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微小隐孢子虫亲环素型肽脯氨酰顺反异构酶基因克隆与分析
1
作者
付芹芹
杨光
+6 位作者
王穗湘
孙小会
郭志云
张丽菊
陈川
刘国宁
荆春霞
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期885-889,共5页
目的克隆微小隐孢子虫(C.parvum)南京株(NJ)亲环素型肽脯氨酰顺反异构酶基因,测序并分析C.parvumNJ株与其他隐孢子虫分离株CyP-type PPIase基因序列的差异以及亲缘关系。方法根据GenBank上C.parvumIowa II株CyP-type PPIase基因序列,设...
目的克隆微小隐孢子虫(C.parvum)南京株(NJ)亲环素型肽脯氨酰顺反异构酶基因,测序并分析C.parvumNJ株与其他隐孢子虫分离株CyP-type PPIase基因序列的差异以及亲缘关系。方法根据GenBank上C.parvumIowa II株CyP-type PPIase基因序列,设计2对引物,应用巢式PCR扩增目的基因,并将其克隆入pMD18-T载体,对重组子进行双酶切和菌落PCR鉴定并测序,应用生物信息学方法分析C.parvum NJ株CyP-type PPIase基因与其它隐孢子虫株的核苷酸和氨基酸序列差异。结果巢式PCR扩增获得特异的目的基因,双酶切和菌落PCR鉴定获得正确的重组子,测序表明,扩增基因组DNA序列为746bp,含有目的基因ORF全长570bp,编码190个氨基酸。序列分析表明,我国C.parvum NJ株与国外分离的Iowa II株CyP-type PPIase基因的氨基酸序列具有99%的同源性。进化树分析表明,C.parvumNJ株与Iowa II株CyP-type PPIase基因之间的亲缘关系最近,与脑膜炎双球菌的亲缘关系最远。结论成功克隆C.parvumCyP-type PPIase基因,C.parvumCyP-type PPIase基因在氨基酸水平高度保守。
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关键词
微小隐孢子虫
亲环素型肽脯氨酰顺反异构酶基因
克隆
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职称材料
小球藻亲环蛋白A的酶活性及过表达拟南芥抗盐性分析
被引量：
1
2
作者
廖栩
何明良
+4 位作者
张素艳
马海燕
王旭辉
罗秋香
管清杰
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期722-729,共8页
在前期研究中分离到噬碳酸盐小球藻(Chlorella sp.X1)的亲环蛋白基因CsCyp1A(登录号:KY207381),编码CsCyp1A蛋白是否具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性功能是进一步研究它参与小球藻耐盐生物学过程的基础。通过His标签的p QE-30-CsC...
在前期研究中分离到噬碳酸盐小球藻(Chlorella sp.X1)的亲环蛋白基因CsCyp1A(登录号:KY207381),编码CsCyp1A蛋白是否具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性功能是进一步研究它参与小球藻耐盐生物学过程的基础。通过His标签的p QE-30-CsCyp1A原核蛋白表达载体,经IPTG诱导它的E.coli M15菌株表达融合蛋白,Nitra-柱纯化后获得纯化的30 kDa左右的His-CsCyp1A融合蛋白质,Western杂交检测到His CsCyp1A蛋白的杂交信号。酶活性分析显示,HisCsCyp1A融合蛋白中生色基团的产生速度明显快于对照,表明CsCyp1A蛋白可以催化底物N-succinyl-Xaa-Pro-Phe-p-nitroanilide中Xaa-Pro肽键的顺反折叠,说明纯化的CsCyp1A蛋白具有PPIase活性。典型的亲环蛋白家族成员具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性,参与折叠和转运、信号转导、免疫调节、细胞凋亡等生物学过程。真空渗入法侵染转化的拟南芥在35S启动子驱动下超表达CsCyp1A基因,耐盐性研究表明它提高了过表达株系对NaCl胁迫的耐性,揭示小球藻CsCyp1A基因的抗盐性功能,它将成为抗逆育种的基因资源。本研究也为探索小球藻亲环蛋白A的抗盐碱胁迫生物学作用和分子育种奠定了基础。
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关键词
噬碳酸盐小球藻
盐碱地
亲
环
蛋白A
肽
脯氨
酰
顺反异构
酶
原核表达蛋白
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职称材料
亲环素A抑制剂研究进展
被引量：
8
3
作者
李剑
陈玲
+2 位作者
柳红
沈旭
蒋华良
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期195-200,共6页
亲环素A是亲环素家族重要成员,是重要的免疫抑制药物环孢素A的体内结合蛋白,除了具有肽脯氨酰顺反异构酶活性,亲环素A在一系列生物途径中发挥作用,如蛋白折叠、装配、转运、神经生长调节和HIV病毒复制。总结了天然产物抑制剂、肽类抑制...
