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大肠癌相关抗原CA-Hb3的提取、亲和层析纯化及其生物学特性被引量：3: 1; 作者胡志伟李小玲 +2 位作者周国华朱建高孙去病《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期363-367,共5页; 方法：应用ＴｒｉｔｏｎＸ１００和正丁醇分别提取了大肠癌组织粗提抗原和大肠癌细胞株ＨＲＴ－１８的ＣＢＥ（正丁醇提取物），二者均有抗原活性。抗原经抗大肠癌单抗Ｈｂ３－亲和层析进一步纯化，获得纯大肠癌相关抗原ＣＡ－Ｈｂ３... 展开更多; 关键词大肠肿瘤抗原 CA-Hb3 亲和层析纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

单克隆抗体亲和层析纯化日本脑炎病毒V_3(E)糖蛋白的研究被引量：2: 2; 作者马文煜于碧云 +3 位作者于文彬黄庆生姜绍谆汪美先《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期1-4,共4页; 本文探讨了用JEV-V_3(E)McAb制备亲和层析柱纯化mg量V_3糖蛋白的方法。结果表明,超声粉碎法裂解病毒囊膜不影响HA活性,而化学裂解剂(NP_(40)、去氧胆酸钠、Tritonx-100)处理病毒原始材料,则导致HA活性的丧失;pH11.5,0.05M二乙胺洗脱剂对... 展开更多; 关键词糖蛋白日本脑炎病毒亲和层析纯化单克隆抗体 SDS-PAGE Triton 去氧胆酸钠超声粉碎活性影响 McAb HI抗体柱纯化 HA 裂解剂病毒原生物学洗脱剂二乙胺亲和力 mC3 回收率收获量比活性蓝染色 T抗体分子量; 在线阅读下载PDF 职称材料

睾丸酮丛毛单胞菌的分离和鉴定及3α-羟类固醇脱氢酶在大肠杆菌中的克隆表达被引量：2: 3; 作者张国华丛爱日 +3 位作者徐国宾孙立颖严岩夏铁安《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期203-206,共4页; 目的:从自然界中分离鉴定产 3α 羟类固醇脱氢酶(3α hydroxysteroiddehydrogenase, 3α HSD)的睾丸酮丛毛单胞菌,并在大肠杆菌(E.coli.)中克隆表达 3α HSD。方法:将池塘泥浆样品接种到以雄酮为唯一碳源的培养基中,对分离到的菌株根据... 展开更多; 关键词睾丸酮丛毛单胞菌 3α-羟类固醇脱氢酶克隆表达大肠杆菌基因组DNA 相对分子质量亲和层析纯化诱导表达 PCR扩增分离鉴定初步鉴定生化特征设计引物扩增片段重组质粒培养特征生化反应融合蛋白测定方法酶活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪卵透明带抗独特型抗体对鼠免疫抗生育作用的研究(摘要): 4; 作者孙晓溪《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 1999年第S1期48-48,共1页; 评价猪卵透明带抗独特型抗体的免疫生育功能的作用。方法利用－株鼠抗猪卵透明带单克隆抗体（１７Ｄ３ｍＡｂ），通过异种动物免疫及亲和层析纯化制备猪卵透明带抗独特型抗体（Ａｂ２）。结果用Ａｂ２免疫小鼠，妊娠率有下降趋势，平均... 展开更多; 关键词抗独特型抗体猪卵透明带抗生育作用动物免疫单克隆抗体内影像亲和层析纯化生殖免疫妊娠率生育功能; 在线阅读下载PDF 职称材料

禽流感病毒HA基因在拟南芥中的表达被引量：2: 5; 作者张鹏廖玉才 +2 位作者黄涛瞿波李和平《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期386-389,共4页; 将H5N1亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因构建到植物表达载体,经农杆菌法转入拟南芥基因组中,酶联免疫吸附(ELISA)测定分析T2代转基因株系,据OD值筛选获得HA基因高效表达株系;RT-PCR及Western blot分析进一步证实,这些转基因株系均可转录HA... 展开更多; 关键词禽流感病毒血凝素基因拟南芥植物表达蛋白亲和层析纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

