期刊文献+
共找到110篇文章
< 1 2 6 >
每页显示 20 50 100
竞争性逆转录-聚合酶链反应对哮喘患者诱导痰白细胞介素-10基因表达的定量分析 被引量:1
1
作者 何梦璋 梁剑辉 徐军 《医学研究生学报》 CAS 2007年第1期49-52,共4页
目的:建立竞争性逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量方法,监测哮喘患者白细胞介素-10(IL-10)基因的表达水平,探讨IL-10在哮喘气道炎症中的作用和临床意义。方法:用酶切法构建IL-10内标分子,用已知量的该内标分子,通过竞争性RT-PCR对哮喘组... 目的:建立竞争性逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量方法,监测哮喘患者白细胞介素-10(IL-10)基因的表达水平,探讨IL-10在哮喘气道炎症中的作用和临床意义。方法:用酶切法构建IL-10内标分子,用已知量的该内标分子,通过竞争性RT-PCR对哮喘组(30例)和对照组(29例)的诱导痰和外周血IL-10 mRNA进行定量分析。结果:哮喘发作期患者的诱导痰和外周血绝大多数未检测到IL-10 mRNA,部分缓解期患者有少量IL-10 mRNA表达。健康对照者外周血和诱导痰均有IL-10 mRNA表达。结论:哮喘患者的气道炎症过程与IL-10基因表达有关,且存在IL-10转录水平的合成障碍。 展开更多
关键词 竞争性逆转录-聚合反应 白细胞介素-10 支气管哮喘
在线阅读 下载PDF
无精子症患者Y染色体序列标签位点-聚合酶链反应与二代测序检测的比较 被引量:1
2
作者 张帆 刘永杰 代良 《临床检验杂志》 CAS 2021年第5期350-353,共4页
目的观察无精子症患者Y染色体序列标签位点-聚合酶链反应(STS-PCR)与二代测序(NGS)检测的差异。方法对133例无精子症患者,采用STS-PCR检测Y染色体AZF微缺失的15个STS位点,包括AZF a区的sY84/sY86、AZF b区的sY124/sY127/sY128/sY133/sY1... 目的观察无精子症患者Y染色体序列标签位点-聚合酶链反应(STS-PCR)与二代测序(NGS)检测的差异。方法对133例无精子症患者,采用STS-PCR检测Y染色体AZF微缺失的15个STS位点,包括AZF a区的sY84/sY86、AZF b区的sY124/sY127/sY128/sY133/sY134/sY143/sY1192、AZF c区的sY152/sY239/sY242/sY254/sY255、AZF b/c区的sY145,同时采用NGS检测Y染色体基因组拷贝数变异(CNVs),并统计分析两种检测方法的差异。结果133例无精子症患者中,Y染色体AZF微缺失异常17例(12.78%),其中缺失14个STS 1例,占5.88%;缺失12个STS 3例,占17.65%;缺失11个STS 1例,占5.88%;缺失6个STS 1例,占5.88%;缺失5个STS 1例,占5.88%;缺失4个STS 2例,占11.76%;缺失2个STS 1例,占5.88%;缺失1个STS 7例,占41.18%。Y染色体CNVs异常12例(9.02%),其中既重复又缺失3例,占25%;重复(dup)4例,占33.33%;缺失(del)5例,占41.67%。Y染色体AZF(15个STS)微缺失的结果与CNVs缺失结果相比,差异有统计学意义(P<0.05),而Y染色体AZF(经典6个STS)微缺失的结果与CNVs缺失结果相比,差异无统计学意义(P=0.357)。结论STS-PCR和NGS互有补充,前者不能检测出重复,后者可能漏检小片段缺失。在无精子症遗传因素的实验室检查中,可以考虑采用NGS作为筛选,而采用STS-PCR作为验证。 展开更多
关键词 序列标签位点-聚合反应 代测序 无精子因子 拷贝数变异 Y染色体
在线阅读 下载PDF
H5亚型和N6亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立 被引量:2
3
作者 何莹 谢芝勋 +8 位作者 罗思思 李孟 谢志勤 谢丽基 黄莉 邓显文 黄娇玲 张艳芳 曾婷婷 《动物医学进展》 北大核心 2017年第3期1-4,共4页
