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亚低温对大鼠短暂性全脑缺血后皮质NOS亚型表达及神经元凋亡的影响 被引量:3
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作者 陈龙飞 刘昌云 +1 位作者 黄艮彬 许国英 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2004年第6期359-365,共7页
目的观察亚低温对大鼠全脑缺血再灌注后皮质3种一氧化氮合酶亚型表达、一氧化氮产生以及神经元凋亡的影响,探讨亚低温的神经保护机制。方法成年雄性SD大鼠,采用双侧颈总动脉阻断闭塞+低血压法制备短暂性全脑缺血动物模型,随机分为常温... 目的观察亚低温对大鼠全脑缺血再灌注后皮质3种一氧化氮合酶亚型表达、一氧化氮产生以及神经元凋亡的影响,探讨亚低温的神经保护机制。方法成年雄性SD大鼠,采用双侧颈总动脉阻断闭塞+低血压法制备短暂性全脑缺血动物模型,随机分为常温缺血组、亚低温缺血组和常温假手术对照组;常温时的脑温为36.5℃~37.5℃,肛温为35.9℃~36.9℃;亚低温时控制在32.5℃~33.5℃,相对应肛温为32.2℃~33.1℃;分别于缺血后及亚低温治疗后30min、2h、24h和72h观察短暂缺血对脑组织一氧化氮合酶亚型表达及神经元凋亡的影响,以及亚低温对缺血性脑损伤的保护作用。行神经元尼氏体亚甲蓝染色观察神经元数目及形态学的变化;免疫组化染色检测神经元型、诱导型和内皮型一氧化氮合酶的表达水平;应用硝酸还原酶法检测硝酸盐/亚硝酸盐水平的变化;采用TUNEL染色法并结合电子显微镜观察神经元凋亡的变化。结果常温缺血组大鼠额叶皮质3种一氧化氮合酶亚型表达水平及硝酸盐/亚硝酸盐含量均明显高于常温假手术对照组(P<0.05或P<0.01),出现凋亡神经元;低温缺血组大鼠3种一氧化氮合酶亚型表达水平和硝酸盐/亚硝酸盐含量明显低于常温缺血组(P<0.05或P<0.01),未检测到凋亡神经元。结论脑缺血后一氧化氮参与了神经元的凋亡过程。 展开更多
关键词 亚型表达 亚低温治疗 短暂性全脑缺血 神经元凋亡 大鼠 一氧化氮合酶 观察 皮质 对照组 NOS
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成人成骨细胞和MG-63细胞株孕激素受体的表达 被引量:2
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作者 梁敏 廖二元 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2004年第4期412-414,408,共4页
目的 观察成人成骨细胞和MG-63细胞株孕激素受体(progesterone receptor,PR)亚型表达的情况。方法用改良胶原酶消化法从正常成人松质骨中分离成骨细胞,观察细胞形态,钙钴法行碱性磷酸酶染色,Van Gieson法行Ⅰ型胶原染色,茜素红行矿化结... 目的 观察成人成骨细胞和MG-63细胞株孕激素受体(progesterone receptor,PR)亚型表达的情况。方法用改良胶原酶消化法从正常成人松质骨中分离成骨细胞,观察细胞形态,钙钴法行碱性磷酸酶染色,Van Gieson法行Ⅰ型胶原染色,茜素红行矿化结节染色;半定量RT-PCR检测骨钙素和PR亚型mRNA表达;Western blot测定PR蛋白质表达。结果所分离培养的细胞具有成骨细胞的形态特征,保持了其在体内的功能;人成骨细胞和MG-63细胞株均表达PRA、PRB mRNA和蛋白质。结论人成骨细胞和MG-63细胞株可能受孕激素的影响。 展开更多
关键词 人成骨细胞 MG-63细胞 孕激素受体 亚型表达 PR 细胞株 观察 正常成人 白质 mRNA表达
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大鼠背根神经节P2Y1与P2Y4嘌呤受体的表达比较 被引量:1
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作者 谢辉 李之望 +1 位作者 章伟文 陈宏 《实用医学杂志》 CAS 2005年第8期790-791,共2页
目的:探讨P2Y1和P2Y4亚基在大鼠背根神经节(D R G)神经元的表达。方法:应用组织水平和多细胞水平R T-PC R方法从不同角度检测了P2Y1和P2Y4受体的表达情况。结果:两种R T-PC R扩增结果均显示:P2Y1亚型有特异性表达阳性条带出现,而P2Y4亚... 目的:探讨P2Y1和P2Y4亚基在大鼠背根神经节(D R G)神经元的表达。方法:应用组织水平和多细胞水平R T-PC R方法从不同角度检测了P2Y1和P2Y4受体的表达情况。结果:两种R T-PC R扩增结果均显示:P2Y1亚型有特异性表达阳性条带出现,而P2Y4亚型则无特异性表达条带出现。结论:大鼠D R G的大、中、小细胞中均有P2Y1亚型表达,而无P2Y4亚型的表达。 展开更多