人α-防御素-3基因乳腺特异性表达载体的构建及在兔乳腺中的瞬时表达被引量：2: 6; 作者张鹏张勇 +4 位作者赵兴绪李银聚程相朝张春杰吴庭才《湖南农业科学》 2010年第7期152-155,共4页; 为探索人α-防御素-3(HNP-3)基因在兔乳腺中特异性表达的可行性,将HNP-3基因与大鼠乳清酸蛋白(WAP)基因5′端调控区序列融合,定向克隆到PEGFP-1表达载体EGFP基因上游,在EGFP基因3′端加上His标签蛋白基因序列,构建了HNP-3基因乳腺定位... 展开更多; 关键词人α-防御素-3 WAP启动子 Ni亲和层析柱纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大肠癌相关抗原CA-Hb3的提取、亲和层析纯化及其生物学特性被引量：3: 1; 作者胡志伟李小玲周国华朱建高孙去病; 机构湖南医科大学肿瘤研究所免疫生物室; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期363-367,共5页; 基金国家自然科学基金; 文摘方法：应用ＴｒｉｔｏｎＸ１００和正丁醇分别提取了大肠癌组织粗提抗原和大肠癌细胞株ＨＲＴ－１８的ＣＢＥ（正丁醇提取物），二者均有抗原活性。抗原经抗大肠癌单抗Ｈｂ３－亲和层析进一步纯化，获得纯大肠癌相关抗原ＣＡ－Ｈｂ３。结果：经鉴定，ＣＡ－Ｈｂ３为糖蛋白，其抗原活性与糖链有关。其分子量随变性程度而异，变性完全（１００℃巯基乙醇作用５ｍｉｎ）时为５０ｋＤ，而变性不完全（１００℃３ｍｉｎ）约２７ｋＤ，故推测该抗原是由两个亚基（约２７ｋＤ）组成的同源二聚体。结论：在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定蛋白质分子量时。; 关键词大肠肿瘤抗原 CA-Hb3 亲和层析纯化; Keywords Antigen,neoplasm Antigenic determinents Chromatography,affinity Electrophoresis,polyacrylamide gel; 分类号 R735.340.2 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名单克隆抗体亲和层析纯化日本脑炎病毒V_3(E)糖蛋白的研究被引量：2: 2; 作者马文煜于碧云于文彬黄庆生姜绍谆汪美先; 机构第四军医大学微生物学教研室; 出处《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期1-4,共4页; 基金中国科学院科学基金; 文摘本文探讨了用JEV-V_3(E)McAb制备亲和层析柱纯化mg量V_3糖蛋白的方法。结果表明,超声粉碎法裂解病毒囊膜不影响HA活性,而化学裂解剂(NP_(40)、去氧胆酸钠、Tritonx-100)处理病毒原始材料,则导致HA活性的丧失;pH11.5,0.05M二乙胺洗脱剂对V_3的生物学活性影响较少;而3M KSCN对V_3的HA活性有明显影响;用亲和力适中的McAb 2F_2和mC_3亲和层析柱纯化V_3糖蛋白,其HA活性的回收率分别为30～40％及30～60％,蛋白收获量分别为0.33～1.26及0.21～0.66mg,相对HA比活性分别提高3～8倍及8～12倍;经SDS-PAGE考马斯亮蓝染色,显示一条主带,分子量相当于V_3糖蛋白;纯化的V_3糖蛋白可诱导小鼠产生HI抗体及NT抗体。; 关键词糖蛋白日本脑炎病毒亲和层析纯化单克隆抗体 SDS-PAGE Triton 去氧胆酸钠超声粉碎活性影响 McAb HI抗体柱纯化 HA 裂解剂病毒原生物学洗脱剂二乙胺亲和力 mC3 回收率收获量比活性蓝染色 T抗体分子量; 分类号 R373.9 [医药卫生—病原生物学] R373.31 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名睾丸酮丛毛单胞菌的分离和鉴定及3α-羟类固醇脱氢酶在大肠杆菌中的克隆表达被引量：2: 3; 作者张国华丛爱日徐国宾孙立颖严岩夏铁安; 机构北京大学第一医院检验科山东威海文登中心医院; 出处《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期203-206,共4页; 文摘目的:从自然界中分离鉴定产 3α 羟类固醇脱氢酶(3α hydroxysteroiddehydrogenase, 3α HSD)的睾丸酮丛毛单胞菌,并在大肠杆菌(E.coli.)