为了建立一种快速、简便的H5亚型、N6亚型禽流感病毒(AIV)的检测方法,根据GenBank中H5亚型、N6亚型AIV的HA和NA基因保守序列,分别设计了2对特异性引物,通过优化条件,建立了H5亚型和N6亚型AIV二重RT-PCR检测方法。特异性试验结果显示,该... 为了建立一种快速、简便的H5亚型、N6亚型禽流感病毒(AIV)的检测方法,根据GenBank中H5亚型、N6亚型AIV的HA和NA基因保守序列,分别设计了2对特异性引物,通过优化条件,建立了H5亚型和N6亚型AIV二重RT-PCR检测方法。特异性试验结果显示,该方法对H5N6亚型AIV特异性扩增出418bp和251bp目的片段,对H5Ny(y≠6)亚型AIV扩增出418bp目的片段,对HxN6(x≠5)亚型AIV扩增出251bp目的片段,对其他亚型和常见的禽病病原体均未扩增出目的片段;敏感性结果显示,该方法对H5亚型和N6亚型最低检测限为1.59×10-5ng/μL。本研究建立的H5亚型和N6亚型AIV检测方法,具有特异性强,灵敏度高的特点,为H5亚型和N6亚型AIV临床检测以及防控提供了有效方法。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H5亚型 N6亚型 二重逆转录-聚合酶链反应
在线阅读 下载PDF
H9亚型禽流感病毒和禽肺病毒二重RT-PCR检测方法的建立 被引量:1
4
作者 谢志勤 谢芝勋 +11 位作者 范晴 邓显文 谢丽基 罗思思 黄莉 黄娇玲 张艳芳 王盛 张民秀 奉彬 刘加波 庞耀珊 《动物医学进展》 北大核心 2016年第12期7-12,共6页
根据GenBank中H9亚型禽流感病毒HA基因和禽肺病毒F基因的保守序列,通过Blast进行比对,在各自保守的基因序列中分别设计了两对特异性扩增引物,引物扩增的片段大小分别为569bp和424bp,应用这两对引物建立了H9亚型禽流感病毒和禽肺病毒的二... 根据GenBank中H9亚型禽流感病毒HA基因和禽肺病毒F基因的保守序列,通过Blast进行比对,在各自保守的基因序列中分别设计了两对特异性扩增引物,引物扩增的片段大小分别为569bp和424bp,应用这两对引物建立了H9亚型禽流感病毒和禽肺病毒的二重RT-PCR检测方法,对建立的方法进行了特异性试验、敏感性试验和临床样品验证。对检测为阳性的样品进行克隆和序列分析,以验证本方法的准确性。特异性试验结果表明,所有参试的H9亚型禽流感病毒都能扩增出大小为569bp的片段,参试的禽肺病毒毒株扩增出424bp的片段,没有其他条带出现,而对照的参试毒株在569bp和424bp处没有任何条带;敏感性试验结果表明,本试验建立的方法能检测到10pg的H9亚型禽流感病毒和禽肺病毒RNA模板。应用本试验建立的方法对广西采集的病鸡样品132份进行检测,H9亚型禽流感病毒阳性的样品有6份,禽肺病毒阳性的样品2份;随机各挑取2份H9亚型禽流感病毒和禽肺病毒阳性PCR产物进行克隆和序列分析,经比对分析,2份H9亚型禽流感病毒阳性PCR产物与H9亚型禽流感病毒(No.JF715045.1)100%同源,2份禽肺病毒阳性PCR产物与禽肺病毒株(No.AF187154)100%同源。本试验建立的H9亚型禽流感病毒和禽肺病毒二重RT-PCR检测方法具有特异、敏感、快速的特点,可以用于临床快速准确检测H9亚型禽流感病毒和禽肺病毒。 展开更多
关键词 H9亚型禽流感病毒 禽肺病毒 转录-聚合反应 检测
在线阅读 下载PDF
颈动脉硬化斑块环氧化物酶-2表达及其干预的实验研究 被引量:9
5
作者 刘恒方 杨期东 +2 位作者 苗旺 朱晓岩 黄晓松 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2006年第10期700-702,共3页
目的探讨通心络对兔颈动脉粥样硬化斑块环氧化物酶-2(COX-2)及Ⅰ型膜相关前列腺素E合成酶(mPGES-1)表达的影响。方法采用32只雄性新西兰大白兔,其中8只为正常对照组(1组),另24只建立兔颈动脉粥样硬化性狭窄的动物模型。将模型兔随机分... 目的探讨通心络对兔颈动脉粥样硬化斑块环氧化物酶-2(COX-2)及Ⅰ型膜相关前列腺素E合成酶(mPGES-1)表达的影响。方法采用32只雄性新西兰大白兔,其中8只为正常对照组(1组),另24只建立兔颈动脉粥样硬化性狭窄的动物模型。将模型兔随机分为颈动脉狭窄无干预组(2组)、塞来昔布治疗组(3组)、通心络治疗组(4组),每组各8只。药物干预2周后取狭窄段颈动脉及对侧相应段的颈动脉,行逆转录聚合酶链反应及Western印记(Westernblot)检测颈动脉斑块药物干预后COX-2及mPGES-1表达。结果2、3、4组颈动脉粥样硬化模型兔斑块的COX-2mRNA、mPGES-1mRNA及蛋白表达上调水平,与1组比较差异有显著性意义(P<0.05),3组、4组较2组下调水平差异有显著性意义(P<0.05),3组较4组下调更显著(P<0.05)。结论通心络可能有益于抗颈动脉粥样硬化斑块形成的作用。 展开更多
