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氯霉素处理对大鼠脑皮质细胞色素氧化酶亚基表达协调性的影响
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作者 宋熔 柳君泽 陈丽峰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1382-1385,共4页
目的 通过应用线粒体蛋白合成特异抑制剂氯霉素(CAP)处理后 ,观察大鼠脑皮质线粒体COX亚基Ⅰ和Ⅳ以及线粒体转录因子 (mtTFA)、核呼吸因子 1(NRF 1)等相关转录调控因子的基因表达改变 ,以了解在特异性阻断线粒体蛋白翻译后细胞核与线... 目的 通过应用线粒体蛋白合成特异抑制剂氯霉素(CAP)处理后 ,观察大鼠脑皮质线粒体COX亚基Ⅰ和Ⅳ以及线粒体转录因子 (mtTFA)、核呼吸因子 1(NRF 1)等相关转录调控因子的基因表达改变 ,以了解在特异性阻断线粒体蛋白翻译后细胞核与线粒体基因组在转录与翻译水平上的变化 ,探讨mtDNA与nDNA组之间的相互关系。方法 成年♂Wistar系大鼠分为对照组和药物处理组 ,药物处理连续7d腹腔注射 0 5 %CAP ,10 0mg·kg-1,1次 / 12h。RT PCR分析脑组织COXI、COXIV、NRF 1及mtTFAmRNA水平 ,Westernblot分析脑组织线粒体COXI、COXIV及组织NRF 1蛋白。结果 CAP组脑线粒体COX亚基Ⅰ蛋白含量降低(P <0 0 5 ) ,COXⅣ /COXⅠ比值增高 ,COXImRNA水平以及COXIVmRNA与蛋白水平均无改变 (P >0 0 5 )。同时 ,mtTFA的mRNA以及NRF 1的mRNA及蛋白含量与对照组比较均无差异。结论 线粒体内COXⅠ蛋白水平的变化对mtDNA的转录不存在反馈调节机制 ,而且线粒体基因组对细胞核基因组也没有可观察到的反馈效应。 展开更多
关键词 细胞色素氧化酶 氯霉素 线粒体 亚基表达
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鼠白细胞介素-12双亚基共表达质粒的构建及在体内外的表达 被引量:3
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作者 陈玮 邵传森 +6 位作者 沈建根 鲍建芳 潘建平 韩伟 寿林 项哨 郑树 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2002年第1期15-18,共4页
目的 :构建双亚基共表达鼠白细胞介素 - 12 (m IL- 12 )真核表达质粒 ,并观察其在体内外的表达。方法 :将m IL - 12 p35和 p4 0全长编码 c DNA构建在 pc DN A 3.1载体上 ,然后把 p35表达单元 (CMV- p35 - BGH PA)插入pc DNA 3.1/ p4 0载... 目的 :构建双亚基共表达鼠白细胞介素 - 12 (m IL- 12 )真核表达质粒 ,并观察其在体内外的表达。方法 :将m IL - 12 p35和 p4 0全长编码 c DNA构建在 pc DN A 3.1载体上 ,然后把 p35表达单元 (CMV- p35 - BGH PA)插入pc DNA 3.1/ p4 0载体 ,使两个目的基因均受各自的启动子 CMV控制 ,构建成 m IL - 12双亚基共表达质粒 p Cm IL -12 ,并进行体内外表达。结果 :p Cm IL - 12在体外转染 COS- 7细胞后 ,经 EL ISA证实有 m IL- 12表达 ,其表达上清能在体外明显增强小鼠 NK细胞活性。小鼠皮内注射 p Cm IL - 12亦能增强小鼠 NK细胞活性。结论 :所构建的质粒在体内外均能表达有生物学活性的 m IL- 展开更多
关键词 白细胞介素-12 生物合成 质粒 基因表达 MIL-12 天然杀伤细胞 遗传载体 分子克隆 亚基表达 小鼠
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听源性惊厥大鼠惊厥后NMDA受体NR1亚基蛋白表达和功能研究
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作者 罗强 赵世刚 吴希如 《河南医科大学学报》 北大核心 2001年第4期397-400,共4页
目的 :探讨惊厥后大脑皮质N 甲基 D 门冬氨酸 (NMDA)受体亚基NR1蛋白表达及其功能改变与癫痫发病机制的关系。方法 :P77PMC大鼠按惊厥后不同时间随机分为 6组 ,免疫组化每组 6个样本 ,配基结合实验每组 5个样本 ,制备大脑冰冻切片和大... 目的 :探讨惊厥后大脑皮质N 甲基 D 门冬氨酸 (NMDA)受体亚基NR1蛋白表达及其功能改变与癫痫发病机制的关系。方法 :P77PMC大鼠按惊厥后不同时间随机分为 6组 ,免疫组化每组 6个样本 ,配基结合实验每组 5个样本 ,制备大脑冰冻切片和大脑皮质突触膜。利用免疫组化技术 ,观察听源性癫痫易感大鼠P77PMC惊厥后不同时间NR1亚基蛋白的表达 ,应用配基结合实验观察听源性惊厥大鼠P77PMC惊厥后大脑皮质突触膜对3H MK80 1的结合改变 ,以及NMDA受体激动剂对其结合的影响。结果 :大脑皮质在惊厥后 4hNR1蛋白表达即开始增加 ,2 4~48h达高峰。反应体系中无任何NMDA受体激动剂时 ,惊厥后大脑皮质突触膜对 3H MK80 1的结合有增加趋势 ,但差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;当反应液中加入NMDA受体激动剂时 ,惊厥后大脑皮质突触膜对 3H MK80 1的结合明显增加 ,除惊厥后 4h与正常对照组比较差异无显著性外 ,其他惊厥后各时间点与正常对照组比较差异均有显著性(P <0 0 1)。结论 :听源性惊厥大鼠P77PMC惊厥后 ,大脑皮质NMDA受体NR1亚基蛋白表达增加 ,NMDA受体对其激动剂的敏感性增加 ,提示NR1亚基参与了P77PMC大鼠惊厥的发生与发展 ; 展开更多
关键词 癫痫 N-甲基-D-门冬氨酸受体 NR1亚基蛋白表达 配基结合实验 听源性惊厥 大鼠
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