亲环素A是亲环素家族重要成员,是重要的免疫抑制药物环孢素A的体内结合蛋白,除了具有肽脯氨酰顺反异构酶活性,亲环素A在一系列生物途径中发挥作用,如蛋白折叠、装配、转运、神经生长调节和HIV病毒复制。总结了天然产物抑制剂、肽类抑制剂和有机合成分子等亲环素A抑制剂的发现和发展历程,对亲环素A抑制剂的研究进展进行了综述。
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关键词
亲
环
素A
肽
脯氨
酰
顺反异构
酶
抑制剂
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职称材料
题名
微小隐孢子虫亲环素型肽脯氨酰顺反异构酶基因克隆与分析
1
作者
付芹芹
杨光
王穗湘
孙小会
郭志云
张丽菊
陈川
刘国宁
荆春霞
机构
暨南大学医学院流行病学教研究
暨南大学医学院寄生虫系
暨南大学医学院卫生学教研室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期885-889,共5页
基金
国家自然科学基金(30901249,81101267)
广东省自然科学基金(10151063201000036,S2011010002526)
广东省医学科研基金(B2007097)联合资助~~
文摘
目的克隆微小隐孢子虫(C.parvum)南京株(NJ)亲环素型肽脯氨酰顺反异构酶基因,测序并分析C.parvumNJ株与其他隐孢子虫分离株CyP-type PPIase基因序列的差异以及亲缘关系。方法根据GenBank上C.parvumIowa II株CyP-type PPIase基因序列,设计2对引物,应用巢式PCR扩增目的基因,并将其克隆入pMD18-T载体,对重组子进行双酶切和菌落PCR鉴定并测序,应用生物信息学方法分析C.parvum NJ株CyP-type PPIase基因与其它隐孢子虫株的核苷酸和氨基酸序列差异。结果巢式PCR扩增获得特异的目的基因,双酶切和菌落PCR鉴定获得正确的重组子,测序表明,扩增基因组DNA序列为746bp,含有目的基因ORF全长570bp,编码190个氨基酸。序列分析表明,我国C.parvum NJ株与国外分离的Iowa II株CyP-type PPIase基因的氨基酸序列具有99%的同源性。进化树分析表明,C.parvumNJ株与Iowa II株CyP-type PPIase基因之间的亲缘关系最近,与脑膜炎双球菌的亲缘关系最远。结论成功克隆C.parvumCyP-type PPIase基因,C.parvumCyP-type PPIase基因在氨基酸水平高度保守。
关键词
微小隐孢子虫
亲环素型肽脯氨酰顺反异构酶基因
克隆
Keywords
Cryptosporidium parvum
CyP-type PPIase gene
cloning
分类号
R382.3 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
小球藻亲环蛋白A的酶活性及过表达拟南芥抗盐性分析
被引量：
1
2
作者
廖栩
何明良
张素艳
马海燕
王旭辉
罗秋香
管清杰
机构
东北林业大学盐碱地生物资源环境研究中心东北盐碱植被恢复与重建教育部重点实验室
吉林省德惠市第九中学
出处
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期722-729,共8页
基金
国家重点研发计划(2016YFC0501203)
黑龙江省博士后科研启动资助金(LBH-Q15004)
国家青年基金(31500317)资助~~
文摘
在前期研究中分离到噬碳酸盐小球藻(Chlorella sp.X1)的亲环蛋白基因CsCyp1A(登录号:KY207381),编码CsCyp1A蛋白是否具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性功能是进一步研究它参与小球藻耐盐生物学过程的基础。通过His标签的p QE-30-CsCyp1A原核蛋白表达载体,经IPTG诱导它的E.coli M15菌株表达融合蛋白,Nitra-柱纯化后获得纯化的30 kDa左右的His-CsCyp1A融合蛋白质,Western杂交检测到His CsCyp1A蛋白的杂交信号。酶活性分析显示,HisCsCyp1A融合蛋白中生色基团的产生速度明显快于对照,表明CsCyp1A蛋白可以催化底物N-succinyl-Xaa-Pro-Phe-p-nitroanilide中Xaa-Pro肽键的顺反折叠,说明纯化的CsCyp1A蛋白具有PPIase活性。典型的亲环蛋白家族成员具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性,参与折叠和转运、信号转导、免疫调节、细胞凋亡等生物学过程。真空渗入法侵染转化的拟南芥在35S启动子驱动下超表达CsCyp1A基因,耐盐性研究表明它提高了过表达株系对NaCl胁迫的耐性,揭示小球藻CsCyp1A基因的抗盐性功能,它将成为抗逆育种的基因资源。本研究也为探索小球藻亲环蛋白A的抗盐碱胁迫生物学作用和分子育种奠定了基础。
关键词
噬碳酸盐小球藻
盐碱地
亲
环
蛋白A
肽
脯氨
酰
顺反异构
酶
原核表达蛋白
Keywords
phytococcal chlorella
saline-sodic soil
cyclophilin A
peptide prolyl cis-trans isomerase
prokaryotic expression protein
分类号
Q812 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
亲环素A抑制剂研究进展
被引量：
8
3
作者
李剑
陈玲
柳红
沈旭
蒋华良
机构
中国科学院上海药物研究所药物发现与设计中心
出处
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期195-200,共6页
基金
国家重点基础研究发展计划("九七三"计划)资助项目(No.2002CB512802)~~
文摘
亲环素A是亲环素家族重要成员,是重要的免疫抑制药物环孢素A的体内结合蛋白,除了具有肽脯氨酰顺反异构酶活性,亲环素A在一系列生物途径中发挥作用,如蛋白折叠、装配、转运、神经生长调节和HIV病毒复制。总结了天然产物抑制剂、肽类抑制剂和有机合成分子等亲环素A抑制剂的发现和发展历程,对亲环素A抑制剂的研究进展进行了综述。
关键词
亲
环
素A
肽
脯氨
酰
顺反异构
酶
抑制剂
Keywords
cyclophilin A
peptidyl pmlyl cis-trans isomerases（PPIases）
inhibitors
分类号
R979.5 [医药卫生—药品]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
微小隐孢子虫亲环素型肽脯氨酰顺反异构酶基因克隆与分析
付芹芹
杨光
王穗湘
孙小会
郭志云
张丽菊
陈川
刘国宁
荆春霞
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
小球藻亲环蛋白A的酶活性及过表达拟南芥抗盐性分析
廖栩
何明良
张素艳
马海燕
王旭辉
罗秋香
管清杰
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
亲环素A抑制剂研究进展
李剑
陈玲
柳红
沈旭
蒋华良
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
8
在线阅读
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职称材料
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