关键词 劲动脉疾病 环氧化物-2 通心络胶囊 逆转录聚合反应 模型 动物
在线阅读 下载PDF
结直肠癌组织中DNA甲基转移酶-1和钠氢交换子调节因子1的表达、临床意义及相关性 被引量:5
6
作者 高晓斌 武雪亮 +4 位作者 赵轶峰 聂双发 梁峰 刘小飞 张迎春 《中国医药导报》 CAS 2020年第2期20-24,共5页
目的探讨结直肠癌组织中DNA甲基转移酶-1(DNMT1)和钠氢交换子调节因子1(NHERF1)的表达、临床意义及相关性。方法选取2017年2月~2018年2月河北北方学院附属第一医院手术切除的结直肠癌(癌组)和癌旁正常组织(正常组)各50例,应用实时荧光... 目的探讨结直肠癌组织中DNA甲基转移酶-1(DNMT1)和钠氢交换子调节因子1(NHERF1)的表达、临床意义及相关性。方法选取2017年2月~2018年2月河北北方学院附属第一医院手术切除的结直肠癌(癌组)和癌旁正常组织(正常组)各50例,应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测两组DNMT1 mRNA和NHERF1 mRNA的表达,应用免疫组化(IHC)法检测两组DNMT1和NHERF1蛋白的表达,同时收集患者的临床资料,分析二者的表达与临床病理特征间的关系,应用Spearman检验分析两种蛋白间的相关性。结果qRT-PCR法结果显示:癌组中DNMT1 mRNA的表达水平明显高于正常组,而癌组中NHERF1 mRNA的表达水平则明显低于正常组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01);IHC法结果显示:癌组中DNMT1蛋白阳性表达率明显高于正常组,而癌组中NHERF1蛋白阳性表达率明显低于正常组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01);癌组中DNMT1和NHERF1蛋白的表达水平均与病变浸润程度、TNM分期、淋巴结转移及肝转移有关(均P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小和分化程度无关(均P>0.05);Spearman相关分析显示:癌组织中DNMT1与NHERF1呈负相关(r=-0.491,P<0.01)。结论DNMT1高表达和NHERF1低表达在结直肠癌的发生、发展中发挥重要作用,二者均可作为结直肠癌早期诊断和治疗监测的潜在分子生物学指标。 展开更多
关键词 DNA甲基转移-1 钠氢交换子调节因子 结直肠癌 逆转录聚合反应 免疫组化 临床意义
在线阅读 下载PDF
基质金属蛋白酶-9在人正常角膜及真菌性角膜溃疡中的基因表达 被引量:2
7
作者 武海军 赵桂秋 +2 位作者 陆晓和 白浪 钟彦彦 《国际眼科杂志》 CAS 2008年第8期1560-1562,共3页
目的:研究基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在人正常角膜及真菌性角膜溃疡中的基因表达,探讨MMP-9在真菌性角膜溃疡形成中的作用。方法:搜集24份真菌性角膜溃疡标本(溃疡组)及12份人正常角膜组织标本(对照组),其中1... 目的:研究基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在人正常角膜及真菌性角膜溃疡中的基因表达,探讨MMP-9在真菌性角膜溃疡形成中的作用。方法:搜集24份真菌性角膜溃疡标本(溃疡组)及12份人正常角膜组织标本(对照组),其中12份真菌性角膜溃疡组织和6份正常的角膜组织分别抽提组织总的RNA,以Primer5.0软件设计MMP-9的特异引物,并对标本RNA进行RT-PCR扩增,以MMP-9目的电泳条带与β-actin内参照条带灰度值比值代表相对表达量。分12份角膜溃疡组织和6份正常的角膜组织进行免疫组化检测MMP-9表达,通过免疫组化染色的灰度值进行统计学分析。结果:MMP-9在真菌性角膜溃疡中的表达明显高于正常角膜,且主要位于角膜上皮层、基底膜以及基质层。结论:真菌性角膜溃疡组织中MMP-9的基因表达明显上调。MMP-9在真菌性角膜溃疡的发生、发展及角膜穿孔中起着重要作用。加强MMP-9在真菌性角膜溃疡中的作用机制的研究,有望对真菌性角膜溃疡的治疗提供新的途径。 展开更多
