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产气荚膜梭菌B型C58-1株β1毒素基因的克隆表达 被引量:1
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作者 林初文 张松林 +4 位作者 刘磊 马永彪 韩文瑜 汪洋 沈志强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第2期324-330,共7页
利用PCR技术,从B型产气荚膜梭菌中国标准株C58-1株扩增出β1毒素基因,连接pMD18-T载体筛选阳性克隆,然后用限制性核酸内切酶BamHⅠ和SalⅠ对其进行酶切,回收927bp的β1毒素基因片段,将其定向克隆到载体pET-32a中,获得重组质粒pETβ927。... 利用PCR技术,从B型产气荚膜梭菌中国标准株C58-1株扩增出β1毒素基因,连接pMD18-T载体筛选阳性克隆,然后用限制性核酸内切酶BamHⅠ和SalⅠ对其进行酶切,回收927bp的β1毒素基因片段,将其定向克隆到载体pET-32a中,获得重组质粒pETβ927。将pETβ927转化至受体菌BL21(DE3)中,其表达产物经His-Trap FF预装柱纯化、SDS-PAGE检测目的蛋白大小和分布及Western blotting检测其反应原性。结果表明,完整的β1毒素基因大小为1 011bp,与GenBank发表的B型和C型产气荚膜梭菌β1毒素蛋白序列同源性达99.4%以上;SDS-PAGE结果显示重组目的蛋白在大肠杆菌中成功表达,融合蛋白大小为54ku,在超声波裂解上清和包涵体中均有分布,但以包涵体为主。Western blotting检测结果显示表达的重组蛋白可与特异性血清抗体发生免疫反应,表明β1毒素蛋白具有较好的反应原性。 展开更多
关键词 b中国标准株C58—1株 β1毒素基因 克隆表达
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B型产气荚膜梭菌C58-1株ε毒素基因序列分析与可溶性表达
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作者 林初文 张松林 +3 位作者 刘磊 马永彪 沈志强 韩文瑜 《动物医学进展》 北大核心 2015年第5期29-32,共4页
利用PCR技术从B型产气荚膜梭菌扩增出ε毒素基因,然后用限制性核酸内切酶BamHⅠ和SalⅠ对其进行酶切,回收984bp的ε毒素基因片段,将其定向克隆在载体PET-32a中,获得重组质粒pETε984。将pETε984转化至受体菌BL21(DE3)中。重组菌株经IPT... 利用PCR技术从B型产气荚膜梭菌扩增出ε毒素基因,然后用限制性核酸内切酶BamHⅠ和SalⅠ对其进行酶切,回收984bp的ε毒素基因片段,将其定向克隆在载体PET-32a中,获得重组质粒pETε984。将pETε984转化至受体菌BL21(DE3)中。重组菌株经IPTG诱导后,其表达产物经SDS-PACE分析。结果表明,重组目的蛋白在大肠埃希菌成功表达,融合蛋白大小为51ku,存在于细菌培养上清中,可溶性蛋白占菌体总蛋白相对含量的67.8%。序列分析表明C58-1株ε毒素蛋白序列与目前公布的所有B型和D型产气荚膜梭菌同源性均在99.7%以上,但ε毒素蛋白序列第321位出现了S→Y突变。研究结果为ε毒素蛋白的亚单位疫苗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌b型C58-1株 ε毒素基因 表达 序列分析
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产气荚膜梭菌D型、B型提纯抗原冻干后的保存期与抗原性 被引量:1
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作者 张读朴 乌斯满江 +4 位作者 徐亚萍 朱刚 韩晓岚 黄炯 赵钦 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2004年第F08期59-60,共2页
原生产羊梭菌病灭活疫苗的羊肠毒血症 (产气荚膜梭菌D型 )、羔羊痢疾 (产气荚膜梭菌B型 )冻干干粉85 0 2批 (干粉分别保存 )在 2~ 8℃保存 17年后 ,与 2 0 %铝胶生理盐水配成疫苗 ,以 2、4、6、8和 12mg剂量免疫家兔 ,采血分离血清 ,... 原生产羊梭菌病灭活疫苗的羊肠毒血症 (产气荚膜梭菌D型 )、羔羊痢疾 (产气荚膜梭菌B型 )冻干干粉85 0 2批 (干粉分别保存 )在 2~ 8℃保存 17年后 ,与 2 0 %铝胶生理盐水配成疫苗 ,以 2、4、6、8和 12mg剂量免疫家兔 ,采血分离血清 ,与产气荚膜梭菌D型、B型相应毒素作中和试验 ,测定血清中和效价 ,检验两种干粉的抗原性。结果表明 ,干粉抗原保存 17年后 ,其羔羊痢疾、肠毒血症干粉抗原最小免疫剂量由制出时的 4mg下降为 6mg ,证明B型、D型干粉抗原 6mg免疫剂量所产生的羔羊痢疾、猝狙。 展开更多
