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植物乳杆菌共轭亚油酸异构酶基因的克隆、序列分析及重组表达
被引量：
5
1
作者
相丽新
曹健
+5 位作者
王红军
尹艳丽
王育军
于海东
张琳
董理
《化学与生物工程》
CAS
2007年第6期48-51,共4页
利用MRS培养基培养植物乳杆菌AS1.555,收集菌体后提取总DNA,用PCR技术扩增其亚油酸异构酶基因,克隆到pQE30质粒载体上,并进行测序。测序结果表明,扩增DNA全长1710 bp,编码569个氨基酸,分子量为64.7 ku。经同源性比较,此核酸序列与罗伊...
利用MRS培养基培养植物乳杆菌AS1.555,收集菌体后提取总DNA,用PCR技术扩增其亚油酸异构酶基因,克隆到pQE30质粒载体上,并进行测序。测序结果表明,扩增DNA全长1710 bp,编码569个氨基酸,分子量为64.7 ku。经同源性比较,此核酸序列与罗伊氏乳杆菌、短双歧杆菌、疮疱丙酸杆菌亚油酸异构酶基因核苷酸序列差别较大,推测此基因的来源与上述菌种不同。
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关键词
植物乳杆菌
亚油酸异构酶基因
克隆
序列分析
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职称材料
植物乳杆菌P-8亚油酸异构酶基因的乳酸克鲁维酵母工程菌的构建
被引量：
1
2
作者
李晨曦
赵国芬
《饲料工业》
北大核心
2016年第6期51-53,共3页
试验旨在构建表达植物乳杆菌P-8亚油酸异构酶基因的酵母工程菌。以植物乳杆菌P-8的基因组DNA为模板,通过PCR扩增亚油酸异构酶基因后,与乳酸克鲁维酵母的表达载体p KLAC1相连;重组质粒电转化至乳酸克鲁维酵母菌CICC1777,经菌落PCR和序列...
试验旨在构建表达植物乳杆菌P-8亚油酸异构酶基因的酵母工程菌。以植物乳杆菌P-8的基因组DNA为模板,通过PCR扩增亚油酸异构酶基因后,与乳酸克鲁维酵母的表达载体p KLAC1相连;重组质粒电转化至乳酸克鲁维酵母菌CICC1777,经菌落PCR和序列分析进行阳性克隆的鉴定。结果表明,成功构建植物乳杆菌P-8亚油酸异构酶基因酵母表达载体和实现在乳酸克鲁维酵母菌的转化。这是首次将P-8亚油酸异构酶基因在乳酸克鲁维酵母中获得表达,为酵母体外表达蛋白研究以及构建高产CLA基因工程菌株和大规模应用在食品工业生产中奠定基础。
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关键词
植物乳杆菌P-8
亚油酸异构酶基因
表达载体
乳酸克鲁维酵母
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职称材料
定向进化植物乳杆菌和痤疮丙酸杆菌高产共轭亚油酸
被引量：
2
3
作者
时旭
刘瑛
+5 位作者
史海粟
武俊瑞
乌日娜
牛雪晴
洛雪
岳喜庆
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021年第12期99-106,共8页
为获得高产共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)的菌株,对亚油酸异构酶系植物乳杆菌的肌球蛋白交叉反应抗原(myosin-cross-reactive antigen,MCRA)基因mcra和痤疮丙酸杆菌的亚油酸异构酶基因lai-p进行克隆,克隆成功后连接到骨架质...
为获得高产共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)的菌株,对亚油酸异构酶系植物乳杆菌的肌球蛋白交叉反应抗原(myosin-cross-reactive antigen,MCRA)基因mcra和痤疮丙酸杆菌的亚油酸异构酶基因lai-p进行克隆,克隆成功后连接到骨架质粒pCold-SUMO上构建两种含mcra基因和lai-p基因的大肠杆菌重组菌株,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷低温诱导阳性重组菌蛋白表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳验证得到目的蛋白表达条带,说明两种基因表达成功。采用易错聚合酶链式反应定向进化mcra基因和lai-p基因,构建重组菌突变体库,利用流式细胞术分选获得吸光度提高和CLA产量提高的重组菌株,其中p Cold-ycmcra-gfp重组菌243株,吸光度最高的为155号菌1.050 6±0.000 4,提高了5.02倍;p Cold-yclai-p-gfp重组菌156株,产量最高的为39号菌(11.62±0.003 6)μg/m L,提高了2.99倍。本研究为后期深入了解突变菌株CLA产量提高的原因,并获得两种亚油酸异构酶的产酶机制奠定了一定基础。
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关键词
亚油酸异构酶基因
易错聚合酶链式反应
重组质粒
流式细胞术
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职称材料
题名
植物乳杆菌共轭亚油酸异构酶基因的克隆、序列分析及重组表达
被引量：
5
1
作者
相丽新
曹健
王红军
尹艳丽
王育军
于海东
张琳
董理
机构
河南工业大学生物工程学院
出处
《化学与生物工程》
CAS
2007年第6期48-51,共4页
基金
河南省杰出青年科学基金项目(04120001800)
河南省高校杰出科研人才创新工程项目(2006KYCX008)