关键词 真菌性角膜溃疡 基质金属蛋白-9 逆转录聚合反应
在线阅读 下载PDF
双氯芬酸的抗增殖作用与细胞内环氧酶-2表达水平的关系 被引量:4
8
作者 陈娜娜 吴曙光 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期590-592,597,共4页
目的检测体外培养的人肝细胞癌HepG2、Hep3B细胞和正常肝细胞系L02、QSG7701细胞以及正常人皮肤成纤维细胞Fb环氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)mRNA的表达,观察环氧酶抑制剂双氯芬酸(diclofenac)对上述细胞增殖的影响,以探讨双... 目的检测体外培养的人肝细胞癌HepG2、Hep3B细胞和正常肝细胞系L02、QSG7701细胞以及正常人皮肤成纤维细胞Fb环氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)mRNA的表达,观察环氧酶抑制剂双氯芬酸(diclofenac)对上述细胞增殖的影响,以探讨双氯芬酸抗增殖作用与细胞内COX-2表达的关系。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)检测各种细胞系COX-2mRNA的表达水平,采用cellcounting kit-8(CCK-8)细胞计数法测定药物作用72h后的细胞增殖活性,绘制生长曲线。结果肝细胞癌HepG2、Hep3B细胞和正常肝细胞L02均高表达COX-2mRNA,正常肝细胞QSG7701微弱表达COX-2mRNA,正常人皮肤成纤维细胞Fb不表达COX-2mRNA。双氯芬酸在10~200μmol·L^-1内呈浓度依赖性地抑制HepG2、Hep3B和L02细胞的增殖,作用72h的半数抑制浓度分别为76.41、35.21和87.44μmol·L^-1。双氯芬酸对QSG7701的抑制作用较弱,半数抑制浓度为170.23μmol-L^-1,对Fb细胞仅在浓度超过200μmol·L^-1时才表现出细胞毒性。结论环氧酶抑制剂双氯芬酸特异性地抑制COX-2mRNA高表达的肝细胞癌HepG2、Hep3B细胞和正常肝细胞L02的增殖.提示双氯芬酸通过COX-2途径起抗增殖作用。 展开更多
关键词 双氯芬酸 肝细胞癌 细胞增殖 环氧-2 逆转录聚合反应
在线阅读 下载PDF
形觉剥夺性近视豚鼠巩膜TGF-β_2表达与巩膜重塑 被引量:2
9
作者 闫磐石 张金嵩 张震 《山东医药》 CAS 北大核心 2005年第16期18-19,共2页
目的观察形觉剥夺性近视(FDM)形成中巩膜转化生长因子-β2(TGF-β2)表达的变化,探讨FDM的发病机制。方法出生3天豚鼠以半透明眼罩遮盖右眼2个月建立FDM模型,左眼作为对照,检测屈光度,A超测量眼轴。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测巩膜T... 目的观察形觉剥夺性近视(FDM)形成中巩膜转化生长因子-β2(TGF-β2)表达的变化,探讨FDM的发病机制。方法出生3天豚鼠以半透明眼罩遮盖右眼2个月建立FDM模型,左眼作为对照,检测屈光度,A超测量眼轴。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测巩膜TGF-β2mRNA的表达。结果FDM眼与对照眼比较眼轴增长,近视屈光度增加,巩膜TGF-β2mRNA的表达显著下调。结论TGF-β2影响细胞外基质及巩膜重塑,调控FDM形成。 展开更多
关键词 形觉剥夺性近视 巩膜 转化生长因子-β2(TGF-β2) 豚鼠 逆转录聚合反应 β2mRNA 近视屈光度 细胞外基质 FDM 发病机制 对照 检测 眼轴
在线阅读 下载PDF
