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不同蛋白A亲和色谱填料的制备工艺比较及性能评价
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作者 周林娟 王卓 +3 位作者 任兴发 刘德云 张凌怡 张维冰 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期410-419,共10页
蛋白A亲和色谱填料由于能够和免疫球蛋白G(IgG)特异性作用,已广泛应用于临床医学、生物医药领域。采用不同结构和形貌的基质,通过不同的表面修饰方法得到的填料性能差别很大。研究分别以常用的琼脂糖和聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(PGMA)小... 蛋白A亲和色谱填料由于能够和免疫球蛋白G(IgG)特异性作用,已广泛应用于临床医学、生物医药领域。采用不同结构和形貌的基质,通过不同的表面修饰方法得到的填料性能差别很大。研究分别以常用的琼脂糖和聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(PGMA)小球为基质,通过多功能环氧基定向固定蛋白A制得琼脂糖基质亲和色谱填料(A-S)和PGMA基质亲和色谱填料(P-S)。通过马来酰亚氨基定向固定蛋白A制得琼脂糖基质亲和色谱填料(A-R)和PGMA基质亲和色谱填料(P-R)。通过对蛋白A的键合工艺加以优化,研究了基质种类、基质粒径以及蛋白A含量等条件对材料性能的影响,提高了材料对IgG的吸附性能。结果表明,尽管所制备的4类材料对IgG都有一定的吸附选择性,但P-R的性能明显更加优异,可在较低的蛋白A配基密度下达到较高的动态载量。制备了不同配基密度的亲和色谱填料,其中配基密度为15.71 mg/mL的P-R对牛免疫球蛋白的动态载量为32.23 mg/mL,对人免疫球蛋白的动态载量达到54.41 mg/mL,且在碱处理160个循环后动态载量仍为初始值的94.6%。耐压测试结果表明P-R的机械强度远高于同等条件下制得的琼脂糖基质的亲和材料A-R,当流速到达80 mL/min时,PGMA基质色谱柱的流速与压力仍保持较好的线性关系,P-R的耐压性能好,可以在更高的流速下进行分离纯化。以上结果说明以马来酰亚氨基在PGMA上固定蛋白A的工艺更适宜于蛋白A亲和色谱填料的工程化生产,所发展的方法有望在固定蛋白和免疫吸附材料合成领域发挥更大的作用。 展开更多
关键词 亲和色谱 蛋白A 琼脂糖 聚甲基丙烯酸缩水甘油酯 免疫球蛋白G 动态载量
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免疫亲和色谱与固相微萃取联用技术研究进展 被引量:3
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作者 姚凯 张伟 +1 位作者 杨琳燕 李存 《动物医学进展》 北大核心 2016年第1期88-92,共5页
固相微萃取(SMPE)技术是近年来快速发展的一项样品前处理技术,具有操作简便、经济、快速等优点。SMPE装置由手柄和萃取头两部分组成,萃取头上的涂层是最核心的部分,萃取原理是涂层与目标组分之间的吸附作用。由于涂层的种类有限和选择性... 固相微萃取(SMPE)技术是近年来快速发展的一项样品前处理技术,具有操作简便、经济、快速等优点。SMPE装置由手柄和萃取头两部分组成,萃取头上的涂层是最核心的部分,萃取原理是涂层与目标组分之间的吸附作用。由于涂层的种类有限和选择性差,使其不适合萃取复杂的基质。免疫亲和色谱(IAC)具有很强的特异性。将两项技术联用(IAC-SPME),抗体或者抗体相关材料作为SMPE的涂层,既有SMPE的优点,又弥补了SMPE在选择性方面的不足,用于直接从复杂基质中萃取分析物,IAC-SPME具有很好的应用前景,是目前研究的热点。论文就IAC-SPME联用技术的研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 固相微萃取 免疫亲和色谱 免疫亲和色谱-固相微萃取
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混合抗体的亲和色谱分离策略 被引量:1
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作者 周月芳 张焱 +5 位作者 罗坚 康丽梅 陈毅 石红 孟庆雄 苏志国 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期974-979,共6页
