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ICAM-1特异结合肽的淘选与性质研究
1
作者
赵乐群
赵佳慧
+2 位作者
程庆砾
黄仪秀
朱圣庚
《北京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期474-477,共4页
利用噬菌体展示载体pCANTAB5G8构建了随机十五肽库 ,根据转化率计算库容量为 1 36× 10 8。用PCR SSCP检验了库的异质性。以固相包被亲和淘选的方法 ,经过 4轮淘选和ELISA分析 ,得到了 5个可与重组人细胞间粘附分子 1(ICAM 1)特异...
利用噬菌体展示载体pCANTAB5G8构建了随机十五肽库 ,根据转化率计算库容量为 1 36× 10 8。用PCR SSCP检验了库的异质性。以固相包被亲和淘选的方法 ,经过 4轮淘选和ELISA分析 ,得到了 5个可与重组人细胞间粘附分子 1(ICAM 1)特异结合的噬菌体克隆 ,对所展示的十五肽进行了序列分析。其中活性较高的噬菌体展示十五肽与ICAM 1的亲和常数约为 7 87× 10 7。
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关键词
噬菌体展示
随机多肽库
细胞间粘附分子1
亲和淘选
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职称材料
细胞间粘附分子1特异结合肽的筛选及其生物功能
被引量：
1
2
作者
赵佳慧
赵乐群
+2 位作者
程庆砾
陈香美
朱圣庚
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期20-27,共8页
采用两种方法对噬菌体展示随机十五肽库进行亲和淘选 .ELISA法筛选特异结合高亲和力的阳性噬菌体单克隆 ,测序 ,得到 6个与人细胞间粘附分子 1(ICAM 1)高亲和力的噬菌体展示十五肽单克隆 .再经ELISA法从这 6个噬菌体单克隆中选择与ICAM ...
采用两种方法对噬菌体展示随机十五肽库进行亲和淘选 .ELISA法筛选特异结合高亲和力的阳性噬菌体单克隆 ,测序 ,得到 6个与人细胞间粘附分子 1(ICAM 1)高亲和力的噬菌体展示十五肽单克隆 .再经ELISA法从这 6个噬菌体单克隆中选择与ICAM 1亲和力最高的单克隆 ,同时利用蛋白空间结构位象模拟技术对小肽与ICAM 1的亲和力进行模拟研究 .最终获取目的小肽的氨基酸序列为GRGEFRGRDNSVSVV .目的单克隆噬菌体与ICAM - 1的亲和常数Ka 为 7 87× 10 7L mol .体外合成、纯化并标记目的小肽 .ELISA法验证目的小肽与人ICAM 1的结合呈浓度依赖性 ,抗ICAM 1多抗不能拮抗目的小肽与ICAM 1的结合 .采用免疫组化方法证实 ,此目的小肽具有与炎症组织中高表达的ICAM 1特异性结合的功能 .在动物体内 ,荧光标记的目的小肽具有向高表达ICAM 1的炎症部位特异性聚集的功能 .说明此目的肽可尝试作为以ICAM 1为靶的“肽导向药物”的前导肽 .
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关键词
细胞间粘附分子1
噬菌体展示随机多肽库
亲和淘选
炎症
体外表达
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职称材料
噬菌体改组库的构建及高活性水蛭素变异体的筛选
被引量：
1
3
作者
龙铟
刘家云
+1 位作者
刘莉
王宗仁
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期167-170,共4页
目的:运用DNA家族改组方法提高水蛭素的抗凝血酶活性。方法:将水蛭素HV1、HV2、HV3基因等量混合,用DNaseI消化,回收50bp左右的片段,再经无引物和有引物PCR扩增获得与原基因大小相同的改组分子,构建噬菌体展示的水蛭素改组文库,经凝血酶...