H1和H3亚型禽流感病毒二重PCR检测方法的建立 被引量:8
10
作者 郭捷 谢芝勋 +5 位作者 彭宜 刘加波 谢志勤 庞耀珊 邓显文 谢丽基 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第12期31-34,共4页
为建立简便、快速同时检测H1和H3亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的方法,根据GenBank中H1亚型AIV-HA基因和H3亚型AIV-HA基因的序列,分别设计了2对针对H1AIV和H3AIV的保守基因序列的引物。应用这2对引物对混有H1AIV和H3AIV的... 为建立简便、快速同时检测H1和H3亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的方法,根据GenBank中H1亚型AIV-HA基因和H3亚型AIV-HA基因的序列,分别设计了2对针对H1AIV和H3AIV的保守基因序列的引物。应用这2对引物对混有H1AIV和H3AIV的模板进行二重PCR扩增,得到了2个特异性扩增条带,大小与试验设计相符的302bp(H1AIV)和626bp(H3AIV),而对其他亚型AIV和禽呼吸道病原体的PCR扩增结果均为阴性,敏感性测定结果表明,该二重PCR技术能同时检出50pg的H1AIV模板和26pg的H3AIV模板。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H1亚型 H3亚型 聚合反应
在线阅读 下载PDF
人翼状胬肉组织HMG-CoA还原酶和LDL受体基因的表达 被引量:1
11
作者 喻谦 柳林 王永志 《国际眼科杂志》 CAS 2009年第2期284-285,共2页
目的:研究LDL-R基因和HMG-CoA-R基因在翼状胬肉组织中的表达。方法:随机选取原发性和复发性翼状胬肉组织各10例,正常结膜组织10眼。实时荧光定量PCR技术分析结膜中HMG-CoA-R和LDL-R的相对mRNA含量。结果:原发性和复发性翼状胬肉中的HMG-... 目的:研究LDL-R基因和HMG-CoA-R基因在翼状胬肉组织中的表达。方法:随机选取原发性和复发性翼状胬肉组织各10例,正常结膜组织10眼。实时荧光定量PCR技术分析结膜中HMG-CoA-R和LDL-R的相对mRNA含量。结果:原发性和复发性翼状胬肉中的HMG-CoA-R及LDL-R的mRNA水平均明显高于正常球结膜组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:HMG-CoA-R和LDL-R基因可能参与翼状胬肉的发病过程。 展开更多
关键词 翼状胬肉 低密度脂蛋白受体 羟甲基戊酰辅A还原 实时荧光定量逆转录聚合反应 基因表达
在线阅读 下载PDF
禽流感病毒H9和N2亚型双重RT-PCR检测方法的建立 被引量:10
12
作者 徐倩 谢芝勋 +6 位作者 谢丽基 邓显文 谢志勤 罗思思 黄莉 黄娇玲 曾婷婷 《动物医学进展》 北大核心 2015年第1期11-15,共5页
为建立简便快速检测H9及N2亚型禽流感病毒(AIV)的方法,根据AIV H9亚型和N2亚型基因序列,分别设计了2对针对H9亚型AIV的HA基因和N2亚型AIV的NA基因的引物,建立了H9亚型和N2亚型AIV双重RT-PCR检测方法。对H9N2亚型AIV的RNA模板进行RT-PCR... 为建立简便快速检测H9及N2亚型禽流感病毒(AIV)的方法,根据AIV H9亚型和N2亚型基因序列,分别设计了2对针对H9亚型AIV的HA基因和N2亚型AIV的NA基因的引物,建立了H9亚型和N2亚型AIV双重RT-PCR检测方法。对H9N2亚型AIV的RNA模板进行RT-PCR扩增,可得到545bp H9基因特异性条带和341bp N2基因的特异性条带;对非H9亚型的N2亚型AIV进行扩增,则仅出现1个特异性扩增条带,即341bp N2基因条带;对非H9或N2亚型AIV和其他禽呼吸道病原体进行PCR扩增,结果均为阴性。结果表明该双重RT-PCR最低能检出100fg H9N2亚型AIV的cDNA模板。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9亚型 N2亚型 逆转录-聚合反应
在线阅读 下载PDF