乳腺生物反应器可以高效表达重组人单克隆抗体,但是目标产品与乳液原料中的牛抗体性质、结构非常类似,分离难度很大。本文对牛抗体和重组人抗体的种属差异进行了分析,并在此基础上制定了新型分离策略,采取Protein A亲和色谱和免疫亲和... 乳腺生物反应器可以高效表达重组人单克隆抗体,但是目标产品与乳液原料中的牛抗体性质、结构非常类似,分离难度很大。本文对牛抗体和重组人抗体的种属差异进行了分析,并在此基础上制定了新型分离策略,采取Protein A亲和色谱和免疫亲和色谱来解决混合抗体的分离问题,并讨论了色谱洗脱模式对分离效果的影响。结果表明,Protein A亲和色谱结合梯度洗脱可以有效地纯化得到混合抗体,但是难以彻底分离重组人抗体和牛抗体;相比之下,使用Protein A亲和色谱结合置换色谱模式可以更加高效地分离混合抗体,最终可以得到纯度高达95%以上的重组人抗体,回收率可达95%以上。免疫亲和色谱同样可以有效地分离纯化重组单克隆抗体,且其通用性更强,可以应用于任何动物乳腺表达重组人抗体的分离纯化中。 展开更多
关键词 ProteinA亲和色谱 免疫亲和色谱 重组人抗体 牛抗体 乳腺生物反应器
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金属螯合亲和色谱介质的合成及其色谱特性研究 被引量:17
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作者 邸泽梅 陈国亮 +2 位作者 雷建都 李蓉 李华儒 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期297-300,共4页
详细研究了亚氨基二乙酸(IDA)在硅胶基质上键合的适宜条件,利用国产小颗粒大孔径硅胶(7μm,30nm)制备了固定有Cu2+,Ni2+,Co2+,Zn2+的金属螯合吸附剂,比较了蛋白质在金属螯合柱和裸柱上的保留特性,... 详细研究了亚氨基二乙酸(IDA)在硅胶基质上键合的适宜条件,利用国产小颗粒大孔径硅胶(7μm,30nm)制备了固定有Cu2+,Ni2+,Co2+,Zn2+的金属螯合吸附剂,比较了蛋白质在金属螯合柱和裸柱上的保留特性,利用合成的Cu-IDA-硅胶柱分离了来自牛血红细胞的超氧化物歧化酶(SOD)。 展开更多
关键词 金属螯合 亲和色谱 介质合成 SOD 分离 MCAC
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免疫亲和色谱-气相色谱/质谱法(IAC-GC/MS)检测猪肝中的沙丁胺醇与克伦特罗 被引量:20
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作者 王建平 史为民 沈建忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期271-275,共5页
制备出抗沙丁胺醇的抗血清,提取、纯化IgG制备免疫亲和色谱柱,针对沙丁胺醇与克伦特罗的动态柱容量分别为400 ng/mL基质和416 ng/mL基质。猪肝样品匀浆后用稀盐酸提取,经免疫亲和色谱柱纯化,再用GC/MS检测,即为IAC-GC/MS法。对沙丁胺醇... 制备出抗沙丁胺醇的抗血清,提取、纯化IgG制备免疫亲和色谱柱,针对沙丁胺醇与克伦特罗的动态柱容量分别为400 ng/mL基质和416 ng/mL基质。猪肝样品匀浆后用稀盐酸提取,经免疫亲和色谱柱纯化,再用GC/MS检测,即为IAC-GC/MS法。对沙丁胺醇的检测限为0.5 ng/g,定量限为2 ng/g,对克伦特罗的检测限为0.8ng/g,定量限为2.5 ng/g。空白组织按照1、5、10、20 ng/g的浓度添加药物,沙丁胺醇在空白肝中的添加回收率为78.4%-106.9%,克伦特罗的添加回收率为77.1%-102.9%。本研究建立的检测猪肝中沙丁胺醇与克伦特罗的IAC-GC/MS法乃国内首次报道。 展开更多
关键词 沙丁胺醇 克伦特罗 免疫亲和色谱 GC/MS 猪肝
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一种分离抗凝血酶Ⅲ的高效亲和色谱填料的制备及表征 被引量:11
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作者 赵莹歆 上官棣华 +1 位作者 赵睿 刘国诠 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第2期203-206,共4页
以聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球 ( PGMA)为基质 ,利用还原氨化方法将肝素键合在其表面上 ,得到一种以肝素为配基的高效亲和色谱填料 ,该填料对抗凝血酶 的亲和容量为 1 .2 mg/g,对抗凝血酶 和人血清白蛋白的回收率分别为 96.9%和 94 .4 ... 以聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球 ( PGMA)为基质 ,利用还原氨化方法将肝素键合在其表面上 ,得到一种以肝素为配基的高效亲和色谱填料 ,该填料对抗凝血酶 的亲和容量为 1 .2 mg/g,对抗凝血酶 和人血清白蛋白的回收率分别为 96.9%和 94 .4 % .利用前沿色谱法测定了肝素与抗凝血酶 之间的表观解离常数为 1 .96× 1 0 - 5mol/L. 展开更多
关键词 高效亲和色谱 肝素 抗凝血酶Ⅲ 填料 分离 制备 表征 纯化 聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球
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免疫亲和色谱特异性剔除中药方剂四逆散中的柚皮苷 被引量:14
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作者 陈亮 陈婷 徐强 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期243-246,共4页
为了获得剔除柚皮苷(naring in)的中药方剂四逆散样品以供其药理活性探讨时使用,制备了抗柚皮苷抗体的免疫亲和色谱柱,用于特异性地剔除四逆散中的柚皮苷。首先合成了柚皮苷的完全抗原柚皮苷与牛血清白蛋白的结合物naring in-B SA,并用n... 为了获得剔除柚皮苷(naring in)的中药方剂四逆散样品以供其药理活性探讨时使用,制备了抗柚皮苷抗体的免疫亲和色谱柱,用于特异性地剔除四逆散中的柚皮苷。首先合成了柚皮苷的完全抗原柚皮苷与牛血清白蛋白的结合物naring in-B SA,并用naring in-B SA对新西兰兔进行免疫获得抗血清,再将其纯化后与经CNB r活化的Sepharo se4B凝胶共价偶联制成免疫亲和色谱柱。将四逆散提取物样品溶液上样该色谱柱,洗脱,制得特异性剔除了柚皮苷的四逆散样品。由检测结果可知,naring in-B SA被成功合成。将其用于免疫新西兰兔,获得的抗血清的效价经酶联免疫吸附法(ELISA)测定达到1∶30 000,抗体IgG的纯度达94%,交叉反应率低。在IgG与Sepha-ro se4B合成的IgG-Sepharo se免疫亲和色谱柱中,IgG的偶联率为87%。用该免疫亲和色谱柱处理四逆散后,其中所含的柚皮苷几乎完全被剔除。结果证明,利用抗柚皮苷免疫亲和色谱,能特异性地剔除四逆散或其他样品中的柚皮苷成分。 展开更多
关键词 免疫亲和色谱 柚皮苷 完全抗原 特异性剔除 四逆散
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克百威的免疫亲和色谱分析研究 被引量:17
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作者 刘曙照 韦林洪 徐维娜 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期134-137,共4页
SepharoseCL 4B经碳酰二咪唑(CDI)活化后与纯化的克百威抗体共价偶联,合成了免疫亲和色谱 (IAC)固定相,并用其制备了对克百威具有特异性亲和力的IAC柱。对IAC条件进行了优化,选择 0 02mol/LpH7 2磷酸盐缓冲液(PB)作为吸附与平衡介质,60... SepharoseCL 4B经碳酰二咪唑(CDI)活化后与纯化的克百威抗体共价偶联,合成了免疫亲和色谱 (IAC)固定相,并用其制备了对克百威具有特异性亲和力的IAC柱。对IAC条件进行了优化,选择 0 02mol/LpH7 2磷酸盐缓冲液(PB)作为吸附与平衡介质,60% (体积分数 )甲醇水溶液作为洗脱剂。结果表明:在优化条件下,IAC柱对克百威的动态柱容量达 1 58mg/L。当标样溶液中克百威质量浓度低于 2μg/L时,经IAC柱富集的效率高于167倍。在河水中按 0 1mg/L水平添加克百威标准品,经IAC柱分离富集,洗脱液采用包被抗体直接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测,5次重复测定的平均回收率为 89 8%,相对标准偏差为 4 8%。同时采用高效液相色谱(HPLC)法测定洗脱液,与ELISA法测定结果基本一致。 展开更多
关键词 免疫亲和色谱 酶联免疫吸附分析 高效液相 克百威
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利用鸡蛋特异性抗体IgY的免疫亲和色谱 被引量:5
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作者 陈天豹 李珑 +2 位作者 徐小华 张蓉真 饶平凡 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期563-566,共4页