关键词 D 产气荚膜梭菌b型 干粉抗原 保存期 抗原性 肠毒血症 痢疾
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B型产气荚膜梭菌对补硒母羊产新生羔羊的攻击试验 被引量:2
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作者 李伟 康承伦 +4 位作者 王兴华 史灯 官却扎西 马明义 康旭 《中兽医医药杂志》 2003年第4期19-20,共2页
采用人工攻击 B型产气荚膜梭菌的方法 ,观察了 B型产气荚膜梭菌对青海三角城羊场补硒羊只的致病性 ,结果表明 ,B型产气荚膜梭菌不引发补硒母羊产新生羔羊的羔羊痢疾。
关键词 b 补硒 致病性 羔羊 痢疾 病原攻击试验
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B型产气荚膜梭菌三种主要毒素基因的PCR检测 被引量:1
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作者 冶贵生 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第13期2873-2874,共2页
为了对B型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens type B)进行快速检测,依据NCBI登录的产气荚膜梭菌α、β及ε毒素基因序列设计引物,并对其进行PCR扩增。琼脂糖凝胶电泳结果显示3个毒素基因均被成功扩增,目标片段条带清晰,长度与预期... 为了对B型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens type B)进行快速检测,依据NCBI登录的产气荚膜梭菌α、β及ε毒素基因序列设计引物,并对其进行PCR扩增。琼脂糖凝胶电泳结果显示3个毒素基因均被成功扩增,目标片段条带清晰,长度与预期相符。 展开更多
关键词 b(Clostridium perfringens type b) Α毒素 Β毒素 ε毒素 PCR
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羔羊痢疾的流行病学、临床特征、剖检变化及其防控 被引量:4
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作者 张敏 《现代畜牧科技》 2019年第12期137-138,共2页
羔羊痢疾是由于感染B型产气荚膜梭菌而发生的一种急性毒血症,主要是小于1周龄的新生羔羊出现发病,其中小于4日龄的羔羊易感性最高,病羔羊主要特征是严重腹泻、小肠存在溃疡。该病急性发生,病程持续时间短,病死率较高,具有明显的季节性,... 羔羊痢疾是由于感染B型产气荚膜梭菌而发生的一种急性毒血症,主要是小于1周龄的新生羔羊出现发病,其中小于4日龄的羔羊易感性最高,病羔羊主要特征是严重腹泻、小肠存在溃疡。该病急性发生,病程持续时间短,病死率较高,具有明显的季节性,一般在气候寒冷和气候多变的时节发生,往往呈地方性流行。如果发病后没有及时进行诊断和采取有效的防治措施,会导致大批羔羊死亡,严重损害养羊业的经济效益。 展开更多
关键词 羔羊 痢疾 b 流行病学 临床症状 剖检变化 药物治疗 免疫
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1例羔羊痢疾的诊治 被引量:1
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作者 张清雄 《养殖与饲料》 2021年第6期102-103,共2页
某山羊养殖户羊舍简陋,对防寒保暖设施建设意识淡薄,在冷空气突袭来临之前未做好分娩母羊舍的保暖,诱导羔羊痢疾的发生,造成部分羔羊因病死亡,影响了羊农养殖经济效益。为有效控制羔羊痢疾的蔓延,制定针对性治疗方案与防控措施,取得显... 某山羊养殖户羊舍简陋,对防寒保暖设施建设意识淡薄,在冷空气突袭来临之前未做好分娩母羊舍的保暖,诱导羔羊痢疾的发生,造成部分羔羊因病死亡,影响了羊农养殖经济效益。为有效控制羔羊痢疾的蔓延,制定针对性治疗方案与防控措施,取得显著治疗效果。 展开更多
关键词 羔羊 b 痢疾 诊断
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