晶状体上皮细胞mRNA定量分析中内部参照标准β-肌动蛋白RT-PCR反应条件的研究 被引量:1
13
作者 熊新春 苗娟 +3 位作者 席祖莲 张海江 胡义珍 魏厚仁 《临床眼科杂志》 2005年第5期469-471,共3页
目的 探讨晶状体上皮细胞mRNA定量分析中内部参照标准β-肌动蛋白RT-PC反应条件。方法 从培养的人晶状体上皮细胞中提取mRNA,应用设计的引物RT-PCR检测β-肌动蛋白,电泳分析53.2℃、53.9℃、55℃、56.2℃、57.4℃、58.6℃、59.8℃、6... 目的 探讨晶状体上皮细胞mRNA定量分析中内部参照标准β-肌动蛋白RT-PC反应条件。方法 从培养的人晶状体上皮细胞中提取mRNA,应用设计的引物RT-PCR检测β-肌动蛋白,电泳分析53.2℃、53.9℃、55℃、56.2℃、57.4℃、58.6℃、59.8℃、60℃、62℃、62.7℃不同的退火温度的扩增产物。结果 各退火温度条件下,β-actin扩增产物均形成长度为302bp片段,且未见非特异性扩增产物条带。退火温度为58.6℃时,β-actin扩增产物的条带最清晰。结论 采用本实验中所设计的引物联合58.6℃退火温度等实验条件所扩增的长度为302bp片段,清晰稳定,是晶状体上皮细胞mRNA定量分析中良好的内部参照标准。 展开更多
关键词 晶状体上皮 MRNA Β-肌动蛋白 逆转录-聚合反应 人晶状体上皮细胞 PCR检测 参照标准 定量分析 反应条件 RT
在线阅读 下载PDF
胃癌组织基质金属蛋白酶-7基因表达与门静脉血和腹腔转移的关系 被引量:1
14
作者 项和平 张长乐 《安徽医学》 2007年第3期176-179,共4页
目的研究胃癌组织基质金属蛋白酶-7(MMP-7)基因表达与胃癌门静脉血转移和腹腔转移及胃癌病理特征之间的关系,探讨其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(Reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测30例胃癌患... 目的研究胃癌组织基质金属蛋白酶-7(MMP-7)基因表达与胃癌门静脉血转移和腹腔转移及胃癌病理特征之间的关系,探讨其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(Reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测30例胃癌患者癌组织和正常黏膜MMP-7 mRNA,采用RT-PCR方法检测30例胃癌患者和10例腹腔良性疾病患者门静脉血和腹水中细胞角蛋白20的mRNA(CK20 mRNA)。结果胃癌组织MMP-7 mRNA阳性率60%(18/30),明显高于远端正常组织的11%(4/30),(P<0.001);胃癌组有MMP-7基因表达的门静脉血CK20 mRNA检出率达83.3%(15/18),显著高于无MMP-7基因表达的8.3%(1/12),(P<0.001);胃癌组有MMP-7基因表达的腹水CK20 mRNA的检出率为66.7(12/18),虽高于无MMP-7基因表达的41.7%(5/12),但(P>0.05);MMP-7基因表达与组织分化、TNM分期和肿瘤浸润深度相关(P<0.05);对照组门静脉血和腹腔冲洗液中CK20 mRN均为阴性。结论MMP-7基因表达与胃癌血行转移有关,参与了胃癌的浸润、转移过程,有助于判断预后,MMP-7基因表达阳性的胃癌患者应尽早行全身化疗。 展开更多
关键词 胃肿瘤 肿瘤细胞 逆转录聚合反应 细胞角蛋白-20 基质金属蛋白-7转移
在线阅读 下载PDF
鼻咽癌中环氧化酶-2的实验研究
15
作者 陈广理 王俊周 +1 位作者 郭晓民 杨明 《中国实用医药》 2014年第25期18-19,共2页
目的研究环氧化酶-2在鼻咽癌中的表达,探讨其与鼻咽癌的增生、浸润及转移的关系。方法在26例鼻咽癌及相应癌旁组织和10例正常鼻咽部黏膜组织中,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测环氧化酶-2 mRNA的表达。结果在鼻咽癌组织中环氧... 目的研究环氧化酶-2在鼻咽癌中的表达,探讨其与鼻咽癌的增生、浸润及转移的关系。方法在26例鼻咽癌及相应癌旁组织和10例正常鼻咽部黏膜组织中,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测环氧化酶-2 mRNA的表达。结果在鼻咽癌组织中环氧化酶-2 mRNA高表达,在正常鼻咽部黏膜环氧化酶-2 mRNA中低表达,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论环氧化酶-2与鼻咽癌的生长、浸润及转移有密切关系。 展开更多