关键词 背根神经节 嘌呤受体 大鼠 表达 RT-PCR方法 RT-PCR扩增 特异性表达 表达情况 不同角度 细胞水平 阳性条带 亚型表达 神经元 DRG 小细胞 出现
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蛋白激酶Cα、δ和ε亚型与缺血/运动预处理研究进展
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作者 马治云 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1136-1143,共8页
1986年Murry等[1]发现,预先给予狗心脏几次短暂的缺血再灌注处理,会使其心肌对随后长时间缺血损伤的耐受性增强,这种现象称为缺血预处理(ischemic preconditioning,Ip)[2-4].由运动诱导的IP样心肌保护效应,称为运动预处理(exercisepr... 1986年Murry等[1]发现,预先给予狗心脏几次短暂的缺血再灌注处理,会使其心肌对随后长时间缺血损伤的耐受性增强,这种现象称为缺血预处理(ischemic preconditioning,Ip)[2-4].由运动诱导的IP样心肌保护效应,称为运动预处理(exercisepreconditioning,Ep)[5-7].EP具有与IP类似的保护效应和信号转导通路[s,s-13],但具体机制尚不清楚.在各种预处理效应机制中,蛋白激酶C (protein kinase C,PKC) α、δ和ε亚型是中介环节的关键点.在EP现象中,PKCα、δ和ε亚型表达和分布变化以及三者的交互作用(Cross-Talk)对EP效应的最终产生有重要影响.本文对蛋白激酶Cα、δ和ε亚型及其交互作用在缺血预处理和运动预处理心肌保护作用中的变化及可能机制进行综述. 展开更多
关键词 蛋白激酶CΑ 运动预处理 缺血再灌注 亚型表达 心肌保护作用 缺血预处理 信号转导通路 保护效应
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hβ-arrestin1重组蛋白不同亚型筛选及互作鉴定
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作者 刘彩红 王利利 +1 位作者 冯艳玲 朱亚勤 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期24-27,共4页
目的构建GST/β-arrestin1融合蛋白表达载体,筛选其不同亚型重组子,并诱导表达、纯化蛋白,初步进行蛋白亚型互作比较,为进一步功能研究提供实验基础。方法提取人源细胞的mRNA,反转录为cDNA。用PCR法扩增hβ-arrestin1全长编码基因,通过S... 目的构建GST/β-arrestin1融合蛋白表达载体,筛选其不同亚型重组子,并诱导表达、纯化蛋白,初步进行蛋白亚型互作比较,为进一步功能研究提供实验基础。方法提取人源细胞的mRNA,反转录为cDNA。用PCR法扩增hβ-arrestin1全长编码基因,通过SalI和NotI酶切位点将hβ-arrestin1全长定向插入pGEX-5X-1中,构建原核表达载体pGEX-5X-1-β-arrestin1,并通过BglⅡ单酶切筛选A、B亚型,然后将重组质粒转入E.coli BL21中,异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,用谷胱甘肽-琼脂糖珠亲和纯化表达的GST/β-arrestin1A、B,SDS-PAGE鉴定,互作实验比较亚型的结合能力。结果酶切及测序结果证明,成功构建了β-arrestin1A、B原核表达载体,并通过SDS-PAGE证实:经IPTG诱导表达及亲和纯化,从转化重组质粒的BL21菌株中获得了融合蛋白GST/β-arrestin1A、B亚型,通过GST Pulldown初步比较了重组β-arrestin1A、B蛋白亚型的结合能力。结论成功构建pGEX-5X-1-β-arrestin1A、B原核表达载体并确定了融合蛋白的诱导表达及纯化方法,且互作实验显示β-arrestin1A有较强的结合能力,为进一步研究β-arrestin1的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 hβ—arrestin1 克隆 重组亚型表达 蛋白互作
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大鼠耳蜗组织中Nedd4及SGK1的表达 被引量:1
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作者 钟时勋 刘兆华 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期369-372,共4页