目的:运用DNA家族改组方法提高水蛭素的抗凝血酶活性。方法:将水蛭素HV1、HV2、HV3基因等量混合,用DNaseI消化,回收50bp左右的片段,再经无引物和有引物PCR扩增获得与原基因大小相同的改组分子,构建噬菌体展示的水蛭素改组文库,经凝血酶亲和淘选,ELISA筛选高活性的水蛭素变异体。结果:经过DNA改组和噬菌体亲和筛选,成功获得抗凝血酶活性提高的水蛭素变异体HV2-N47K。结论:用DNA家族改组及亲和淘选技术能够筛选出高活性的水蛭素变异体蛋白,这为其他分子的改组提供了借鉴。
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关键词
水蛭素
DNA改组
亲和淘选
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职称材料
题名
ICAM-1特异结合肽的淘选与性质研究
1
作者
赵乐群
赵佳慧
程庆砾
黄仪秀
朱圣庚
机构
北京大学生命科学学院
解放军总医院肾科
出处
《北京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期474-477,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目 (39870 32 1)
文摘
利用噬菌体展示载体pCANTAB5G8构建了随机十五肽库 ,根据转化率计算库容量为 1 36× 10 8。用PCR SSCP检验了库的异质性。以固相包被亲和淘选的方法 ,经过 4轮淘选和ELISA分析 ,得到了 5个可与重组人细胞间粘附分子 1(ICAM 1)特异结合的噬菌体克隆 ,对所展示的十五肽进行了序列分析。其中活性较高的噬菌体展示十五肽与ICAM 1的亲和常数约为 7 87× 10 7。
关键词
噬菌体展示
随机多肽库
细胞间粘附分子1
亲和淘选
Keywords
phage display
random peptide library
ICAM\|1
biopanning
分类号
Q516 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
细胞间粘附分子1特异结合肽的筛选及其生物功能
被引量：
1
2
作者
赵佳慧
赵乐群
程庆砾
陈香美
朱圣庚
机构
中国人民解放军总医院肾科
北京大学生命科学学院
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期20-27,共8页
基金
国家自然基金创新研究群体项目 (No .3 0 12 10 0 5 )
国家自然科学基金项目 (No .3 9870 3 2 1)
国家 973项目 (No .G2 0 0 0 0 5 70 0 0 )资助~~
文摘
采用两种方法对噬菌体展示随机十五肽库进行亲和淘选 .ELISA法筛选特异结合高亲和力的阳性噬菌体单克隆 ,测序 ,得到 6个与人细胞间粘附分子 1(ICAM 1)高亲和力的噬菌体展示十五肽单克隆 .再经ELISA法从这 6个噬菌体单克隆中选择与ICAM 1亲和力最高的单克隆 ,同时利用蛋白空间结构位象模拟技术对小肽与ICAM 1的亲和力进行模拟研究 .最终获取目的小肽的氨基酸序列为GRGEFRGRDNSVSVV .目的单克隆噬菌体与ICAM - 1的亲和常数Ka 为 7 87× 10 7L mol .体外合成、纯化并标记目的小肽 .ELISA法验证目的小肽与人ICAM 1的结合呈浓度依赖性 ,抗ICAM 1多抗不能拮抗目的小肽与ICAM 1的结合 .采用免疫组化方法证实 ,此目的小肽具有与炎症组织中高表达的ICAM 1特异性结合的功能 .在动物体内 ,荧光标记的目的小肽具有向高表达ICAM 1的炎症部位特异性聚集的功能 .说明此目的肽可尝试作为以ICAM 1为靶的“肽导向药物”的前导肽 .
关键词
细胞间粘附分子1
噬菌体展示随机多肽库
亲和淘选
炎症
体外表达
Keywords
intercellular adhesion molecule-1, phage display, random 15-peptide library, biopanning, inflammation
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
R36 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
噬菌体改组库的构建及高活性水蛭素变异体的筛选
被引量：
1
3
作者
龙铟
刘家云
刘莉
王宗仁
机构
第四军医大学西京医院中医科
第四军医大学西京医院检验科
第四军医大学药学系药理学教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期167-170,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30200359)
文摘
目的:运用DNA家族改组方法提高水蛭素的抗凝血酶活性。方法:将水蛭素HV1、HV2、HV3基因等量混合,用DNaseI消化,回收50bp左右的片段,再经无引物和有引物PCR扩增获得与原基因大小相同的改组分子,构建噬菌体展示的水蛭素改组文库,经凝血酶亲和淘选,ELISA筛选高活性的水蛭素变异体。结果:经过DNA改组和噬菌体亲和筛选,成功获得抗凝血酶活性提高的水蛭素变异体HV2-N47K。结论:用DNA家族改组及亲和淘选技术能够筛选出高活性的水蛭素变异体蛋白,这为其他分子的改组提供了借鉴。
关键词
水蛭素
DNA改组
亲和淘选
Keywords
hirudin
DNA reshuffle
affinity panning
分类号
Q81 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
ICAM-1特异结合肽的淘选与性质研究
赵乐群
赵佳慧
程庆砾
黄仪秀
朱圣庚
《北京大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2002
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
细胞间粘附分子1特异结合肽的筛选及其生物功能
赵佳慧
赵乐群
程庆砾
陈香美
朱圣庚
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
噬菌体改组库的构建及高活性水蛭素变异体的筛选
龙铟
刘家云
刘莉
王宗仁
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
1
在线阅读
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职称材料
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引证文献
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