关键词 鼻咽癌 环氧化-2 逆转录-聚合反应
在线阅读 下载PDF
兔角膜缘干细胞标志物α-烯醇化酶的表达与增龄的关系
16
作者 李强 马蕾 《山西医科大学学报》 CAS 2009年第5期442-444,共3页
目的了解角膜缘干细胞标志物α-烯醇化酶表达随着增龄的变化情况。方法选取新西兰白兔3月龄(青年组)、18月龄(中年组)和36月龄(老年组)各10只的角膜上皮组织,DMEM/F12培养液培养角膜缘干细胞。半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测α-... 目的了解角膜缘干细胞标志物α-烯醇化酶表达随着增龄的变化情况。方法选取新西兰白兔3月龄(青年组)、18月龄(中年组)和36月龄(老年组)各10只的角膜上皮组织,DMEM/F12培养液培养角膜缘干细胞。半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测α-烯醇化酶mRNA含量。结果α-烯醇化酶mRNA含量均数青年组为1.49,中年组1.33,老年组0.92,三组比较差异有统计学意义(F=289.981,P<0.01)。α-烯醇化酶mRNA月平均下降速度均数中年组为0.010,老年组0.023,两组比较差异有统计学意义(t=-7.860,P<0.01)。结论随着增龄,角膜缘干细胞α-烯醇化酶mRNA含量逐渐降低,α-烯醇化酶mRNA月平均下降速度表现为一个非线性的过程。 展开更多
关键词 干细胞 角膜缘 α-烯醇化 细胞培养技术 逆转录聚合反应
在线阅读 下载PDF
猪流行性腹泻病毒微芯片荧光定量RT-qPCR检测方法的建立
17
作者 曹洪志 王新杰 +6 位作者 高姗姗 孙晓明 邓飞 石艳萍 陈弟诗 陈昌英 李平顺 《动物医学进展》 北大核心 2024年第9期45-48,共4页
为了建立简便快速的猪流行性腹泻病毒(PEDV)荧光定量RT-qPCR检测方法,根据GenBank数据库公布的猪流行性腹泻病毒囊膜蛋白E基因,设计特异性引物和探针结合微芯片技术,建立微芯片荧光定量RT-qPCR检测方法。该方法除对PEDV检测为阳性外,对... 为了建立简便快速的猪流行性腹泻病毒(PEDV)荧光定量RT-qPCR检测方法,根据GenBank数据库公布的猪流行性腹泻病毒囊膜蛋白E基因,设计特异性引物和探针结合微芯片技术,建立微芯片荧光定量RT-qPCR检测方法。该方法除对PEDV检测为阳性外,对与其同源性较近的致病病毒的检测均为阴性;最低检测限为1 copies/μL,常规荧光RT-qPCR检测限为10 copies/μL。批内、批间重复性试验表明,Ct值变异系数均在2%以内,可对PEDV临床样本进行检测。建立的检测方法特异性好、敏感性高、检测时间短且重复性好,适用于临床检测。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 微芯片 实时荧光定量逆转录-聚合反应 囊膜蛋白
在线阅读 下载PDF
半定量RT-PCR检测猪延髓中色氨酸羟化酶2基因表达方法的建立
18
作者 马红娜 邓衔柏 +6 位作者 马勇江 何敏 习欠云 宁章勇 张桂红 卢培成 张曼玉 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第7期1-6,共6页
利用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,测定仔猪延髓组织中色氨酸羟化酶2(TPH-2)基因mRNA表达水平,以β-actin为内标,分析相对表达量及其与驱赶应激的关系。通过探讨和优化PCR体系中退火温度、Mg2+浓度和循环次数等参数,建立了检... 利用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,测定仔猪延髓组织中色氨酸羟化酶2(TPH-2)基因mRNA表达水平,以β-actin为内标,分析相对表达量及其与驱赶应激的关系。通过探讨和优化PCR体系中退火温度、Mg2+浓度和循环次数等参数,建立了检测延髓组织中色氨酸羟化酶-2基因mRNA表达的半定量RT-PCR体系。通过分析色氨酸羟化酶-2 PCR产物与β-actin PCR产物电泳后的灰度比值,可知驱赶应激对TPH-2基因mRNA表达量的影响。 展开更多
