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二氢黄酮还原酶基因植物表达载体构建及对烟草的遗传转化研究 被引量:1
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作者 王延秀 张金文 +1 位作者 陈佰鸿 武禄光 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期147-151,共5页
以pBI121为基础载体,通过分步酶切连接分别构建组成型CaMV35S启动子、光合组织特异型PNZIP启动子驱动的DFR基因植物表达载体pBIDFR和pPNDFR;采用直接转化法将pBIDFR和pPNDFR导入根癌农杆菌菌株,采用pPNDFR/EHA105菌株对普通烟草进行了... 以pBI121为基础载体,通过分步酶切连接分别构建组成型CaMV35S启动子、光合组织特异型PNZIP启动子驱动的DFR基因植物表达载体pBIDFR和pPNDFR;采用直接转化法将pBIDFR和pPNDFR导入根癌农杆菌菌株,采用pPNDFR/EHA105菌株对普通烟草进行了遗传转化研究.在Kanamycin选择压力下获得了烟草转化不定芽和完整植株,经过PCR鉴定,该DFR基因已成功导入烟草基因组中. 展开更多
关键词 二氢黄酮还原酶基因 缩合单宁 植物表达载体 遗传转化
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蒺藜苜蓿二氢黄酮还原酶基因的克隆与原核表达
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作者 王延秀 张金文 +1 位作者 陈佰鸿 党兆霞 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期100-105,共6页
以蒺藜苜蓿(Medicargo trunctula)幼果为试材,采用RT-PCR方法克隆到二氢黄酮还原酶(DFR)基因的cDNA片段.该片段全长1 018bp,与GenBank中已注册的DFR基因同源性为99.8%,编码334个氨基酸;构建DFR基因原核表达载体pETDFR,DFR在原核表达系... 以蒺藜苜蓿(Medicargo trunctula)幼果为试材,采用RT-PCR方法克隆到二氢黄酮还原酶(DFR)基因的cDNA片段.该片段全长1 018bp,与GenBank中已注册的DFR基因同源性为99.8%,编码334个氨基酸;构建DFR基因原核表达载体pETDFR,DFR在原核表达系统中得到了高效表达,获得预期大小(38.1ku)的酶蛋白分子.原核表达产物经SDS-PAGE分析表明,表达蛋白的分子质量与预期一致. 展开更多
关键词 蒺藜苜蓿 二氢黄酮还原酶基因 基因克隆 原核表达
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