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肠毒素型大肠杆菌F18菌毛对产蛋鸡免疫的原性
1
作者 由昭红 姜中其 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2009年第6期608-611,共4页
提取猪源肠毒素型大肠杆菌(ETEC)标准株和临床分离株F18菌毛,并制备弗氏佐剂苗,分别免疫产蛋母鸡后用间接ELISA法定期检测母鸡卵黄抗体和血清抗体效价.结果表明:无论标准株还是分离株,F18菌毛对产蛋鸡均具有良好的免疫原性,卵黄抗体效... 提取猪源肠毒素型大肠杆菌(ETEC)标准株和临床分离株F18菌毛,并制备弗氏佐剂苗,分别免疫产蛋母鸡后用间接ELISA法定期检测母鸡卵黄抗体和血清抗体效价.结果表明:无论标准株还是分离株,F18菌毛对产蛋鸡均具有良好的免疫原性,卵黄抗体效价最高可达1∶25600,血清抗体效价高于卵黄抗体效价,最高可达1∶51200. 展开更多
关键词 f18菌毛 产肠毒素型大肠杆菌 免疫原性
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猪肠毒素大肠杆菌(ETEC)F18受体基因型检测报告 被引量：16
2
作者 施启顺 谢新民 +2 位作者 柳小春 黄生强 贺长青 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期656-658,共3页
采用PCR-RFLP法检测了湖南境内大白、长白、杜洛克3品种共158头猪的E.coliF18受体基因型。结果表明,抗性基因型AA的频率为0.11,敏感型AG、GG的频率分别为0.35和0.54。
关键词 猪 肠毒素大肠杆菌 f18受体 基因型 检测报告
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肠毒素型大肠杆菌(ETEC)F18抗原与猪抗病育种的研究进展 被引量：6
3
作者 刘月环 徐宁迎 吴旧生 《上海畜牧兽医通讯》 北大核心 2000年第6期6-8,共3页
关键词 猪 肠毒素型大肠杆菌 f18抗原 致病机理 抗性育
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产肠毒素大肠杆菌F17菌毛黏附亚基单克隆抗体的制备及其抗原表位分析 被引量：6
4
作者 刘嘉利 侯美佳 +4 位作者 赵佳慧 董秀梅 杨巍 张萍 师东方 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1208-1215,共8页
为获得产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F17菌毛黏附亚基G的单克隆抗体(MAb)及其抗原表位信息,本研究通过原核表达系统表达了重组F17-G蛋白(rF17-G-His)并纯化,SDS-PAGE和western blot检测结果显示表达的rF17-G-His大小为53 ku,纯化后条带单一。... 为获得产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F17菌毛黏附亚基G的单克隆抗体(MAb)及其抗原表位信息,本研究通过原核表达系统表达了重组F17-G蛋白(rF17-G-His)并纯化,SDS-PAGE和western blot检测结果显示表达的rF17-G-His大小为53 ku,纯化后条带单一。利用该重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得了F17-G的MAb并制备腹水,采用间接ELISA、SDS-PAGE、western blot、抗体亚类鉴定试剂盒对所获得的MAb进行鉴定。结果显示,获得了3株可稳定分泌MAb的阳性杂交瘤细胞株F2G、C3G、E5G。3株MAb亚类均为IgG1,轻链为κ链,其中MAb F2G效价最高,上清效价为1:2 048,腹水效价为1:1 000 000。3株MAb均不与其他菌毛反应,具有较强的特异性。其中MAb E5G可以有效抑制ETEC DN1502株黏附肠上皮细胞。对MAb识别的抗原表位鉴定和分析结果显示,MAb F2G识别的抗原表位区域是aa1~aa15:1AAVSFIGSTENDVGP15,MAb C3G识别的表位区域是aa211~aa225:211GTTSLKLQCDAGVTV225,二者均为线性表位。MAb E5G识别的是构象表位,且位于凝集素结构域第89位天冬氨酸。采用软件分析F17-G生物学特性,结果显示,F17-G是稳定的亲水性蛋白,aa1~aa15是较活跃的表位区域,aa1~aa15、aa211~aa225在变体F17-G1、F17-G2中较为保守,aa89在3个变体中均高度保守。综合分析后认为MAb E5G具有预防和治疗携带F17菌毛ETEC引发的疾病的潜力。本研究为相应疾病的新型药物、诊断方法和疫苗的研发提供了有效生物制剂和可靠的生物学信息。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 f17菌毛 G亚基 单克隆抗体 抗原表位
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产肠毒素大肠杆菌F4菌毛抗体间接ELISA检测方法的建立 被引量：1
5
作者 杨绪秋 方一臻 +1 位作者 张艳艳 范红结 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期655-658,共4页
为建立检测产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F4菌毛抗体的方法,本研究以纯化的重组F4菌毛蛋白作为检测抗原建立了间接ELISA方法,并对该方法的反应条件进行了优化。确定ELISA最佳条件为:包被抗原浓度为3.5 ng/孔;5%脱脂奶封闭液封闭2 h;血清最佳... 为建立检测产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F4菌毛抗体的方法,本研究以纯化的重组F4菌毛蛋白作为检测抗原建立了间接ELISA方法,并对该方法的反应条件进行了优化。确定ELISA最佳条件为:包被抗原浓度为3.5 ng/孔;5%脱脂奶封闭液封闭2 h;血清最佳稀释度为1∶3 200、血清最佳作用时间为1 h;酶标二抗的最佳作用时间为1 h。该方法对F5、F6菌毛阳性血清和猪链球菌阳性血清无交叉反应,具有良好的特异性。其组内和组间的变异系数均小于10%,具有良好的重复性。利用建立的间接ELISA方法检测血清并采用PCR方法检测其肛拭子进行符合性试验,其总符合率为96.2%。临床检测312份未经ETEC免疫的猪血清,阳性率为9.9%。表明该方法可以用于ETEC F4菌毛抗体的临床检测。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 f4菌毛 间接酶联免疫吸附试验
