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题名苦荞SSR-PCR反应体系的优化及引物筛选
被引量：10
- 1
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作者
王耀文
夏楠
韩瑞霞
李艳琴
王安虎
蔡光泽
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机构
山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室
西昌学院
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出处
《贵州农业科学》
CAS
北大核心
2011年第4期4-8,共5页
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基金
国家自然科学基金资助项目"苦荞遗传连锁图谱构建及品种资源分析"(30771310)
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文摘
为了保证SSR-PCR的重复性,快速找到最优的水平组合,采用交互正交设计L27(313)对苦荞SSR-PCR反应体系进行了5因素(Mg2+、dNTP、Taq酶、模板DNA和引物)3水平优化试验,并对148对SSR引物进行了筛选。结果表明:5个单因素和2个交互作用(Mg2+×dNTP、Mg2+×Taq酶)对苦荞SSR-PCR均有极显著影响;最佳反应体系为:20μL总体积,Mg2+1 mmol/L,dNTP 0.3 mmol/L,Taq酶1.5 U,模板DNA30 ng,引物0.25μmol/L,10×buffer 2μL。运用该体系对7份苦荞材料进行扩增,电泳结果显示,扩增条带清晰,重复性好。利用148对SSR引物对滇宁一号、九江苦荞、野苦荞进行扩增,选出具有多态性的引物26对,可用于苦荞遗传多样性分析及遗传图谱构建。
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关键词
苦荞
SSR-PCR
交互正交设计
引物筛选
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Keywords
tartary buckwheat
SSR-PCR
interactive orthogonal design
primer selection
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分类号
S519
[农业科学—作物学]
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题名SRAP分子标记用于苦荞分析中的条件优化
被引量：8
- 2
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作者
夏楠
王耀文
韩瑞霞
李艳琴
王安虎
蔡光泽
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机构
山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室
西昌学院
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出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2011年第1期44-48,共5页
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基金
国家自然科学基金项目(30771310)
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文摘
[目的]研究SRAP分子标记用于苦荞分析中的条件优化。[方法]采用交互正交设计L27(313)对苦荞SRAP-PCR反应体系进行了5因素(Mg2+、dNTP、Taq酶、模板DNA和引物)3水平优化筛选,比较了非变性和变性PAGE检测方法,并进行了DYCZ-24F与DYCZ-20C2种电泳操作系统的对比试验。[结果]4个单因素(Mg2+、dNTP、Taq酶和引物)和2个交互作用(Mg2+×dNTP、Mg2+×Taq酶)对苦荞SRAP-PCR有极显著影响;最佳反应体系为:20μl总体积,Mg2+1.5mmol/L,dNTP0.2mmol/L,Taq酶1.5U,模板DNA40ng,引物0.25μmol/L,10×缓冲液2μl。运用该体系对7份苦荞材料进行扩增,扩增条带清晰、多态性高、重复性好。将扩增产物进行非变性与变性PAGE和2种电泳操作系统检测,结果显示非变性PAGE、DYCZ-24F操作系统更适合于SRAP的分析。[结论]为今后构建苦荞SRAP遗传图谱奠定了基础。
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关键词
苦荞
SRAP-PCR
交互正交设计
变性PAGE
非变性PAGE
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Keywords
Fagopyrum tataricum
SRAP-PCR
Interactive orthogonal design
Denaturing PAGE
Non-Denaturing PAGE
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分类号
Q811.9
[生物学—生物工程]
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题名云南红豆杉简并锚定微卫星-PCR反应体系优化研究
被引量：3
- 3
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作者
缪迎春
苏建荣
张志钧
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机构
中国林业科学研究院资源昆虫研究所
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出处
《林业科学研究》
CSCD
北大核心
2007年第6期739-743,共5页
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基金
科技部科研院所公益研究专项项目"濒危植物云南红豆杉的资源及保护技术研究"(2004DIB3J104)
国家科技支撑项目"特种工业原料林培育技术"(2006BAD18B03)的部分研究内容
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文摘
采用交互正交设计L64(421)对濒危植物云南红豆杉简并锚定微卫星-PCR反应体系分别进行了5因素(Taq酶;Mg2+;dNTP;DNA及引物)4水平的优化筛选,SAS软件统计分析表明:3个单因素(Taq酶;Mg2+;dNTP)和2个交互作用(Taq×Mg2+,Mg2+×dNTP)对此反应体系有显著影响作用。云南红豆杉简并锚定微卫星-PCR反应的优化体系是:在20μL反应体系中含有1×PCR buffer,Taq酶4 U,Mg2+(2.0 mmol.L-1),dNTP(0.4 mmol.L-1),DNA75 ng,引物(1.0μmol.L-1),退火温度(54℃)。交互正交设计既能快捷有效地筛选出最佳PCR反应体系,又能揭示试验因素及其交互作用对扩增的影响程度,分析结果更客观、准确,具有一定的应用价值。
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关键词
云南红豆杉
简并锚定微卫星-PCR
反应体系
交互正交设计
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Keywords
Taxus yunnanensis
SSR-anchored PCR
Reaction system
Orthogonal design involving interaction
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分类号
S718.4
[农业科学—林学]
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题名磁力研磨光整加工ZrO_2陶瓷材料试验研究
被引量：17
- 4
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作者
梁伟
张桂香
张鹏
姜林志
秦璞
梁久平
滕潇
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机构
山东理工大学机械工程学院
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出处
《表面技术》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018年第9期310-316,共7页
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基金
国家自然科学基金(51675316)~~
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文摘
目的利用磁力研磨光整加工技术提高ZrO_2陶瓷材料的表面质量,并探究主要工艺参数对ZrO_2陶瓷表面质量的影响规律,得到磁力研磨光整加工陶瓷材料的最优工艺参数组合。方法采用开米字槽的研磨磁极头,利用球形磁性磨料对ZrO_2陶瓷材料进行磁力光整加工。借助XK7136C数控铣床对工件材料进行加工试验,探究其表面改性能力。借助白光干涉仪和扫描电镜对抛光后的表面形貌进行检测分析,采用单因素试验法探究主轴转速、加工间隙、磨料填充量和进给速度对表面粗糙度的影响,并设计合理的交互正交优化试验,寻求最佳的工艺参数组合。结果在磁力研磨光整加工ZrO_2陶瓷材料过程中,当转速S=1000 r/min,加工间隙δ=2.5 mm,磨料填充量m=2.5 g,进给速度v=15 mm/min时,工件平均表面粗糙度可由研磨前的1.950μm下降到0.493μm。通过白光干涉仪和扫描电镜等对材料表面的检测分析可知,加工后工件的表面毛刺大大减少,表面质量得到了改善。结论采用磁力研磨光整加工技术和最佳参数组合,可以有效地降低ZrO_2陶瓷材料的表面粗糙度,得到高质量的表面。
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关键词
磁力研磨
Zr02陶瓷材料
交互正交设计
表面粗糙度
表面质量
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Keywords
MAF
spherical magnetic abrasive
Zr02 ceramics materials
cross orthogonal design
surface roughness
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分类号
TG580.68
[金属学及工艺—金属切削加工及机床]
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