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一种同时检测沙门氏菌属及肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌的五重荧光PCR方法的建立
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作者 傅彩霞 栗云鹏 +5 位作者 刘海莹 张启龙 张玮 李志军 刘晓冬 周德刚 《中国家禽》 北大核心 2025年第10期52-59,共8页
为建立一种同时检测沙门氏菌属及肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌的五重荧光PCR方法,研究根据沙门氏菌属invA基因、肠炎沙门氏菌SdfⅠ基因、鼠伤寒沙门氏菌STM4495基因、鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌s... 为建立一种同时检测沙门氏菌属及肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌的五重荧光PCR方法,研究根据沙门氏菌属invA基因、肠炎沙门氏菌SdfⅠ基因、鼠伤寒沙门氏菌STM4495基因、鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌speC基因及鸡伤寒沙门氏菌glgC基因设计5组特异性引物和探针,通过引物探针组的交叉验证和反应体系优化建立五重荧光PCR反应体系,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行评估和临床样品检测。结果显示:建立的五重荧光PCR检测方法可特异性地鉴定出沙门氏菌属及肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌;对5个基因的检测限分别为0.01pg/µL(invA)、0.1 pg/µL(SdfⅠ)、0.1 pg/µL(STM4495)、0.01 pg/µL(speC)、0.01 pg/µL(glgC),灵敏度高,重复检测稳定性好;对100份临床样品的检测结果显示,沙门氏菌五重荧光PCR与常规PCR均检出沙门氏菌10株,并且对4种血清型沙门氏菌的检测结果也完全一致。研究表明,建立的五重荧光PCR方法不仅可以从属的水平准确检测沙门氏菌,还能够同时鉴定出肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌,具有快速、特异、敏感、稳定等优点,可用于禽沙门氏菌病的临床诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 沙门氏菌 肠炎沙门氏菌 鼠伤寒沙门氏菌 鸡白痢沙门氏菌 鸡伤寒沙门氏菌 五重荧光pcr
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