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人Ⅰ型精氨酸酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 杨成丽 郑迎迎 +1 位作者 柯前进 李大力 《化学与生物工程》 CAS 2007年第1期53-54,67,共3页
PCR扩增人Ⅰ型精氨酸酶基因(hAⅠ),插入大肠杆菌表达载体pET30a中,构建重组表达质粒pET30a-hAⅠ,转化大肠杆菌宿主菌BL21(DE3),构建大肠杆菌基因工程菌BL21(DE3)(pET30a-hAⅠ),IPTG诱导后表达,菌体酶活为每克湿菌体34.6 U。SDS-PAGE分... PCR扩增人Ⅰ型精氨酸酶基因(hAⅠ),插入大肠杆菌表达载体pET30a中,构建重组表达质粒pET30a-hAⅠ,转化大肠杆菌宿主菌BL21(DE3),构建大肠杆菌基因工程菌BL21(DE3)(pET30a-hAⅠ),IPTG诱导后表达,菌体酶活为每克湿菌体34.6 U。SDS-PAGE分析表明,诱导后的BL21(DE3)(pET30a-hAⅠ)在约35 kD处有明显的蛋白表达。 展开更多
关键词 人ⅰ型精氨酸酶 克隆 大肠杆菌 表达
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人Ⅰ型精氨酸酶基因的克隆及其酵母表达 被引量:2
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作者 李大力 郑迎迎 《化学与生物工程》 CAS 2006年第4期41-42,49,共3页
用RT-PCR扩增人Ⅰ型精氨酸酶基因(hAⅠ),经DNA序列分析后,插入含α分泌信号肽序列的毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建重组表达质粒pPIC9K-hAⅠ。转化酵母宿主菌SMD1168,菌落PCR鉴定目的基因的整合,甲醇诱导工程酵母表达,用酶活检测的方式... 用RT-PCR扩增人Ⅰ型精氨酸酶基因(hAⅠ),经DNA序列分析后,插入含α分泌信号肽序列的毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建重组表达质粒pPIC9K-hAⅠ。转化酵母宿主菌SMD1168,菌落PCR鉴定目的基因的整合,甲醇诱导工程酵母表达,用酶活检测的方式鉴定目的基因的表达,结果显示,经诱导的工程酵母胞内精氨酸酶活性为对照的2.3倍。 展开更多
关键词 人ⅰ型精氨酸酶 克隆 表达 毕赤酵母
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