以牛血清白蛋白(BSA)作为抗原,利用偶联上BSA的Sepharose-4B的亲和色谱材料从鸡蛋蛋黄中一步分离特异性抗BSA 抗体。经SDS-PAGE、双向免疫扩散检验,所洗脱的样品为电泳纯的特异性抗体。反之,将所得... 以牛血清白蛋白(BSA)作为抗原,利用偶联上BSA的Sepharose-4B的亲和色谱材料从鸡蛋蛋黄中一步分离特异性抗BSA 抗体。经SDS-PAGE、双向免疫扩散检验,所洗脱的样品为电泳纯的特异性抗体。反之,将所得抗体再偶联到POROSHY上可分离抗原。同时考察了母鸡免疫过程中特异性抗体随时间的变化趋势。 展开更多
关键词 鸡蛋 特异性抗体 IGY 免疫亲和色谱
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染料膜亲和色谱法中膜堆的制备及应用 被引量:6
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作者 郭为 商振华 +1 位作者 于亿年 周良模 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期168-171,共4页
将染料亲和配基偶联于大孔纤维素膜上,所得亲和膜用胶粘法制成亲和膜堆,膜堆的通透性远优于通常的亲和色谱柱。装有蓝色和红色亲和膜的膜堆可分别用于人血清白蛋白和碱性磷酸酯酶的分离纯化,其中碱性磷酸酯酶可在一步操作后纯化40倍。
关键词 亲和色谱 磷酸酯酶 人血清 白蛋白
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尿样中克仑特罗免疫亲和色谱-气/质联用检测方法的研究 被引量:7
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作者 王迪 杨曙明 +4 位作者 张波 宋荣 熊勇华 于洪侠 杨晓慧 《分析科学学报》 CAS CSCD 2007年第6期665-668,共4页
以单抗为配基制备克仑特罗免疫亲和柱,建立了简单、快速、特异的样品净化技术,柱容量达到100 ng。偶联抗体量与柱容量呈线性关系,线性方程为:y=236.36x+6.6214,R2=0.9461。测定尿样中的克仑特罗,不需前处理直接用亲和柱提纯后以气质联用... 以单抗为配基制备克仑特罗免疫亲和柱,建立了简单、快速、特异的样品净化技术,柱容量达到100 ng。偶联抗体量与柱容量呈线性关系,线性方程为:y=236.36x+6.6214,R2=0.9461。测定尿样中的克仑特罗,不需前处理直接用亲和柱提纯后以气质联用(GC/MS)方法检测。空白猪尿添加浓度为205、01、00 ng时,回收率分别为85%±1.3,85.9%±1.3,81.5%±2.7。同时以NY/XQ421-2003标准中净化方法为对照,回收率分别为113%±5.6,94.5%±10,78.6%±1.7,偶联非特异抗体的对照组亲和柱对样品保留值为7.03%。数据显示:免疫亲和柱作为提纯方法,与传统固相萃取提纯方法相比平行性好,提纯后样本杂质少。因此免疫亲和柱是净化样品的一个有效方法。 展开更多
关键词 免疫亲和色谱 克仑特罗 Β-兴奋剂 净化
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麦胚凝集素亲和色谱富集糖肽过程中的肽键裂解 被引量:4
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作者 卢庄 王京兰 +5 位作者 贾伟 杨兵 蔡耘 邓玉林 张玉奎 钱小红 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期19-23,共5页
蛋白质的糖基化是最重要的翻译后修饰之一,与蛋白质结构和功能的关系密切。凝集素亲和色谱是蛋白质糖基化研究中很常用的工具,不同的凝集素可以对不同的单糖或寡糖有特异的富集作用。麦胚凝集素(W GA)由于其特异作用的糖型广泛存在而成... 蛋白质的糖基化是最重要的翻译后修饰之一,与蛋白质结构和功能的关系密切。凝集素亲和色谱是蛋白质糖基化研究中很常用的工具,不同的凝集素可以对不同的单糖或寡糖有特异的富集作用。麦胚凝集素(W GA)由于其特异作用的糖型广泛存在而成为使用最多的凝集素之一。在本研究中,发现将W GA用于糖肽亲和富集会导致部分肽段的降解,从而导致后续的肽段序列分析的失败。本文用4种标准蛋白质对这种现象进行了验证,结果表明肽段的降解可以发生在多个位点,其中较多地发生在酪氨酸、苯丙氨酸及亮氨酸的羧基端。这一结果提示:在糖蛋白质组研究中,如果应用W GA富集糖肽并采用质谱进行鉴定,则采用半酶切或非特异性酶切的检索策略更为合适。 展开更多