中克隆表达 3α HSD。方法:将池塘泥浆样品接种到以雄酮为唯一碳源的培养基中,对分离到的菌株根据形态学和生理生化特征进行初步鉴定。为进一步鉴定该菌株,根据睾丸酮丛毛单胞菌中的 3α HSD的基因设计引物,PCR扩增细菌基因组DNA,将扩增片段插入到载体pET15b中,构建重组质粒pET15b,并在E.coli. BL21 (DE3 )pLysS中进行诱导表达,对表达得到的蛋白进行鉴定并测定其酶活力。结果:一系列生化反应和培养特征证实,该菌与睾丸酮丛毛单胞菌的符合率为 85%,最适生长pH值为 7. 0,最佳生长温度为 30℃。在E.coli. BL21 (DE3 )pLysS中经诱导表达得到了相对分子质量约为 29×103具有酶活性的融合蛋白,可催化雄酮(3α 羟类固醇)脱氢。结论:从池塘泥浆中分离到一株产 3α HSD的睾丸酮丛毛单胞菌,并在E.coli.中表达得到了具有酶活性的融合 3α HSD。这为利用金属螯和亲和层析纯化融合 3α HSD,并进一步建立以其为工具酶的血清总胆汁酸酶循环测定方法奠定了基础。; 关键词睾丸酮丛毛单胞菌 3α-羟类固醇脱氢酶克隆表达大肠杆菌基因组DNA 相对分子质量亲和层析纯化诱导表达 PCR扩增分离鉴定初步鉴定生化特征设计引物扩增片段重组质粒培养特征生化反应融合蛋白测定方法酶活性; Keywords Comamonas testosteroni Gene,3-alpha hydroxysteroid dehydrogenase Polymerase chain reaction Bile acids; 分类号 R446.5 [医药卫生—诊断学] R446.11 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪卵透明带抗独特型抗体对鼠免疫抗生育作用的研究(摘要): 4; 作者孙晓溪; 机构上海医科大学妇产科研究所生殖免疫研究室; 出处《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 1999年第S1期48-48,共1页; 文摘评价猪卵透明带抗独特型抗体的免疫生育功能的作用。方法利用－株鼠抗猪卵透明带单克隆抗体（１７Ｄ３ｍＡｂ），通过异种动物免疫及亲和层析纯化制备猪卵透明带抗独特型抗体（Ａｂ２）。结果用Ａｂ２免疫小鼠，妊娠率有下降趋势，平均胚胎数明显低于对照组（正常兔ＩｇＧ免疫的小鼠）（Ｐ＜０．０５）。卵巢组织形态显示，Ａｂ２只影响晚期生长卵泡。结论虽然Ａｂ２组对卵巢的损伤程度较热溶解透明带组明显减轻，但抗生育效果不完全，可能与Ａｂ２中内影像结构仅占Ａｂ２分子的成分较低有关。因此，未来通过基因工程筛选Ａｂ２内影像表位并连续表达，可能是克服这一障碍的有效手段。; 关键词抗独特型抗体猪卵透明带抗生育作用动物免疫单克隆抗体内影像亲和层析纯化生殖免疫妊娠率生育功能; 分类号 R [医药卫生]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名禽流感病毒HA基因在拟南芥中的表达被引量：2: 5; 作者张鹏廖玉才黄涛瞿波李和平; 机构华中农业大学生命科学技术学院华中农业大学麦类作物分子生物技术实验室华中农业大学植物科学技术学院; 出处《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期386-389,共4页; 基金国家"863"高技术研究发展专项经费(2007AA100505) 教育部博士点基金(20070504010)资助; 文摘将H5N1亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因构建到植物表达载体,经农杆菌法转入拟南芥基因组中,酶联免疫吸附(ELISA)测定分析T2代转基因株系,据OD值筛选获得HA基因高效表达株系;RT-PCR及Western blot分析进一步证实,这些转基因株系均可转录HA基因,翻译形成相应的蛋白质。