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纤维二糖磷酸化酶表达条件的优化及其酶学性质研究被引量：2: 1; 作者彭念陈婷婷 +5 位作者王璐樊俊萍高玉杉冉小琴刘露露李勇昊《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第16期125-131,共7页; 纤维二糖磷酸化酶(cellobiose phosphorylase,CBP)磷酸化裂解纤维二糖为葡萄糖-1-磷酸,它是木质纤维素转化淀粉的关键酶。该研究将来源于Clostridium thermocellum YM4的cbp基因通过表达载体pET-28a(+)构建重组菌Rosetta(DE3)/pET-28a-... 展开更多; 关键词纤维二糖磷酸化酶重组表达大肠杆菌酶学性质生物催化; 在线阅读下载PDF 职称材料

海栖热袍菌极耐热纤维二糖磷酸化酶在大肠杆菌中的克隆和表达被引量：1: 2; 作者吴华伟《湖北农业科学》北大核心 2010年第11期2640-2642,共3页; 将来源于极端嗜热菌属海栖热袍菌(Thermotoga maritima)的编码纤维二糖磷酸化酶的结构基因cepA与新型热激质粒pHsh连接,得到重组质粒pHsh-cepA。将重组质粒pHsh-cepA转入大肠杆菌JM109进行表达。SDS-PAGE结果显示,该重组酶的分子量为90... 展开更多; 关键词纤维二糖磷酸化酶克隆表达热激载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛瘤胃产纤维二糖磷酸化酶细菌的筛选及产酶条件研究被引量：1: 3; 作者张青青樊海妍 +2 位作者徐新慧张璐璐陈红歌《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第4期113-117,共5页; 为了获得产新型纤维二糖磷酸化酶(CBP)的菌株,利用选择性培养基从牛瘤胃液中逐步分离纯化,筛选能以纤维二糖为唯一碳源生长的菌株,分别检测所筛选菌株的β-葡萄糖苷酶(βG)和CBP活力,并对其纤维二糖的利用方式(水解途径或磷解途径)进行... 展开更多; 关键词牛瘤胃纤维二糖纤维二糖磷酸化酶产酶条件; 在线阅读下载PDF 职称材料

二糖磷酸化酶及其在体外合成生物学中的应用被引量：1: 4; 作者李国玮游淳《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第21期284-291,共8页; 二糖磷酸化酶是以二糖为底物,催化磷酸向糖基转移,生成糖1-磷酸的一类酶。根据催化反应的立体化学过程可以分为保留型和翻转型,即供体底物二糖的异头构型可以在糖1-磷酸产物中保留或翻转。目前已发现的超过10种的二糖磷酸化酶均分布在... 展开更多; 关键词二糖磷酸化酶保留和翻转机制氢能酶燃料电池体外生物合成体系; 在线阅读下载PDF 职称材料

以纤维二糖为底物利用重组大肠杆菌合成海藻糖被引量：3: 5; 作者李新郑兆娟 +1 位作者岳泰稳欧阳嘉《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期180-186,共7页; 探讨以纤维二糖为底物合成海藻糖的可行性。首先克隆来自施氏假单胞菌A1501的otsA/otsB基因,外源导入Escherichia coli BL21(DE3)构建以葡萄糖为底物合成海藻糖的OtsAB途径。继而通过过表达E. coli本身的galU基因增加海藻糖合成前体物... 展开更多; 关键词纤维二糖纤维二糖磷酸化酶海藻糖 UDP-葡萄糖 OtsAB途径; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名纤维二糖磷酸化酶表达条件的优化及其酶学性质研究被引量：2: 1; 作者彭念陈婷婷王璐樊俊萍高玉杉冉小琴刘露露李勇昊; 机构重庆科技学院化学化工学院; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第16期125-131,共7页; 基金国家自然科学基金面上项目(22378033) 重庆市自然科学基金面上项目(CSTB2022 NSCQ-MSX0544) +2 种基金重庆市研究生科研创新项目(CYS23747)。; 文摘纤维二糖磷酸化酶(cellobiose phosphorylase,CBP)磷酸化裂解纤维二糖为葡萄糖-1-磷酸,它是木质纤维素转化淀粉的关键酶。