关键词 麦胚凝集素亲和色谱 糖肽 肽键 断裂 蛋白质组学
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分离尿激酶的胍基型亲和色谱填料研究 被引量:3
13
作者 常建华 高俊萍 +4 位作者 梁峰 冯越 董聿生 苏天升 郭立安 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第5期737-739,共3页
Five guanido packings of affinity chromatography for the separation of urokinase have been synthesized. The separation characteristics and the effect of matrix and ligands on them have been studied. The guanidine deri... Five guanido packings of affinity chromatography for the separation of urokinase have been synthesized. The separation characteristics and the effect of matrix and ligands on them have been studied. The guanidine derivative is a fine ligand, the packings with ligand of arginine are much better than that with ligand of p-ABZ. The polyepoxypropyl methacrylate microsphere is a good matrix. The comprehensive function of packings with ligand of arginine and matrix of polyepoxypropyl methacrylate microsphere is more excellent than Sepharose-p-ABZ. 展开更多
关键词 填料 分离 尿激酶 胍基型亲和色谱
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以寡聚组氨酸为配基的高效亲和色谱研究 被引量:3
14
作者 余晓 赵睿 +3 位作者 方梅 熊少祥 苏天升 刘国诠 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第4期532-534,共3页
A series of affinity media were synthesized by using the oligohistines, His Gly, (His) 3 Gly and (His) 5 Gly as the ligands and the home made monosized, non porous copolymer(CL PGMA) beads containing active epoxide gr... A series of affinity media were synthesized by using the oligohistines, His Gly, (His) 3 Gly and (His) 5 Gly as the ligands and the home made monosized, non porous copolymer(CL PGMA) beads containing active epoxide groups as the support. The affinity chromatographic behavior between IgG and the oligohistines was investigated at pH 3 0, 4 5, 7 0 and 10 0. It showed the specific interaction at pH 4 5. The dissociation constants of IgG and oligohistine media(1H, 3H, 5H) were 3 037×10 -6 , 2 459×10 -6 and 1 905×10 -6 L/mol, respectively. The dissociation constants decreased with increasing the number of histine residue in oligopeptide chains. [WT5HZ] 展开更多
关键词 寡聚组氨酸 高效亲和色谱 解离常数 固相肽合成
