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女性生殖道人Beta-防御素基因的表达
被引量：
2
1
作者
冯艳
潘小玲
+2 位作者
黄宁
冯云
王伯瑶
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第11期1564-1564,共1页
关键词
女性
生殖道
人β-防御素基因
基因
表达
逆转录多聚酶链反应法
检测
在线阅读
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职称材料
人β-防御素-2基因5′-端转录调控区DNA片段的克隆及序列初步分析
被引量：
1
2
作者
汪宇辉
黄宁
+1 位作者
吴琦
王伯瑶
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第11期1565-1566,共2页
关键词
人β-
防御
素
-
2
基因
5′
-
端转录调控区
DNA片段
克隆
序列分析
基因
转录
在线阅读
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职称材料
山羊乳腺上皮细胞基因转染条件的优化
被引量：
2
3
作者
杜珊
马保华
+3 位作者
李亮亮
刘军
赵晓娥
张涌
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期159-166,共8页
为了优化外源基因转入乳腺上皮细胞的条件,本研究采用组织块培养法,从山羊乳腺组织中分离并获得了纯化的乳腺上皮细胞,通过染色角蛋白和测定生长曲线对其进行了鉴定和检测。然后利用电穿孔法将PEGFPC1载体导入乳腺上皮细胞,分别比较了...
为了优化外源基因转入乳腺上皮细胞的条件,本研究采用组织块培养法,从山羊乳腺组织中分离并获得了纯化的乳腺上皮细胞,通过染色角蛋白和测定生长曲线对其进行了鉴定和检测。然后利用电穿孔法将PEGFPC1载体导入乳腺上皮细胞,分别比较了在不同电压(120、140、160、180、200V)、不同电击时长(5、10、15、20ms)以及2株细胞(GMEC1、GMEC2)的不同代数(第1代、第3代、第5代、第9代)条件下的转染效率,并利用优化条件对山羊乳腺上皮细胞进行人β-防御素3基因转染,经过G418筛选,最终获得单克隆细胞,同时对获得的单克隆阳性细胞进行体外诱导表达,并对诱导产物进行Western blotting鉴定。结果表明,不同遗传背景的细胞对转染效率的影响较小,而第1代培养的细胞转染效率要显著高于传代细胞,乳腺上皮细胞在电压180V、电击时长15ms、电击1次的条件下转染效率最高,优化条件下转染、筛选和扩增后获得稳定表达人β-防御素3蛋白的单克隆乳腺上皮细胞。研究工作为乳蛋白基因表达调控机制的研究及乳腺特异性表达载体的检测提供参考资料。
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关键词
山羊乳腺上皮细胞
电穿孔
转染效率
人β-
防御
素
3
基因
诱导表达
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职称材料
题名
女性生殖道人Beta-防御素基因的表达
被引量：
2
1
作者
冯艳
潘小玲
黄宁
冯云
王伯瑶
机构
华西医学中心基础医学院感染免疫研究室
华西第二医院妇产科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第11期1564-1564,共1页
关键词
女性
生殖道
人β-防御素基因
基因
表达
逆转录多聚酶链反应法
检测
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
人β-防御素-2基因5′-端转录调控区DNA片段的克隆及序列初步分析
被引量：
1
2
作者
汪宇辉
黄宁
吴琦
王伯瑶
机构
四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第11期1565-1566,共2页
关键词
人β-
防御
素
-
2
基因
5′
-
端转录调控区
DNA片段
克隆
序列分析
基因
转录
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
山羊乳腺上皮细胞基因转染条件的优化
被引量：
2
3
作者
杜珊
马保华
李亮亮
刘军
赵晓娥
张涌
机构
西北农林科技大学动物医学院农业部动物生物技术重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期159-166,共8页
基金
国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08008-010B)
文摘
为了优化外源基因转入乳腺上皮细胞的条件,本研究采用组织块培养法,从山羊乳腺组织中分离并获得了纯化的乳腺上皮细胞,通过染色角蛋白和测定生长曲线对其进行了鉴定和检测。然后利用电穿孔法将PEGFPC1载体导入乳腺上皮细胞,分别比较了在不同电压(120、140、160、180、200V)、不同电击时长(5、10、15、20ms)以及2株细胞(GMEC1、GMEC2)的不同代数(第1代、第3代、第5代、第9代)条件下的转染效率,并利用优化条件对山羊乳腺上皮细胞进行人β-防御素3基因转染,经过G418筛选,最终获得单克隆细胞,同时对获得的单克隆阳性细胞进行体外诱导表达,并对诱导产物进行Western blotting鉴定。结果表明,不同遗传背景的细胞对转染效率的影响较小,而第1代培养的细胞转染效率要显著高于传代细胞,乳腺上皮细胞在电压180V、电击时长15ms、电击1次的条件下转染效率最高,优化条件下转染、筛选和扩增后获得稳定表达人β-防御素3蛋白的单克隆乳腺上皮细胞。研究工作为乳蛋白基因表达调控机制的研究及乳腺特异性表达载体的检测提供参考资料。
关键词
山羊乳腺上皮细胞
电穿孔
转染效率
人β-
防御
素
3
基因
诱导表达
Keywords
goat mammary epithelial cells
electroporation
transfection efficiency
human betadefensin 3 gene
induced expression
分类号
S827 [农业科学—畜牧学]
S813.3 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
女性生殖道人Beta-防御素基因的表达
冯艳
潘小玲
黄宁
冯云
王伯瑶
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人β-防御素-2基因5′-端转录调控区DNA片段的克隆及序列初步分析
汪宇辉
黄宁
吴琦
王伯瑶
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
山羊乳腺上皮细胞基因转染条件的优化
杜珊
马保华
李亮亮
刘军
赵晓娥
张涌
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
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职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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