该研究将来源于Clostridium thermocellum YM4的cbp基因通过表达载体pET-28a(+)构建重组菌Rosetta(DE3)/pET-28a-CBP用于表达CBP。对其诱导表达条件进行优化,结果显示当诱导温度、异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)浓度和诱导时间分别为15℃、0.2 mmol/L和12 h时CBP酶活力最高,为0.47 IU/mL。进一步利用Ni柱分离纯化出带有His标签的CBP,结果表明该重组酶分子质量为95 kDa,比酶活1.03 IU/mg;最适反应温度60℃,最适反应pH 6,半失活时间为60 min;金属离子Cu^(2+)显示出对该酶有强烈的抑制作用,然后依次是Zn^(2+)、Fe^(3+)、Ca^(2+)、Mn^(4+)(P<0.05);而K^(+)、Mg^(2+)和Na^(+)对该酶活力无显著性影响(P>0.05);最后对重组CBP的动力学参数进行了表征,K_(m)值为19.61μmol/mL,V_(max)值为1.19μmol/(mL·min)且K_(cat)值为21.38 s^(-1)。; 关键词纤维二糖磷酸化酶重组表达大肠杆菌酶学性质生物催化; Keywords cellobiose phosphorylase recombinant expression Escherichia coli enzymatic properties biocatalysis; 分类号 TS201.25 [轻工技术与工程—食品科学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名海栖热袍菌极耐热纤维二糖磷酸化酶在大肠杆菌中的克隆和表达被引量：1: 2; 作者吴华伟; 机构长江大学生命科学学院; 出处《湖北农业科学》北大核心 2010年第11期2640-2642,共3页; 基金长江大学博士科研启动基金(801100010112); 文摘将来源于极端嗜热菌属海栖热袍菌(Thermotoga maritima)的编码纤维二糖磷酸化酶的结构基因cepA与新型热激质粒pHsh连接,得到重组质粒pHsh-cepA。将重组质粒pHsh-cepA转入大肠杆菌JM109进行表达。SDS-PAGE结果显示,该重组酶的分子量为90kD,与理论值相符。基于热激载体pHsh的重组表达系统具有诱导表达简便、诱导方式廉价的优点,且重组酶热稳定性非常好。这对该酶的大规模发酵应用具有重要意义。; 关键词纤维二糖磷酸化酶克隆表达热激载体; Keywords cellobiose phosphorylase cloning expression heat-shock plasmid; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛瘤胃产纤维二糖磷酸化酶细菌的筛选及产酶条件研究被引量：1: 3; 作者张青青樊海妍徐新慧张璐璐陈红歌; 机构河南农业大学生命科学学院/农业部农业微生物酶工程重点实验室; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第4期113-117,共5页; 基金国家自然科学基金项目(31571775); 文摘为了获得产新型纤维二糖磷酸化酶(CBP)的菌株,利用选择性培养基从牛瘤胃液中逐步分离纯化,筛选能以纤维二糖为唯一碳源生长的菌株,分别检测所筛选菌株的β-葡萄糖苷酶(βG)和CBP活力,并对其纤维二糖的利用方式(水解途径或磷解途径)进行鉴定,获得产CBP的菌株,命名为BY-a。采用形态学观察、生理生化试验,结合16S r DNA序列分析,鉴定菌株BY-a为克雷伯氏菌属(Klebsiella)。对菌种产CBP的温度、时间、最适装液量和溶氧量进行初步优化,结果显示,BY-a菌株在装液量为30mL(250mL)、37℃振荡培养24 h时,产CBP活力最高。; 关键词牛瘤胃纤维二糖纤维二糖磷酸化酶产酶条件; Keywords bovine rumen fluid cellobiose cellobiose phosphorylase fermentation conditions; 分类号 S816.7 [农业科学—饲料科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名二糖磷酸化酶及其在体外合成生物学中的应用被引量：1: 4; 作者李国玮游淳; 机构天津科技大学生物工程学院中国科学院天津工业生物技术研究所; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第21期284-291,共8页; 基金国家自然科学基金项目(21778073)。