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以人参皂苷Rg1为配基的亲和色谱介质的制备与初步应用 被引量:3
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作者 刘倩 寇俊萍 +2 位作者 黄娅琳 乐心逸 余伯阳 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期451-455,共5页
通过偶联人参皂苷Rg1(Rg1)与环氧活化琼脂糖凝胶6B(epoxy-activated SepharoseTM6B,EAS6B),制备以Rg1为配基的亲和介质,以红外色谱法验证其偶联,并采用正交设计方法优化偶联条件为40℃,pH13,每毫升EAS6B添加Rg1100μmol;以此条件放大工... 通过偶联人参皂苷Rg1(Rg1)与环氧活化琼脂糖凝胶6B(epoxy-activated SepharoseTM6B,EAS6B),制备以Rg1为配基的亲和介质,以红外色谱法验证其偶联,并采用正交设计方法优化偶联条件为40℃,pH13,每毫升EAS6B添加Rg1100μmol;以此条件放大工艺制备的亲和介质偶联率为31.47%,偶联量为31.56μmol/mL;利用Rg1-EAS6B亲和介质,以系列亲和色谱法,从PC12细胞蛋白裂解液中筛选得到1个Rg1特异性结合蛋白的条带,为制备含有类似活性基团的中药有效成分的亲和色谱介质提供参考依据,也为进一步探讨人参皂苷Rg1的作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 亲和色谱 介质 人参皂苷RG1 环氧活化琼脂糖凝胶6B 正交设计 高效液相
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活性蓝F3GA固载的无孔单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯亲和色谱填料的制备与应用 被引量:4
16
作者 卜春苗 王有贤 +1 位作者 龚波林 阎超 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期378-383,共6页
以3.0μm无孔单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂为基质,与三嗪染料活性蓝F3GA(Cibacron Blue F3GA)反应,制备出一种固定化染料聚合物高效亲和色谱填料。考察了应用该填料时流动相中的盐离子浓度、有机溶剂及流速等对牛血清白蛋... 以3.0μm无孔单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂为基质,与三嗪染料活性蓝F3GA(Cibacron Blue F3GA)反应,制备出一种固定化染料聚合物高效亲和色谱填料。考察了应用该填料时流动相中的盐离子浓度、有机溶剂及流速等对牛血清白蛋白(BSA)和溶菌酶(Lys)保留行为的影响。实验结果表明,该染料亲和填料具有良好的色谱性能。利用前沿色谱法测定了染料与溶菌酶之间的表观解离常数为5.26×10-5mol/L。使用该填料成功地从鸡蛋清和小牛血清中分别分离纯化了Lys和BSA,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析显示Lys和BSA的纯度分别为95%和92%。 展开更多
关键词 无孔单分散亲水性树脂 染料亲和色谱 固定相 蛋白质 纯度
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绿磺隆克百威三唑磷多抗体免疫亲和色谱技术研究 被引量:4
17
作者 韦林洪 刘曙照 +1 位作者 邵秀金 张军 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期2211-2216,共6页
采用碳酰二咪唑(CDI)将Sepharose CL-4B活化并分别与纯化的抗绿磺隆、抗克百威、抗三唑磷的多克隆抗体共价偶联,合成相应的免疫亲和吸附剂,并制备了对绿磺隆、克百威和三唑磷具有特异性亲和力的多抗体免疫亲和色谱(MIAC)柱。对MIAC的条... 采用碳酰二咪唑(CDI)将Sepharose CL-4B活化并分别与纯化的抗绿磺隆、抗克百威、抗三唑磷的多克隆抗体共价偶联,合成相应的免疫亲和吸附剂,并制备了对绿磺隆、克百威和三唑磷具有特异性亲和力的多抗体免疫亲和色谱(MIAC)柱。对MIAC的条件进行优化,选择0.02mol·L-1pH7.2磷酸盐缓冲液作吸附与平衡介质,80%(体积分数)甲醇水溶液作洗脱剂。结果表明,在上述试验条件下,MIAC柱对绿磺隆、克百威和三唑磷的动态柱容量分别达1.81、2.29和1.89μg·mL-1床体积。用MIAC柱对添加有绿磺隆、克百威、三唑磷的河水与土壤提取液进行分离富集,洗脱液分别采用包被抗体直接竞争酶联免疫吸附(ELISA)法和高效液相色谱(HPLC)法测定,重复5次,平均回收率是89.98%~106.2%,相对标准偏差(RSD)为3.21%~14.81%,ELISA法和HPLC法的测定结果基本一致。成功建立了绿磺隆、克百威和三唑磷的多抗体免疫亲和色谱分析技术并用于河水和土壤中绿磺隆、克百威、三唑磷残留的测定。 展开更多