拟南芥叶片中表达积累的HA蛋白经亲和层析纯化,Western blot分析检测到1条分子量为65 ku的蛋白质带,与预期的HA蛋白大小完全一致,没有发生蛋白质降解现象。表明禽流感病毒HA蛋白可在植物细胞中稳定表达,植物可用于生产禽流感疫苗。; 关键词禽流感病毒血凝素基因拟南芥植物表达蛋白亲和层析纯化; Keywords avian influenza virus hemagglutinin gene Arabidopsis thaliana protein expression in plants affinity-chromatography purification; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人α-防御素-3基因乳腺特异性表达载体的构建及在兔乳腺中的瞬时表达被引量：2: 6; 作者张鹏张勇赵兴绪李银聚程相朝张春杰吴庭才; 机构甘肃农业大学动物医学院河南科技大学动物科技学院; 出处《湖南农业科学》 2010年第7期152-155,共4页; 基金甘肃省农牧厅生物技术专项(GNSW-2007-04) 甘肃省科技厅科技支撑项目(0708NKCA081) 甘肃省科技厅中小企业创业基金项目(0911CCCA001); 文摘为探索人α-防御素-3(HNP-3)基因在兔乳腺中特异性表达的可行性,将HNP-3基因与大鼠乳清酸蛋白(WAP)基因5′端调控区序列融合,定向克隆到PEGFP-1表达载体EGFP基因上游,在EGFP基因3′端加上His标签蛋白基因序列,构建了HNP-3基因乳腺定位表达载体pEGFP-WAP-HNP-S,将pEGFP-WAP-HNP-S与脂质体包裹后通过乳腺导管注射法转入妊娠母兔乳腺中,Westernblot和ELISA检测HNP-3融合基因在乳腺中表达和融合蛋白的表达水平,并用Ni亲和层析柱进行纯化。结果表明:分娩后初乳中即有分子质量为40kD的HNP-3融合蛋白表达,分娩后第4d达到高峰,表达量为265ng/mL。实验证明HNP-3融合基因在乳腺组织中能够特异性的表达。; 关键词人α-防御素-3 WAP启动子 Ni亲和层析柱纯化; Keywords HNP-3 WAP promoter Ni-NTA affinity chromatography purification; 分类号 S829.1 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	大肠癌相关抗原CA-Hb3的提取、亲和层析纯化及其生物学特性	胡志伟李小玲周国华朱建高孙去病	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	1998	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	单克隆抗体亲和层析纯化日本脑炎病毒V_3(E)糖蛋白的研究	马文煜于碧云于文彬黄庆生姜绍谆汪美先	《单克隆抗体通讯》 CSCD	1989	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	睾丸酮丛毛单胞菌的分离和鉴定及3α-羟类固醇脱氢酶在大肠杆菌中的克隆表达	张国华丛爱日徐国宾孙立颖严岩夏铁安	《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2005	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪卵透明带抗独特型抗体对鼠免疫抗生育作用的研究(摘要)	孙晓溪	《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD	1999	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	禽流感病毒HA基因在拟南芥中的表达	张鹏廖玉才黄涛瞿波李和平	《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	人α-防御素-3基因乳腺特异性表达载体的构建及在兔乳腺中的瞬时表达	张鹏张勇赵兴绪李银聚程相朝张春杰吴庭才	《湖南农业科学》	2010	2	在线阅读下载PDF 职称材料