; 文摘二糖磷酸化酶是以二糖为底物,催化磷酸向糖基转移,生成糖1-磷酸的一类酶。根据催化反应的立体化学过程可以分为保留型和翻转型,即供体底物二糖的异头构型可以在糖1-磷酸产物中保留或翻转。目前已发现的超过10种的二糖磷酸化酶均分布在糖苷水解酶和糖苷转移酶家族中。根据二糖磷酸化酶的功能设计体外生物合成体系,不仅可以用于制备高价值化学品,例如直链淀粉、肌醇、昆布二糖等,还可生产一些大宗产品,例如在氢能和酶燃料电池开发等方面已取得了进展。随着蛋白质工程的不断发展,对二糖磷酸化酶的研究越来越深入,相信未来二糖磷酸化酶将在体外生物合成平台扮演更重要的角色。; 关键词二糖磷酸化酶保留和翻转机制氢能酶燃料电池体外生物合成体系; Keywords disaccharide phosphorylase retaining and inverting mechanism hydrogen enzymatic fuel cells in vitro biosynthesis system; 分类号 Q814.9 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名以纤维二糖为底物利用重组大肠杆菌合成海藻糖被引量：3: 5; 作者李新郑兆娟岳泰稳欧阳嘉; 机构南京林业大学化学工程学院; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期180-186,共7页; 基金江苏省高校自然科学研究重大项目(16KJA220004) 江苏省高校优势学科建设工程资助项目(PAPD); 文摘探讨以纤维二糖为底物合成海藻糖的可行性。首先克隆来自施氏假单胞菌A1501的otsA/otsB基因,外源导入Escherichia coli BL21(DE3)构建以葡萄糖为底物合成海藻糖的OtsAB途径。继而通过过表达E. coli本身的galU基因增加海藻糖合成前体物质尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)-葡萄糖的含量,使海藻糖产量提高了3倍。通过添加井冈霉素抑制海藻糖的降解,进一步提高海藻糖的产量。在此基础上,过表达来自天然纤维素分解细菌Saccharophagusdegradans的纤维二糖磷酸化酶基因cepA,使重组大肠杆菌具有利用纤维二糖产海藻糖的能力。利用该重组大肠杆菌全细胞催化生产海藻糖,底物为20 g/L纤维二糖,并添加0.05 mmol/L的井冈霉素抑制海藻糖降解时,48 h后可生成1.3 g/L的海藻糖。本研究利用重组大肠杆菌以纤维二糖为底物合成海藻糖,证实了以纤维二糖为底物合成海藻糖的可行性,为纤维二糖来源精细化学品的生产提供了新的思路。; 关键词纤维二糖纤维二糖磷酸化酶海藻糖 UDP-葡萄糖 OtsAB途径; Keywords cellobiose cellobiose phosphorylase trehalose UDP-glucose OtsAB pathway; 分类号 Q936 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	纤维二糖磷酸化酶表达条件的优化及其酶学性质研究	彭念陈婷婷王璐樊俊萍高玉杉冉小琴刘露露李勇昊	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2024	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	海栖热袍菌极耐热纤维二糖磷酸化酶在大肠杆菌中的克隆和表达	吴华伟	《湖北农业科学》北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	牛瘤胃产纤维二糖磷酸化酶细菌的筛选及产酶条件研究	张青青樊海妍徐新慧张璐璐陈红歌	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	二糖磷酸化酶及其在体外合成生物学中的应用	李国玮游淳	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2020	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	以纤维二糖为底物利用重组大肠杆菌合成海藻糖	李新郑兆娟岳泰稳欧阳嘉	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2019	3	在线阅读下载PDF 职称材料