关键词 绿磺隆 克百威 三唑磷 多抗体免疫亲和色谱(MIAC)
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一种凝血酶亲和色谱介质的制备方法 被引量:2
18
作者 王雄飞 张玉杰 +3 位作者 叶静 罗志强 詹雪艳 袁瑞娟 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期813-816,共4页
对凝血酶-琼脂糖亲和色谱介质的制备方法进行了研究。首先使用凝血酶和溴化氰活化的琼脂糖制备凝血酶-琼脂糖亲和色谱介质,然后用生色底物法考察亲和色谱介质上凝血酶的活性,以凝血酶活性为指标对最佳偶联条件进行了优化。结果表明最佳... 对凝血酶-琼脂糖亲和色谱介质的制备方法进行了研究。首先使用凝血酶和溴化氰活化的琼脂糖制备凝血酶-琼脂糖亲和色谱介质,然后用生色底物法考察亲和色谱介质上凝血酶的活性,以凝血酶活性为指标对最佳偶联条件进行了优化。结果表明最佳条件为使用pH8.3的Na2CO3-NaHCO3溶液(含0.5 mol/L NaCl)为缓冲溶液,凝血酶用量为每1 g色谱介质加入凝血酶200 U,室温反应10 h。在最佳条件下所制备的色谱介质有较好的稳定性,在4℃条件下存放40天,亲和介质上的凝血酶活性仍有70.6%保留。该亲和色谱介质可广泛用于含凝血酶抑制剂的天然药物筛选和分离纯化。 展开更多
关键词 凝血酶 亲和色谱 底物法
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高效亲和色谱研究含有特定结构域肽与DNA的结合 被引量:3
19
作者 张若蘅 杨栩 +1 位作者 李崇熙 徐筱杰 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期297-298,共2页
高效亲和色谱研究含有特定结构域肽与DNA的结合张若蘅,杨栩,李崇熙,徐筱杰(北京大学化学系北京100871)1前言在脱氧核糖核酸(DNA)结合蛋白质中,除了螺旋-转折。螺旋、锌指和亮氨酸拉链三种主要结构域之外 ̄[1]... 高效亲和色谱研究含有特定结构域肽与DNA的结合张若蘅,杨栩,李崇熙,徐筱杰(北京大学化学系北京100871)1前言在脱氧核糖核酸(DNA)结合蛋白质中,除了螺旋-转折。螺旋、锌指和亮氨酸拉链三种主要结构域之外 ̄[1],近年来,一类含有β-转折结构的S... 展开更多
关键词 氨基酸 高效亲和色谱 结合作用
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烯唑醇免疫亲和色谱柱的制备及其在样品前处理中的应用 被引量:5
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作者 金雅慧 王鸣华 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期67-70,共4页
将四甲氧基硅烷(TMOS)水解后与烯唑醇抗体聚合,采用溶胶-凝胶法合成了烯唑醇免疫亲和色谱(IAC)柱固定相,并用其制备了对烯唑醇具有特异性亲和力的IAC柱。对IAC柱条件进行了优化,选择超纯水作为吸附与平衡介质,30%~50%(体积分数)甲醇水... 将四甲氧基硅烷(TMOS)水解后与烯唑醇抗体聚合,采用溶胶-凝胶法合成了烯唑醇免疫亲和色谱(IAC)柱固定相,并用其制备了对烯唑醇具有特异性亲和力的IAC柱。对IAC柱条件进行了优化,选择超纯水作为吸附与平衡介质,30%~50%(体积分数)甲醇水溶液作为洗脱剂。结果表明:在优化条件下,IAC柱对烯唑醇的动态柱容量达125.4μg/g。在河水样品和水果样品中添加烯唑醇,经IAC柱净化富集,洗脱液采用高效液相色谱检测,河水中烯唑醇的平均回收率为90.36%~100.14%,相对标准偏差(RSD)为2.03%~6.08%;水果中烯唑醇的平均回收率为85.55%~94.02%,RSD为3.38%~6.78%。本研究为烯唑醇在河水、水果等样品中的残留分析提供了一种新的高效前处理手段。 展开更多
关键词 溶胶-凝胶法 免疫亲和色谱 高效液相 烯唑醇 净化 河水 水果
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