目的研究大鼠耳蜗组织中神经前体细胞表达-发育性下调基因亚型(neural precursor cell-ex-pressed,developmentally downregulated isoforms,Nedd4)及血清糖皮质激素诱导激酶1(serum glucocorticoid-in-ducible kinase1,SGK1)蛋白分子... 目的研究大鼠耳蜗组织中神经前体细胞表达-发育性下调基因亚型(neural precursor cell-ex-pressed,developmentally downregulated isoforms,Nedd4)及血清糖皮质激素诱导激酶1(serum glucocorticoid-in-ducible kinase1,SGK1)蛋白分子的表达。方法选取健康Wistar大鼠8只,用特异性多克隆兔抗鼠Nedd4-1/2、Nedd4-2及SGK1抗体,采用免疫组化法研究大鼠耳蜗组织中Nedd4-1/2、Nedd4-2及SGK1蛋白的表达模式。结果Nedd4-1/2、Nedd4-2及SGK1蛋白广泛表达于大鼠耳蜗组织的各个区域中,包括血管纹、螺旋韧带、Corti器、螺旋缘、螺旋神经节、前庭膜等处。结论在耳蜗组织中,存在一个由SGK1、Nedd4和上皮钠通道(ENaC)组成的Na+转运系统,它们协同作用转运Na+,从而保持内耳内环境的稳定。 展开更多
关键词 内淋巴 耳蜗 血清糖皮质激素诱导激酶1 神经前体细胞表达-发育性下调基因亚型
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金雀黄素对子宫内膜癌细胞ERα和ERβmRNA水平的调节 被引量:7
7
作者 薛晓鸥 魏丽惠 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期278-280,共3页
目的:研究金雀黄素对子宫内膜癌细胞ERα,ERβmRNA的调节作用,探讨植物雌激素对子宫内膜癌的作用机制,为临床应用植物雌激素提供理论依据。方法:体外培养子宫内膜癌细胞系Ishikawa,采用实时荧光定量RT PCR方法,观察不同剂量金雀黄素对... 目的:研究金雀黄素对子宫内膜癌细胞ERα,ERβmRNA的调节作用,探讨植物雌激素对子宫内膜癌的作用机制,为临床应用植物雌激素提供理论依据。方法:体外培养子宫内膜癌细胞系Ishikawa,采用实时荧光定量RT PCR方法,观察不同剂量金雀黄素对两种雌激素亚型表达的影响,阳性对照为雌二醇、孕酮作用组。结果: (1)低剂量金雀黄素能提高子宫内膜癌细胞ERαmRNA表达,但其作用较雌二醇明显弱;低剂量金雀黄素能降低ERβmRNA的表达,而雌二醇对ERβmRNA作用不明显。(2)高剂量金雀黄素的作用与孕酮相似,能下调子宫内膜癌细胞ERαmRNA和ERβmRNA表达,但较孕酮作用弱。结论:金雀黄素对子宫内膜癌细胞ERαmRNA和ERβmRNA的表达作用不同,而且与其剂量有一定关系。推测金雀黄素有雌激素受体调节剂的作用。 展开更多
关键词 金雀黄素 ERΒ MRNA水平 ERΑ 定量RT-PCR方法 雌激素受体调节剂 mRNA表达 植物雌激素 ΑMRNA 子宫内膜癌 雌二醇 调节作用 作用机制 临床应用 癌细胞系 体外培养 实时荧光 亚型表达 不同剂量 阳性对照 表达作用 低剂量
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IL-6上调CaV3.2 T型钙离子通道参与神经病理性疼痛的机制研究 被引量:3
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作者 Liu 刘风雨 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期250-250,共1页
T型钙离子通道(低电压激活钙离子通道),在接近神经元静息电位时开放,参与神经元动作电位的后去极化电位以及膜电位振荡形成,影响神经元兴奋性。T型钙离子通道有三种亚型:CaV3.1、CaV3.2和CaV3.3。以往研究表明,在外周背根神经节(DRG)神... T型钙离子通道(低电压激活钙离子通道),在接近神经元静息电位时开放,参与神经元动作电位的后去极化电位以及膜电位振荡形成,影响神经元兴奋性。T型钙离子通道有三种亚型:CaV3.1、CaV3.2和CaV3.3。以往研究表明,在外周背根神经节(DRG)神经元中,CaV3.2亚型表达最丰富。本文采用L5脊神经结扎(SNL)模型,深入探讨CaV3.2通道在神经病理性疼痛中的作用。 展开更多
关键词 神经病理性疼痛 钙离子通道 IL-6 T型 神经元兴奋性 亚型表达 膜电位振荡 背根神经节
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