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水稻泛素连接酶D3与抗病相关蛋白VOZ2的互作分析
1
作者
罗英杰
崔维军
+5 位作者
王忠华
吴月燕
林宏友
周洁
严成其
王栩鸣
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2024年第1期9-17,共9页
多蘖矮秆基因dwarf-3(D3)是水稻独脚金内酯信号转导过程中的重要节点基因,拟南芥中的MAX2基因与D3同源,且MAX2参与拟南芥的抗病防卫反应。本研究以水稻泛素连接酶D3为诱饵进行酵母双杂筛库,发现水稻抗病相关蛋白维管植物单锌指蛋白VOZ2...
多蘖矮秆基因dwarf-3(D3)是水稻独脚金内酯信号转导过程中的重要节点基因,拟南芥中的MAX2基因与D3同源,且MAX2参与拟南芥的抗病防卫反应。本研究以水稻泛素连接酶D3为诱饵进行酵母双杂筛库,发现水稻抗病相关蛋白维管植物单锌指蛋白VOZ2与D3存在潜在的相互作用。通过酵母双杂交试验证实,D3与VOZ2存在互作。通过荧光定量PCR证实,接种水稻白叶枯病菌后,VOZ2基因在转录水平上的表达受到显著诱导。利用水稻原生质体开展的亚细胞共定位实验发现,D3与VOZ2共定位于细胞核。双分子荧光互补实验发现,D3与VOZ2在烟草叶肉细胞的细胞核和细胞质均产生较强的荧光,进一步证实了D3与VOZ2的相互作用。研究结果为进一步探究D3和VOZ2在水稻抗病防卫反应中的功能与分子机理奠定了基础。
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关键词
水稻
泛素连接酶D3
维管植物单锌指蛋白VOZ2
蛋白互作
酵母双杂交
亚细胞共定位
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职称材料
羧基末端结合蛋白CtBP2与泛素结合酶UBE2Ⅰ的相互作用
被引量：
1
2
作者
叶晓霞
石彦
+2 位作者
霍克克
陈东
吴民华
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第17期1783-1788,共6页
目的筛选并确定人羧基末端结合蛋白CtBP2的相互作用蛋白。方法用酵母双杂交技术,以人CtBP2为诱饵蛋白筛选人肝cDNA文库,获得与之相互作用的候选蛋白,采用酵母共转化和细胞免疫共沉淀实验确认相互作用的特异性,最后利用荧光蛋白融合表达...
目的筛选并确定人羧基末端结合蛋白CtBP2的相互作用蛋白。方法用酵母双杂交技术,以人CtBP2为诱饵蛋白筛选人肝cDNA文库,获得与之相互作用的候选蛋白,采用酵母共转化和细胞免疫共沉淀实验确认相互作用的特异性,最后利用荧光蛋白融合表达技术和荧光显微镜观察确认CtBP2与其相互作用蛋白的亚细胞共定位情况。结果酵母双杂交筛选获得了41个与Bd-CtBP2相互作用的阳性克隆,编码10个不同的蛋白,其中有4个克隆编码泛素结合酶UBE2Ⅰ的不同片段。从人肝cDNA文库中扩增获得UBE2Ⅰ的全长编码序列,酵母共转化和细胞免疫共沉淀实验证实CtBP2与UBE2Ⅰ能够特异性结合。亚细胞定位研究表明GFP-CtBP2弥散分布于细胞核,DsRed-UBE2Ⅰ不均匀分布于细胞核,有部分点状聚集。两者共转染时能够呈点状共定位于细胞核。结论人CtBP2能够在细胞核内与UBE2Ⅰ特异性相互作用,是UBE2Ⅰ的靶蛋白。
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关键词
羧基末端结合蛋白
酵母双杂交
泛素结合酶UBE2Ⅰ
免疫
共
沉淀
亚细胞共定位
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职称材料
题名
水稻泛素连接酶D3与抗病相关蛋白VOZ2的互作分析
1
作者
罗英杰
崔维军
王忠华
吴月燕
林宏友
周洁
严成其
王栩鸣
机构
浙江万里学院生物与环境学院
浙江省农业科学院农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室
宁波市农业科学研究院生物技术研究所
出处
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2024年第1期9-17,共9页
基金
宁波市科技重大项目(2019B10004,2022Z175)