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利用绿色荧光蛋白标记产肠毒素大肠杆菌F4ac 被引量：1
6
作者 靳荣理 薛鹏翔 +4 位作者 范庆花 马晓云 唐辉 张勤 王文文 《中国动物检疫》 CAS 2023年第3期111-117,共7页
利用电击转化法将表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的原核表达载体pTurboGFP-B转化到产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)F4ac中,获得表达绿色荧光的菌株ETEC F4ac-GFP。聚合酶链式反应(polymeras... 利用电击转化法将表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的原核表达载体pTurboGFP-B转化到产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)F4ac中,获得表达绿色荧光的菌株ETEC F4ac-GFP。聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)结果显示,转化菌株表达绿色荧光蛋白编码基因,且可以在蓝光仪和荧光显微镜下清晰地观察到转化菌株发出绿色荧光;将ETEC F4ac-GFP与IPEC-J2细胞系进行体外粘附试验,在细胞水平验证了转化菌株荧光表达的稳定性与可靠性,且ETEC F4ac导入荧光质粒后不改变其对宿主细胞的胞粘附能力。CCK-8(Cell Counting Kit-8)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果表明,ETEC F4ac导入荧光质粒后不改变其对宿主细胞的毒力。本研究为深入探究ETEC F4ac致病机理提供了工具菌株。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌f4ac 绿色荧光蛋白 粘附 稳定性
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猪源大肠杆菌fedA基因的克隆及鉴定 被引量：1
7
作者 曾庆飞 冉雪琴 +1 位作者 王红珍 王嘉福 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第6期85-86,共2页
关键词 猪源大肠杆菌 肠毒素大肠杆菌 传染性疾病 f18菌毛 鉴定 克隆 基因 断奶仔猪腹泻
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MUC4和MUC13基因在ETECF18抗性型和易感型梅山断奶仔猪间的差异表达分析 被引量：5
8
作者 钦伟云 甘丽娜 +3 位作者 魏宗友 叶兰 包文斌 吴圣龙 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第4期959-964,共6页
MUC4和MUC13基因作为产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coil,ETEC)F4的重要抗性候选基因,可能在断奶仔猪抗ETEC F18菌株的感染过程中发挥重要作用,因此本试验运用实时荧光定量PCR法分析了MUC4和MUC13基因在梅山猪ETEC F18... MUC4和MUC13基因作为产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coil,ETEC)F4的重要抗性候选基因,可能在断奶仔猪抗ETEC F18菌株的感染过程中发挥重要作用,因此本试验运用实时荧光定量PCR法分析了MUC4和MUC13基因在梅山猪ETEC F18抗性型和易感型个体11个组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、肌肉、胸腺、淋巴结、十二指肠和空肠)中的表达水平及差异。结果显示,MUC4和MUC13基因在检测的11个组织中均有不同程度的表达。其中,在胸腺和淋巴组织中,MUC4基因在抗性型个体中的表达水平显著高于易感型个体(P<0.05);在肺脏组织中,MUC13基因在抗性型个体中的表达水平显著高于易感型个体(P<0.05),且MUC13基因在抗性群体肠道中的表达水平较高。由此推测,MUC4基因在免疫组织、MUC13基因在肠道组织的高表达可在一定程度上提高了机体的免疫能力,保护和润滑肠道,从而抵抗ETEC F18菌株对机体的感染。 展开更多
关键词 猪 MUC4基因 MUC13基因 产肠毒素大肠杆菌f18
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黏附素F18菌毛研究进展
9
作者 由昭红 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第18期7664-7666,7715,共4页
综述F18菌毛的一般特性、表达和提取、相关血清型和毒力因子、亚单位及基因调控等。
关键词 仔猪断奶腹泻 f18菌毛 产肠毒素型大肠杆菌
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莱芜黑猪FUTⅠ基因检测及其与生长性能的关系 被引量：2
10
作者 王怀中 沈彦锋 +4 位作者 王继英 郭建凤 张印 王诚 武英 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第8期57-59,共3页
本研究采用PCR-RFLP法对莱芜黑猪FUTⅠ基因M307位点多态性及其与生长性能的关系进行分析。结果表明:莱芜黑猪FUTⅠ基因M307位点均存在丰富的多态性,而且在该突变位点显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.01)。3种基因型对莱芜黑猪的... 本研究采用PCR-RFLP法对莱芜黑猪FUTⅠ基因M307位点多态性及其与生长性能的关系进行分析。结果表明:莱芜黑猪FUTⅠ基因M307位点均存在丰富的多态性,而且在该突变位点显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.01)。3种基因型对莱芜黑猪的初生重、断奶重和70日龄保育重(和断奶仔猪腹泻和水肿病密切相关)等均无显著影响(P>0.05)。本研究结果提示:肠毒素大肠杆菌F18抗性基因有可能起源于西方猪种,对莱芜黑猪无显著影响,有必要对其中所具备的遗传抗性做更深入的研究,寻找、定位其相应的QTL和抗性基因。 展开更多
关键词 肠毒素大肠杆菌f18 fUTⅠ基因 莱芜黑猪 生长性能
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