blot法测定干扰后TLR2蛋白表达。结果:转染72 h后,阳性对照组GAPDH mRNA及蛋白的表达明显降低(P<0.05)。siRNAs组TLR2 mRNA表达水平整体有显著性差异(F=41.957,P<0.001),与阴性对照组比较,TLR2 siRNA各组的TLR2 mRNA相对表达水平均明显降低(P<0.05),抑制率分别为46%、43%、43%。WB结果显示,TLR2 siRNA各组的TLR2蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论:本研究设计的siRNA能够有效抑制人-单核巨噬细胞TLR2基因的表达,从分子免疫学角度出发,表明通过阻断siRNA介导的TLR2信号传导通路能够为HIV治疗提供新思路。
关键词
TLR2
SIRNA
人一单核巨噬细胞
Keywords
siRNA
small interference RNA
human monocyte-derived macrophage
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
siRNA对人-单核巨噬细胞TLR2基因表达的抑制
潘沛江
叶力
陈晖
黄颉刚
梁冰玉
蒋俊俊
廖艳研
李彧
苏锦明
陈荣凤
梁浩
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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