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题名人Ⅰ型精氨酸酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
被引量:1
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作者
杨成丽
郑迎迎
柯前进
李大力
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机构
南京理工大学化工学院生物工程系
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出处
《化学与生物工程》
CAS
2007年第1期53-54,67,共3页
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文摘
PCR扩增人Ⅰ型精氨酸酶基因(hAⅠ),插入大肠杆菌表达载体pET30a中,构建重组表达质粒pET30a-hAⅠ,转化大肠杆菌宿主菌BL21(DE3),构建大肠杆菌基因工程菌BL21(DE3)(pET30a-hAⅠ),IPTG诱导后表达,菌体酶活为每克湿菌体34.6 U。SDS-PAGE分析表明,诱导后的BL21(DE3)(pET30a-hAⅠ)在约35 kD处有明显的蛋白表达。
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关键词
人ⅰ型精氨酸酶
克隆
大肠杆菌
表达
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Keywords
human arginase ⅰ gene
clone
Escherichia coli.
expression
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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题名人Ⅰ型精氨酸酶基因的克隆及其酵母表达
被引量:2
- 2
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作者
李大力
郑迎迎
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机构
南京理工大学化工学院生物工程系
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出处
《化学与生物工程》
CAS
2006年第4期41-42,49,共3页
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文摘
用RT-PCR扩增人Ⅰ型精氨酸酶基因(hAⅠ),经DNA序列分析后,插入含α分泌信号肽序列的毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建重组表达质粒pPIC9K-hAⅠ。转化酵母宿主菌SMD1168,菌落PCR鉴定目的基因的整合,甲醇诱导工程酵母表达,用酶活检测的方式鉴定目的基因的表达,结果显示,经诱导的工程酵母胞内精氨酸酶活性为对照的2.3倍。
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关键词
人ⅰ型精氨酸酶
克隆
表达
毕赤酵母
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Keywords
hAⅰ
clone
expression, Pichia pastoris
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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