关键词 色氨酸羟化2 逆转录-聚合反应 应激
在线阅读 下载PDF
猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒双重RT-PCR检测方法的建立 被引量:8
19
作者 马超英 李宗文 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第9期71-75,共5页
为建立一种猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的快速、鉴别诊断方法,根据GenBank中已发表的2种病毒的基因组序列,选择病毒的保守基因各设计了一对特异性检测引物,建立了可以同时鉴别检测猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的双重RT-PCR... 为建立一种猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的快速、鉴别诊断方法,根据GenBank中已发表的2种病毒的基因组序列,选择病毒的保守基因各设计了一对特异性检测引物,建立了可以同时鉴别检测猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的双重RT-PCR方法。该方法能从猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒分别扩增出310bp和161bp的特异性片段,对2种病毒混合基因组同时扩增出310bp和161bp的特异性片段;该方法对猪乙型脑炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒的扩增结果均为阴性;该方法最低可以检出0.2pg病毒RNA含量。本研究建立的RTPCR方法具有良好的敏感性、特异性、重复性,在一个PCR反应体系中就可以准确、快速鉴别检测出猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒,可以用于临床病料的快速检测。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 逆转录-聚合反应 检测方法
在线阅读 下载PDF
小尾寒羊不同生长阶段肌球蛋白与肌球蛋白重链相关基因的变化
20
作者 薛宝玲 宋晓彬 《肉类研究》 2022年第9期27-31,共5页
为研究不同生长阶段小尾寒羊股二头肌中肌球蛋白与肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC)异构体相关基因的内在变化规律,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术对自然放牧条件下1... 为研究不同生长阶段小尾寒羊股二头肌中肌球蛋白与肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC)异构体相关基因的内在变化规律,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术对自然放牧条件下1~18月龄小尾寒羊股二头肌MyHC进行分离,测定其相关基因的相对表达量。结果表明:小尾寒羊股二头肌中肌球蛋白含量总体呈现上升趋势,9月龄达到最大值;MyHCⅠ基因相对表达量随着月龄的增加呈现下降趋势,MyHCⅡa基因相对表达量与月龄呈正相关,MyHCⅡb基因相对表达量总体呈现先减后增的趋势,MyHCⅡx基因相对表达量9月龄最低,12月龄最高;MyHCⅠ基因相对表达量在6~9月龄变化较大,说明6~9月龄生长变化较快,9~12月龄变化较小,说明9~12月龄生长缓慢。 展开更多
关键词 小尾寒羊 头肌 肌球蛋白基因 肌球蛋白 实时荧光定量聚合反应 烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 6 下一页 到第
使用帮助 返回顶部