浙江省重点研发计划(2021C02053)。
文摘
多蘖矮秆基因dwarf-3(D3)是水稻独脚金内酯信号转导过程中的重要节点基因,拟南芥中的MAX2基因与D3同源,且MAX2参与拟南芥的抗病防卫反应。本研究以水稻泛素连接酶D3为诱饵进行酵母双杂筛库,发现水稻抗病相关蛋白维管植物单锌指蛋白VOZ2与D3存在潜在的相互作用。通过酵母双杂交试验证实,D3与VOZ2存在互作。通过荧光定量PCR证实,接种水稻白叶枯病菌后,VOZ2基因在转录水平上的表达受到显著诱导。利用水稻原生质体开展的亚细胞共定位实验发现,D3与VOZ2共定位于细胞核。双分子荧光互补实验发现,D3与VOZ2在烟草叶肉细胞的细胞核和细胞质均产生较强的荧光,进一步证实了D3与VOZ2的相互作用。研究结果为进一步探究D3和VOZ2在水稻抗病防卫反应中的功能与分子机理奠定了基础。
关键词
水稻
泛素连接酶D3
维管植物单锌指蛋白VOZ2
蛋白互作
酵母双杂交
亚细胞共定位
Keywords
rice
ubiquitin ligase D3
vascular plant one-zinc finger protein VOZ2
protein interaction
yeast two-hybrid
subcellular co-localization
分类号
S511 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
羧基末端结合蛋白CtBP2与泛素结合酶UBE2Ⅰ的相互作用
被引量：
1
2
作者
叶晓霞
石彦
霍克克
陈东
吴民华
机构
广东医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室
复旦大学生命科学院遗传研究所
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第17期1783-1788,共6页
基金
广东省卫生厅医学科研基金(B2009192)
广东医学院科研基金(B2009010)~~
文摘
目的筛选并确定人羧基末端结合蛋白CtBP2的相互作用蛋白。方法用酵母双杂交技术,以人CtBP2为诱饵蛋白筛选人肝cDNA文库,获得与之相互作用的候选蛋白,采用酵母共转化和细胞免疫共沉淀实验确认相互作用的特异性,最后利用荧光蛋白融合表达技术和荧光显微镜观察确认CtBP2与其相互作用蛋白的亚细胞共定位情况。结果酵母双杂交筛选获得了41个与Bd-CtBP2相互作用的阳性克隆,编码10个不同的蛋白,其中有4个克隆编码泛素结合酶UBE2Ⅰ的不同片段。从人肝cDNA文库中扩增获得UBE2Ⅰ的全长编码序列,酵母共转化和细胞免疫共沉淀实验证实CtBP2与UBE2Ⅰ能够特异性结合。亚细胞定位研究表明GFP-CtBP2弥散分布于细胞核,DsRed-UBE2Ⅰ不均匀分布于细胞核,有部分点状聚集。两者共转染时能够呈点状共定位于细胞核。结论人CtBP2能够在细胞核内与UBE2Ⅰ特异性相互作用,是UBE2Ⅰ的靶蛋白。
关键词
羧基末端结合蛋白
酵母双杂交
泛素结合酶UBE2Ⅰ
免疫
共
沉淀
亚细胞共定位
Keywords
human C-terminal binding protein 2
yeast two-hybrid
ubiquitin-conjugating enzyme E2Ⅰ
co-immunoprecipitation
subcellular co-localization
分类号
R394.33 [医药卫生—医学遗传学]
R394.3 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
水稻泛素连接酶D3与抗病相关蛋白VOZ2的互作分析
罗英杰
崔维军
王忠华
吴月燕
林宏友
周洁
严成其
王栩鸣
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
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职称材料
2
羧基末端结合蛋白CtBP2与泛素结合酶UBE2Ⅰ的相互作用
叶晓霞
石彦
霍克克
陈东
吴民华
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
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