河南省教育厅高等学校创新人才培养工程资助项目
文摘
利用MRS培养基培养植物乳杆菌AS1.555,收集菌体后提取总DNA,用PCR技术扩增其亚油酸异构酶基因,克隆到pQE30质粒载体上,并进行测序。测序结果表明,扩增DNA全长1710 bp,编码569个氨基酸,分子量为64.7 ku。经同源性比较,此核酸序列与罗伊氏乳杆菌、短双歧杆菌、疮疱丙酸杆菌亚油酸异构酶基因核苷酸序列差别较大,推测此基因的来源与上述菌种不同。
关键词
植物乳杆菌
亚油酸异构酶基因
克隆
序列分析
Keywords
Lactobacillus plantarum
linoleic acid isomerase gene
cloning
sequence analysis
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
植物乳杆菌P-8亚油酸异构酶基因的乳酸克鲁维酵母工程菌的构建
被引量：
1
2
作者
李晨曦
赵国芬
机构
内蒙古农业大学生命科学学院
出处
《饲料工业》
北大核心
2016年第6期51-53,共3页
基金
内蒙古自然科学基金[2012MS0409]
文摘
试验旨在构建表达植物乳杆菌P-8亚油酸异构酶基因的酵母工程菌。以植物乳杆菌P-8的基因组DNA为模板,通过PCR扩增亚油酸异构酶基因后,与乳酸克鲁维酵母的表达载体p KLAC1相连;重组质粒电转化至乳酸克鲁维酵母菌CICC1777,经菌落PCR和序列分析进行阳性克隆的鉴定。结果表明,成功构建植物乳杆菌P-8亚油酸异构酶基因酵母表达载体和实现在乳酸克鲁维酵母菌的转化。这是首次将P-8亚油酸异构酶基因在乳酸克鲁维酵母中获得表达,为酵母体外表达蛋白研究以及构建高产CLA基因工程菌株和大规模应用在食品工业生产中奠定基础。
关键词
植物乳杆菌P-8
亚油酸异构酶基因
表达载体
乳酸克鲁维酵母
Keywords
Lactobacillus.P.P-8
linoleic acid isomerase gene
expression vector
Kluyveromyces lacti
分类号
S816.3 [农业科学—饲料科学]
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职称材料
题名
定向进化植物乳杆菌和痤疮丙酸杆菌高产共轭亚油酸
被引量：
2
3
作者
时旭
刘瑛
史海粟
武俊瑞
乌日娜
牛雪晴
洛雪
岳喜庆
机构
沈阳农业大学食品学院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021年第12期99-106,共8页
基金
国家自然科学基金青年科学基金项目(31701623)
沈阳农业大学2019年大学生创新创业训练计划项目(201910157057)。
文摘
为获得高产共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)的菌株,对亚油酸异构酶系植物乳杆菌的肌球蛋白交叉反应抗原(myosin-cross-reactive antigen,MCRA)基因mcra和痤疮丙酸杆菌的亚油酸异构酶基因lai-p进行克隆,克隆成功后连接到骨架质粒pCold-SUMO上构建两种含mcra基因和lai-p基因的大肠杆菌重组菌株,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷低温诱导阳性重组菌蛋白表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳验证得到目的蛋白表达条带,说明两种基因表达成功。采用易错聚合酶链式反应定向进化mcra基因和lai-p基因,构建重组菌突变体库,利用流式细胞术分选获得吸光度提高和CLA产量提高的重组菌株,其中p Cold-ycmcra-gfp重组菌243株,吸光度最高的为155号菌1.050 6±0.000 4,提高了5.02倍;p Cold-yclai-p-gfp重组菌156株,产量最高的为39号菌(11.62±0.003 6)μg/m L,提高了2.99倍。本研究为后期深入了解突变菌株CLA产量提高的原因,并获得两种亚油酸异构酶的产酶机制奠定了一定基础。
关键词
亚油酸异构酶基因
易错聚合酶链式反应
重组质粒
流式细胞术
Keywords
linoleic acid isomerase gene
error-prone polymerase chain reaction
recombinant plasmid
flow cytometry
分类号
TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
植物乳杆菌共轭亚油酸异构酶基因的克隆、序列分析及重组表达
相丽新
曹健
王红军
尹艳丽
王育军
于海东
张琳
董理
《化学与生物工程》
CAS
2007
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
植物乳杆菌P-8亚油酸异构酶基因的乳酸克鲁维酵母工程菌的构建
李晨曦
赵国芬
《饲料工业》
北大核心
2016
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
定向进化植物乳杆菌和痤疮丙酸杆菌高产共轭亚油酸
时旭
刘瑛
史海粟
武俊瑞
乌日娜
牛雪晴
洛雪
岳喜庆
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
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职称材料
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